目的 观察槲皮素对大鼠全脑缺血/再灌注(I/R)损伤后海马CA1区病理学变化、神经功能、血脑屏障(BBB)损伤、活性氧(ROS)生成和炎性因子表达的影响。方法 216只SD大鼠被随机分为:假手术+vehicle组(sham组)、I/R+vehicle组(I/R组)、I/R+槲皮...目的 观察槲皮素对大鼠全脑缺血/再灌注(I/R)损伤后海马CA1区病理学变化、神经功能、血脑屏障(BBB)损伤、活性氧(ROS)生成和炎性因子表达的影响。方法 216只SD大鼠被随机分为:假手术+vehicle组(sham组)、I/R+vehicle组(I/R组)、I/R+槲皮素5 mg/(kg · d)组(低剂量组)及I/R+槲皮素10 mg/(kg · d)组(高剂量组)。I/R组、低剂量组和高剂量组采用4-VO法建立全脑I/R模型,缺血时间为15 min,sham组仅仅予以暴露双侧椎动脉以及颈总动脉后缝合。四组大鼠均在造模前3 d开始灌胃,sham组和I/R组均以0.1%的Tween80(1 ml/100 g)灌胃,低剂量组和高剂量组分别以0.05%、0.1%的槲皮素溶液(1 ml/100 g)灌胃,1次/d,持续至观察结束当天。再灌注24 h HE染色观察海马CA 1区形态学变化;再灌注12,24,48 h利用神经功能缺陷评分(NDS)评价神经功能,干湿重法检测脑含水量,伊文氏蓝法(Evan’ s blue,EB)检测BBB通透性;再灌注2,12,24 h DCFH-DA法检测海马细胞ROS含量;再灌注2,12,24,48 h real-time PCR法检测海马组织IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ mRNA水平,ELISA法检测海马组织和血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ表达。结果 与I/R组相比,低剂量组和高剂量组海马CA1区损伤减轻;NDS评分均显著高于I/R组( P <0.05);再灌注24,48 h,低剂量组和高剂量组伊文氏蓝含量和脑含水量较I/R组显著降低( P <0.05);再灌注2,12,24 h,高剂量组ROS含量均显著低于I/R组( P <0.05);高剂量组IL-1β mRNA,TNF-α mRNA,IL-6 mRNA在各时间点均较I/R组显著降低( P <0.05);低剂量组和高剂量组在24 h和48 h IFN-γ mRNA水平均较I/R组显著降低( P <0.05);与I/R组相比,低剂量组和高剂量组海马组织和血清IL-1β、TNF-α、IL-6在各时间点表达均显著降低( P <0.05);IFN-γ表达则在24 h和48 h较I/R组显著降低( P <0.05)。结论 槲皮素能够改善大鼠全脑I/R损伤后神经功能,减轻BBB损伤,减少ROS生成,抑制IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ的表达,减轻组织损伤。展开更多
目的探讨急性脑缺血/再灌注大鼠神经元细胞骨架蛋白时空动态变化。方法线栓法阻断大鼠大脑中动脉90 min后实现再灌注,在不同再灌注时间点观察及取材。尼氏染色观察神经细胞损伤,采用神经功能缺损评分和前肢放置实验评估神经功能;免疫组...目的探讨急性脑缺血/再灌注大鼠神经元细胞骨架蛋白时空动态变化。方法线栓法阻断大鼠大脑中动脉90 min后实现再灌注,在不同再灌注时间点观察及取材。尼氏染色观察神经细胞损伤,采用神经功能缺损评分和前肢放置实验评估神经功能;免疫组化染色、免疫印迹法观察细胞骨架成分微管相关蛋白2(microtubule associated protein 2,MAP2)、神经丝重链(neurofilament heavy chain,NF-H)的变化;透射电镜观察轴突、树突和神经丝亚显微结构。结果随着再灌注时间的延长,脑损伤和神经行为功能损害逐渐加重。纹状体损伤比皮层出现的更早、更严重。缺血区域的MAP2相关免疫反应强度降低,NF-H相关免疫反应强度升高。超微结构观察显示细胞骨架排列受损,密度降低。结论不同脑区对缺血/再灌注损伤的耐受性不同。神经元细胞骨架的主要成分对缺血和再灌注表现出动态反应,这可能进一步促进脑损伤和神经功能缺损。展开更多
文摘目的 观察槲皮素对大鼠全脑缺血/再灌注(I/R)损伤后海马CA1区病理学变化、神经功能、血脑屏障(BBB)损伤、活性氧(ROS)生成和炎性因子表达的影响。方法 216只SD大鼠被随机分为:假手术+vehicle组(sham组)、I/R+vehicle组(I/R组)、I/R+槲皮素5 mg/(kg · d)组(低剂量组)及I/R+槲皮素10 mg/(kg · d)组(高剂量组)。I/R组、低剂量组和高剂量组采用4-VO法建立全脑I/R模型,缺血时间为15 min,sham组仅仅予以暴露双侧椎动脉以及颈总动脉后缝合。四组大鼠均在造模前3 d开始灌胃,sham组和I/R组均以0.1%的Tween80(1 ml/100 g)灌胃,低剂量组和高剂量组分别以0.05%、0.1%的槲皮素溶液(1 ml/100 g)灌胃,1次/d,持续至观察结束当天。再灌注24 h HE染色观察海马CA 1区形态学变化;再灌注12,24,48 h利用神经功能缺陷评分(NDS)评价神经功能,干湿重法检测脑含水量,伊文氏蓝法(Evan’ s blue,EB)检测BBB通透性;再灌注2,12,24 h DCFH-DA法检测海马细胞ROS含量;再灌注2,12,24,48 h real-time PCR法检测海马组织IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ mRNA水平,ELISA法检测海马组织和血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ表达。结果 与I/R组相比,低剂量组和高剂量组海马CA1区损伤减轻;NDS评分均显著高于I/R组( P <0.05);再灌注24,48 h,低剂量组和高剂量组伊文氏蓝含量和脑含水量较I/R组显著降低( P <0.05);再灌注2,12,24 h,高剂量组ROS含量均显著低于I/R组( P <0.05);高剂量组IL-1β mRNA,TNF-α mRNA,IL-6 mRNA在各时间点均较I/R组显著降低( P <0.05);低剂量组和高剂量组在24 h和48 h IFN-γ mRNA水平均较I/R组显著降低( P <0.05);与I/R组相比,低剂量组和高剂量组海马组织和血清IL-1β、TNF-α、IL-6在各时间点表达均显著降低( P <0.05);IFN-γ表达则在24 h和48 h较I/R组显著降低( P <0.05)。结论 槲皮素能够改善大鼠全脑I/R损伤后神经功能,减轻BBB损伤,减少ROS生成,抑制IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ的表达,减轻组织损伤。
文摘目的:探讨参芎葡萄糖注射液对大鼠全脑缺血/再灌注(I/R)损伤后白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:将15只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血/再灌注模型组(I/R组)和参芎干预组(SI/R组),采用Pulsinelli-Brierley 4动脉阻断方法制作大鼠全脑I/R损伤模型,在全脑缺血15min后,再灌注72h,采血和断头取脑,采用RT-PCR方法检测海马IL-6m RNA的表达和用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清IL-6质量浓度。结果:与假手术组相比,I/R组IL-6 m RNA的表达及血清IL-6的含量明显增加(P<0.05);且SI/R组的含量明显低于I/R组(P<0.05)。结论:大鼠脑缺血/再灌注损伤后,IL-6的表达上调,参芎葡萄糖注射液能够减弱IL-6的表达水平,起到抑制脑I/R炎症损伤的作用。
文摘目的探讨急性脑缺血/再灌注大鼠神经元细胞骨架蛋白时空动态变化。方法线栓法阻断大鼠大脑中动脉90 min后实现再灌注,在不同再灌注时间点观察及取材。尼氏染色观察神经细胞损伤,采用神经功能缺损评分和前肢放置实验评估神经功能;免疫组化染色、免疫印迹法观察细胞骨架成分微管相关蛋白2(microtubule associated protein 2,MAP2)、神经丝重链(neurofilament heavy chain,NF-H)的变化;透射电镜观察轴突、树突和神经丝亚显微结构。结果随着再灌注时间的延长,脑损伤和神经行为功能损害逐渐加重。纹状体损伤比皮层出现的更早、更严重。缺血区域的MAP2相关免疫反应强度降低,NF-H相关免疫反应强度升高。超微结构观察显示细胞骨架排列受损,密度降低。结论不同脑区对缺血/再灌注损伤的耐受性不同。神经元细胞骨架的主要成分对缺血和再灌注表现出动态反应,这可能进一步促进脑损伤和神经功能缺损。