全烟气暴露与烟气冷凝物染毒方式的卷烟烟气体外微核测试结果比较

采用VITROCELL系统建立了基于全烟气暴露的体外微核测试方法,并比较了全烟气暴露与烟气冷凝物染毒方式下卷烟主流烟气的体外微核测试结果。结果表明:该方法可以进行卷烟烟气的遗传毒性测试;在相同烟气剂量下,采用全烟气暴露方式测试的卷烟烟气遗传毒性大于烟气冷凝物染毒方式的测试结果;与传统的烟气冷凝物染毒方式相比,基于全烟气暴露方式的体外微核测试结果能够较全面地反映主流烟气的遗传毒性。

全烟气暴露下的卷烟烟气剂量测定

为表征全烟气暴露体外试验条件下的实际卷烟烟气剂量,利用石英微量天平(QCM)和气相色谱-质谱联用(GC/MS)技术建立了基于全烟气暴露的卷烟烟气剂量测定方法。利用QCM技术对全烟气暴露模块内沉积的烟气颗粒物的累积质量浓度进行了实时测定,利用GC/MS技术分析了QCM表面捕集的烟气颗粒物中烟碱的浓度。结果表明:(1)QCM技术可用于全烟气暴露下体外试验的卷烟烟气剂量测定;(2)烟碱浓度的测定结果与烟气颗粒物质量浓度具有较好的相关性(R2>0.85),烟碱可以作为一种准确表征卷烟烟气剂量的化学标志物。

不同焦油释放量卷烟全烟气气-液界面暴露致细胞毒性、炎症因子释放和细胞凋亡的研究

目的:探讨两种不同焦油释放量卷烟对人支气管上皮细胞的细胞毒性、炎症因子释放水平和细胞凋亡的影响。方法:选取国际标准化组织(ISO)规定抽吸参数下焦油释放量分别为每支9.4 mg的卷烟样品1和每支14.0 mg的卷烟样品2作为研究对象。实验分为洁净空气对照组和烟气染毒组。利用VITROCELL系统产生的洁净空气或稀释的主流烟气以气-液界面方式暴露染毒Beas-2b细胞,经计算洁净空气对照组剂量为0支卷烟产生的主流烟气,烟气染毒组剂量分别为0.12%支、0.27%支、0.57%支、1%支卷烟产生的主流烟气;利用中性红细胞毒性试验检测细胞存活率;ELISA法检测细胞培养液中的IL-6、IL-8释放水平;Annexin V-FITC/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡水平。结果:样品1和样品2产生的主流烟气均可引起Beas-2b细胞存活率降低,炎症因子IL-6、IL-8的释放水平和细胞凋亡率显著增加。在0.12%支的烟气剂量下,样品1与样品2烟气引起的细胞毒性、炎症因子释放水平和细胞凋亡率的差异无统计学意义;在0.57%和1%支的烟气剂量下,样品2的细胞毒性高于样品1。结论:两种不同焦油释放量卷烟样品均可引起细胞毒性、促炎症因子释放和细胞凋亡。在0.57%支~1%支烟气剂量范围内,具有高焦油释放量的卷烟烟气引起的细胞毒性强于低焦油释放量的卷烟烟气。

卷烟烟气暴露下AA549和BEAS-22B细胞促炎性因子的释放变化

为比较不同类型细胞对卷烟烟气诱导的促炎症反应的应答差异,采用中性红细胞毒性试验测试了卷烟烟气总粒相物(TPM)和全烟气(WS)对人肺腺癌细胞A549和人支气管上皮细胞BEAS-2B的细胞毒性效应;采用酶联免疫法(ELISA)分析了TPM和WS暴露后,A549和BEAS-2B促炎性细胞因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的释放水平。结果表明:BEAS-2B细胞较A549细胞对卷烟烟气的细胞毒性效应敏感。卷烟烟气暴露下A549细胞没有增加促炎性细胞因子IL-6和IL-8的释放;而BEAS-2B细胞在TPM和WS暴露下其IL-6和IL-8的释放显著增加。卷烟烟气诱导的促炎症反应存在细胞类型的差异。