聚乳酸羟基乙酸载全氟溴辛烷-四氧化三铁包金纳米粒子双模态成像与光热治疗的体外研究

目的制备具有表面金壳以聚乳酸羟基乙酸(PLGA)为载体包载全氟溴辛烷(PFOB)和四氧化三铁(SPIOs)的纳米粒子,用于探究其体外超声显像和磁共振成像能力和光热杀伤肿瘤细胞效果。方法采用单乳化水包油(O/W)溶剂挥发法制备PFOB-SPIOs@PLGA纳米粒子,金种子生长法形成纳米粒子表面金壳制备;对其进行表征;通过CCK-8法评估纳米粒子的细胞毒性情况;采用超声和磁共振成像仪器观察纳米粒子的体外成像效果;近红外激光照射纳米粒子溶液观测升温效果;AM单染在激光共聚焦下观察光热杀伤肿瘤细胞效果。结果成功制备了PFOB-SPIOs@PLGA@Au纳米粒子,纳米粒子平均粒径(347±65.8)nm,粒径均一,分散性好;磁共振测得r2值为(465.23±30.39)mM-1s-1,具有体外磁共振T2成像效果;具有体外超声成像效果;近红外激光照射纳米粒子溶液10min最高温度可达45.2℃;CCK-8法检测纳米粒子对各组细胞存活率无明显影响。结论成功制备了粒径均一的PFOB-SPIOs@PLGA@Au纳米粒子,该纳米粒子具有较好的超声和磁共振T2体外成像效果和体外升温效果,且无明显细胞毒性。

全氟溴辛烷脂质纳米粒对大鼠缺血-再灌注模型中存活心肌的靶向显影研究

目的制备一种靶向识别存活心肌的全氟溴辛烷脂质纳米粒超声造影剂,观察其体内靶向显影效果.方法制备表面标记有生物素及荧光的全氟溴辛烷脂质纳米粒,检测其粒径、表面电位、浓度等理化性质.将生物素标记的单核细胞趋化蛋白‐1 (MCP‐1)抗体,罗丹明标记的亲和素、生物素及FITC标记的纳米粒依次注入大鼠缺血-再灌注模型体内,观察造影剂显影效果. 12 h后取心脏标本进行冰冻切片,并在荧光显微镜下观察荧光显示情况.结果自制全氟溴辛烷脂质纳米粒电镜下呈球形,分散均匀,粒径(172 .30 ± 52 .06) nm ,表面电位为(-33 .10 ± 6 .50) mV ,浓度为(2 .28 ± 0 .46)× 1011/ml .观察缺血-再灌注大鼠短轴切面,靶向造影后,前壁近内膜下心肌回声较造影前明显增强,而余室壁未见明显增强.取模型心脏冰冻切片后于荧光显微镜下观察,前壁心肌内可见大量纳米粒聚集成团,发出明亮的绿色及红色荧光.而余室壁心肌内未见纳米粒聚集,亦未见荧光显示.结论自制全氟溴辛烷脂质纳米粒能够对存活心肌进行靶向识别并增强显影,有望为临床上识别存活心肌提供新的影像学检测手段.

载Fe3O4全氟溴辛烷纳米粒增强超声显像的实验研究

目的 探讨载磁性纳米材料Fe3O4颗粒的全氟溴辛烷纳米粒（Fe3O4-PFOB）增强超声显像的效果.方法 将Fe3O4-PFOB纳米粒与RAW264.7 巨噬细胞孵育30 min、1 h后,分别进行光镜及体外超声检查.12只健康SD大鼠随机分为2组,分别于注射Fe3O4-PFOB及空白PFOB纳米粒前后进行大鼠肝脏超声显像,并用DFY超声图像定量分析诊断仪评价显像效果.结果 Fe3O4-PFOB纳米粒与巨噬细胞孵育1 h后可见大量Fe3O4-PFOB纳米粒被巨噬细胞吞噬,巨噬细胞吞噬纳米粒后能够增强超声回声信号.体内显像中,与空白PFOB纳米粒相比,Fe3O4-PFOB能够更好地增强大鼠肝实质超声显像效果,而且其增强显影时间延长.结论 膜壳装载Fe3O4颗粒的Fe3O4-PFOB纳米粒能够有效增强超声显像效果,有望实现一种造影剂多种模态显像.

胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂的制备及体外评价

目的制备一种胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂并评价其体外靶向性效果。方法用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、聚乙二醇(PEG)合成高分子聚合物PLGA-PEG-NHS并利用核磁共振氢谱检测;用PLGA-PEG-NHS和全氟溴辛烷(PFOB)以乳化挥发法制备包裹PFOB的PLGA纳米造影剂,然后连接Hedgehog抗体。透射电镜观察纳米造影剂的形态,动态光散射法测定其粒径、电位;气相色谱-质谱法测定纳米造影剂的包封率及载药量;透析法测定纳米造影剂的体外释放特性。用添加了纳米造影剂的培养液培养人胰腺癌细胞株SW1990和CFPAC-1,利用荧光显微镜和流式细胞仪定性和定量验证纳米造影剂的体外靶向能力。结果所制得的胰腺癌靶向纳米超声造影剂平均粒径为198.9nm,Zeta电位为-31.8mV,包封率(63.7±3.9)%,载药量(14.3±0.9)%,48h释药量为85.3%;体外细胞实验显示靶向造影剂与高表达Hedgehog抗原的SW1990细胞大量结合,而与不表达Hedgehog抗原的CFPAC-1细胞未见特异性结合。结论通过乳化挥发法制备的胰腺癌靶向纳米超声造影剂各项表征符合要求,并能特异性靶向Hedgehog高表达的胰腺癌细胞,有望成为胰腺癌诊断的超声造影剂。