应用全胚胎培养技术研究氟的发育毒性

本实验采用全胚胎培养（ＷＥＣ）技术研究了氟对体外培养４８小时大鼠胚胎的发育毒性作用。结果表明：氟浓度为５μｇ／ｍｌ时，仅对脏层卵黄囊（ＶＹＳ）血管形成产生抑制作用；１０μｇ／ｍｌ时，反映胚胎生长发育和形态分化的各项指标均明显低于对照组，畸胎率为５５．６％；２０μｇ／ｍｌ时，培养胚胎无一正常，死胎率达６６．７％；电镜观察可见ＶＹＳ上皮细胞表面的微绒毛变短、脱落等形态改变，溶酶体、线粒体等细胞器的结构也发生改变，提示ＶＹＳ的病理改变可能与氟的致畸机制有关。

小鼠着床后全胚胎培养方法的建立和应用

本文报导昆明种小鼠着床后全胚胎培养方法。

应用小鼠体外全胚胎培养方法研究多氯联苯同系物PCB_(153)对胚胎发育的影响

目的 探讨多氯联苯同系物PCB1 53 对胚胎生长发育的影响及其作用机制。方法 于体外将孕 8.5d小鼠胚胎置入不同浓度PCB1 53 ,应用植入后全胚胎培养技术研究PCB1 53 对胚胎生长发育的影响 ;透射电镜观察PCB1 53 对卵黄囊的损害。结果 PCB1 53 对胚胎发育具有明显影响且呈剂量 效应关系。 0 .1 0ng/ml组除卵黄囊循环稍差外 ,其余指标与对照组一致或差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;1 .0 0ng/ml组明显影响卵黄囊循环、头长、颅臀长、体节数、中脑、后脑、翻转、鳃弓和上下颌突等指标 ,与对照组比较P <0 .0 5 ;1 0 .0 0ng/ml组 ,各指标进一步降低 (P <0 .0 1 ) ,胚胎致畸率升高并出现死亡 ;电镜发现 ,PCB1 53 处理的各实验组卵黄囊超微结构遭到不同程度破坏。结论 PCB1 53 使胚胎发育迟缓、具有发育毒性和致畸性 ,作用的敏感部位主要是卵黄囊、头长、颅臀长、中脑和鳃弓 ;卵黄囊的超微结构损害与PCB1 53 致胚胎发育异常有关。

应用啮齿类动物全胚胎培养方法筛查致畸原的研究

啮齿类动物全胚胎培养是60年代国外发展起来用于检验胚胎发育是否正常的实验方法。70年代New 等对此项体外培养技术进行了较大改进,并用于筛查致畸原。本方法具有快速、经济等优点。为控制环境致畸物进入人体,提高人口素质,急需建立快速筛查致畸物的方法。我们跟踪国外先进技术建立了全胚胎培养方法的实验条件,实验操作常规及实验结果的评价方法;验证了方法的可靠性。结果表明,在早期头褶阶段(9.5天)的大鼠胚胎,体外培养24或48小时,胚胎的生长发育与体内同期胚胎的生长发育相似。应用全胚胎培养方法测试了经致畸实验证实有致畸作用的镉、过量维生素A以及经致畸实验证实有胚胎毒性、但无明显致畸作用的1,2-二氯乙烷、二硫化碳,以及文献报道有致畸作用的铅等工业毒物。就我们筛查的几种化合物看,本方法用于筛查工业致畸原是可行的。对染毒途径进行了探讨,我们认为经母体宫内染毒,取胚胎体外培养的实验方法,可作为快速筛查工业致畸物时首选的染毒途径。

全胚胎培养方法研究千里光碱对小鼠胚胎发育的影响

采用小鼠全胚胎培养模型,将8.5d小鼠胚胎在含有千里光碱的即刻离心血清中培养48h(千里光碱的终浓度分别为100、50、25和12.5μg.mL-1),观察千里光碱对胚胎生长发育(卵黄囊直径、颅臀长、头长和体节数)和组织器官形态分化(卵黄囊循环、尿囊、翻转、心、脑、尾神经管、视听嗅系统、腮弓、颌突和肢芽)的影响。结果显示,随千里光碱浓度的增加,胚胎的生长发育和组织器官形态分化受到的影响越来越严重,其中卵黄囊循环、心、视系统、嗅系统、下颌突和后肢芽的影响最为明显。这表明千里光碱对体外培养的小鼠胚胎有明显的毒性作用,说明妊娠期暴露于该化合物中会对胎儿具有潜在的毒性。

环磷酰胺对全胚胎培养小鼠胚胎的细胞学影响

目的与方法 :本实验采用全胚胎培养方法 ,建立了环磷酰胺致畸作用模型 ,并在此基础上利用流式细胞分析术对培养所得胚胎进行了细胞学观察与分析。结果与结论 :发现环磷酰胺所致胚胎畸形可能与其所引起的细胞周期改变及细胞凋亡有关。

硒、砷联合致畸作用的体外全胚胎培养实验研究

用体外全胚胎培养模型探讨了在硒和砷共存环境下,对旋转培养48h的大鼠胚胎(9.5d)的生长发育和器官形态分化所产生的联合作用。结果表明,硒、砷联合毒性的主效应呈相互拮抗作用(P=0.0001)。除细胞干重指标外,其它反映胚胎生长发育和器官形态分化的各项指标均有明显好转,与正常对照组比较没有显著性差异(P<0.05)。砷在高剂量时(3.0μg/mL),硒(0.5～2.0μg/mL)对砷的毒性无明显缓解作用,主要呈现砷的独立作用。

兔着床后全胚胎培养方法的建立

目的:建立用于发育毒物研究和评价的兔着床后全胚胎培养方法。方法:取怀孕第9天(gestation day 9,GD9)的孕兔胚胎,参照Carney和Naya的方法,剥离胚胎后单瓶培养,体外培养48 h后将发育情况与文献报道的结果进行对比;并用5.0mmol/L的甲氧基乙酸(methoxyacetic acid,MAA)作为致畸阳性物对所建立的培养方法作进一步验证,采用Carney建立的兔胚胎形态评分系统进行评分。结果:本研究中23个GD9兔胚胎体外培养48 h后,存活率为100%,头长平均增长2.15倍,卵黄囊闭合和胚胎弯曲情况、体节数、自发畸形率、形态评分均数等指标均与文献报道的体外培养发育情况相近,5.0 mmol/L的MAA显示对兔胚胎有发育毒性,包括卵黄囊闭合减少、头部肿胀、面部器官缺失、体节紊乱、尾神经管闭合不全等,形态评分低于溶剂对照(P<0.05)。结论:本研究所建立的兔着床后全胚胎培养方法是可行的。

植入后全胚胎培养模型的兴起与发展

综述了在筛检致畸物和探讨致畸机理等方面具有独特用途的植入后全胚胎培养（ＷＥＣ）模型；阐述了该模型的起源、基本方法和应用进展。从目前研究状况来看，ＷＥＣ是一种较好的体外方法，与免疫组织化学、分子生物学等技术相结合，可从细胞和分子水平上揭示胚胎正常或异常发育的机理。

采用全胚胎培养法研究酒精对胚胎发育的毒性影响

目的化学物质的毒性作用常因其在体内代谢而变化。为探讨酒精在代谢条件下的发育毒性，本研究应用植入后全胚胎培养技术研究了酒精对胚胎发育的影响。方法：孕９５天大鼠胚胎于体外条件下移植分离培养在含４０、１００、２０、４０ｍｇ／ｄｌ内含Ｓ９的即可离心大鼠血清培养基中连续培养４８小时，观察酒精对胚胎生长发育和器官形态分化的影响。结果：４０ｍｇ／ｄｌ＋Ｓ９组与对照组各指标无显著性差异，１００ｍｇ／ｄｌ＋Ｓ９组则导致胚胎的体长、ＤＮＡ、蛋白质含量及部分器官形态评分呈剂量相关的下降，但前脑、中脑评分并无影响。随染毒剂量增加，胚胎的绝大多数指标显著降低，胚胎致畸率和死亡率相应增高。结论：酒精在Ｓ９作用下转化为乙醛后，毒性作用的靶器官发生改变，表现为肢芽、心脏等器官发育异常为主，代谢产物乙醛也有一定的致畸作用。

硒、砷联合致畸作用的体外全胚胎培养实验研究

作者用全胚胎培养模型探讨了硒、砷联合对体外培养48h大鼠胚胎(9.5d)的发育毒性。3×4析因分析结果表明,硒、砷联合发育毒性的主效应呈拮抗作用(P=0.0001)。除胚胎干重指标外,其它反映胚胎生长发育和器官形态分化的各项指标均有明显好转,与对照组比较,没有显著性差异(P>0.05)。砷在高剂量(3.0μg/ml)时,0.5～2.0μg/ml硒对砷的发育毒性无明显缓解作用,主要呈现砷的独立作用。

大鼠着床后全胚胎培养中培养基的研究Ⅱ小牛血清和IGF－Ⅱ

大鼠着床后全胚胎培养中培养基的研究Ⅱ小牛血清和ＩＧＦ－Ⅱ张天宝，孙棉龄采用异种动物血清替代大鼠血清作为全胚胎培养（ＷＥＣ）培养基是目前的另一研究途径。一些学者对此作过不少研究，但尚未找到理想的替代品。另外也有一些学者试图找出促进胚胎生长发育的因素，以...

植入后全胚胎培养的培养基pH值改变对大鼠胚胎生长发育的影响

目的 探讨植入后全胚胎培养培养基最适pH值。方法 分离 9.5天龄Wistar大鼠胚胎 ,分别在实验组 (即不同pH :5 .5 ,6 .0 ,6 .5 ,7.0 ,7.5 ,8.0 ,8.5 ,9.0 )和对照组 (pH为 8.2 )的培养基 (1 0 0 %大鼠即刻离心血清 )中体外旋转培养4 8小时 ,观察pH值的改变对胚胎生长发育的影响。结果 与对照组比较 ,当培养基pH为 6 .5、6 .0和 9.0时培养胚胎的生长发育明显受到影响 (P <0 .0 5 ) ,胚胎畸形率和死亡率增高 (P <0 .0 5 )。当培养基pH为 5 .5时 ,培养胚胎死亡率达1 0 0 %。结论 全胚胎培养培养基pH条件改变 (过低或过高 )能够影响培养胚胎的生长发育。植入后全胚胎培养培养基最适pH值为 7.5～ 8.2。

兔着床后全胚胎培养方法及其研究进展

随着兔在发育毒性评价中的应用越来越广泛以及鼠着床后全胚胎培养技术作为体外替代方法的优势和广泛应用,兔着床后全胚胎培养技术在理论研究和实际应用中均具有重要价值。本文从兔全胚胎培养方法、胚胎形态评分系统、方法学的研究动态、在发育毒性研究中的应用情况以及该方法的优缺点等方面进行综述。

全胚胎培养方法及其在致畸研究中的若干进展

本文综述了WEC方法中有关培养基、代谢活化系统和胚胎发育的形态学评价方面的若干进展,对该法在致畸物筛检、致畸作用机理等研究中的应用作了概要介绍。从研究现状来看,该法是目前在致畸物或致畸因素筛检中一种较好的体外方法,尤其是在致畸作用机理研究方面有独特的价值;但无论是方法学还是应用方面都有待于改进和发展。

大鼠着床后全胚胎培养中培养基的研究：Ⅰ、人工合成培养基

大鼠着床后全胚胎培养中培养基的研究：Ⅰ、人工合成培养基张天宝，孙棉龄啮齿动物着床后全胚胎培养（ＷＥＣ）方法具有培养的胚胎处于器官形成的关键阶段，对致畸物的作用高度敏感；胚胎畸形和死亡的自发率与体内对照基本一致；消除了母体干扰因素及窝间的变异；以及周期...

应用全胚胎培养模型研究双酚A的胚胎毒性

目的：揭示双酚A（BPA）的发育毒性及其毒作用机制。方法：采用植入后全胚胎培养模型，将9．5d龄Wistar大鼠胚胎与含BPA的大鼠即刻离心血清共培养48h（BPA终浓度分别为0、20、40、60、80、100mg/L），观察双酚A对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果：随着BPA剂量的增加大鼠胚胎在体外的生长发育受影响越严重，呈现出明显的剂量－效应及剂量－反应关系。最大无作用剂量为40mg/L，≥60mg/L的BPA可诱发卵黄囊生长和血管分化不良、生长迟缓及形态分化异常，严重者出现体位异常、神经系统、鳃弓发育异常及小眼、小肢芽等畸形。结论：较高剂量BPA对体外培养的大鼠胚胎具有一定的胚胎毒性。BPA对卵黄囊胎盘的结构和功能受损可能是其发育毒作用的重要基础之一。

全胚胎培养模型中立刻离心血清的保存时间研究

体外大鼠全胚胎培养模型的实验结果表明，精心制备的立刻离心血清（ＩＣＳ），在－２０℃冰箱中保存６０ｄ然后使用，对离体胚胎的生长发育无不良影响。保存９０ｄ的ＩＣＳ对胚胎生长发育指标颅臀长和头长有明显的抑制作用，并且出现２只畸形。保存１２０ｄ的ＩＣＳ对反映胚胎生长发育和形态分化的各项指标均有明显的抑制作用，畸胎发生率达７７．８％，但无死胎。适当利用ＩＣＳ的保存时间，将具有一定的经济效益。实验结果还表明，溶血血清具有致畸性和胚胎毒性。