全自动免疫磁珠分选系统检测沙门氏菌

目的研究全自动免疫磁珠分选系统对国标沙门氏菌检测方法的改进效果。方法从肉鸡专项监测中选取106份样品,采用全自动免疫磁珠分选系统和GB 4789.4-2010《食品微生物学检验沙门菌检验》进行沙门氏菌对比检测。与国标法相比,全自动免疫磁珠分选系统取消了SC和TTB增菌,经BPW增菌后直接使用系统富集目标菌并接种显色平板。结果免疫磁珠法阳性检出率为32%,国标法阳性检出率为31%,二者无显著性差异(P>0.05)。但磁珠法取消了二次增菌的步骤,检测时间比国标法节省24 h,且平板上的单个菌落生长率和菌株特异性也更好。采用磁珠法检测的106份样品中,有34份样品检出可疑显色菌株,都有单个可疑菌落生长,最后均鉴定为目标菌沙门氏菌;采用国标法有38份样品检出可疑显色菌株,其中3份无单个可疑菌落生长经再次转种,最后有5株经鉴定为嗜水气单胞菌等干扰性杂菌,仅33株为目标菌沙门氏菌。结论全自动免疫磁珠分选系统特异性好、单个菌落生长率高且检测时间短,可以用于食品中沙门氏菌检验。

免疫磁珠分选系统在分离大鼠骨髓干细胞群中的应用

采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群。收集大鼠胫骨和股骨的骨髓细胞,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,Thy1.1单抗标记,间接MACS分离纯化Thy-1.1+干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+百分比,台盼兰拒染法检测细胞活力,计算回收率。结果表明分选后的Thy-1.1+细胞纯度达94.2%,回收率64.7%;分选后细胞活力为99.6%,与分选前99.8%无明显差异;分选前CD34+百分比为1.2%,与分选后1.3%无差异。MACS能有效分选大鼠骨髓Thy-1.1+干细胞群,所得细胞纯度高,细胞活力保持好。大鼠Thy-1.1抗原与CD34分子无明显相关性。

免疫磁珠分选系统在急性髓系白血病干细胞分离中的应用

目的:采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离人白血病骨髓CD34+、CD38-干细胞群。方法:收集人白血病骨髓,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,CD34、38磁性标记,MACS分离纯化CD34+、CD38-干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+、CD38-百分比,计算回收率。结果:分选后的CD34+、CD38-细胞纯度达72.6±3.2%,回收率85.8±1.2%。结论:免疫磁珠分选系统是一种有效的白血病干细胞分离提纯方法,所得细胞纯度比较高。

免疫磁珠分选系统在分离肝癌干细胞中的应用

目的为进一步研究肝癌干细胞的特性,应用免疫磁珠分选系统分离纯化肝癌细胞系Huh-7中的肝癌干细胞。方法采用EpCAM单克隆抗体包被的微小磁珠(平均直径≤50 nm)标记Huh-7细胞,通过免疫磁珠分选系统分离EpCAM(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)阳性的肝癌干细胞,以流式细胞术检测分离后的肝癌干细胞纯度,以台盼蓝染色法检测细胞活性。结果采用流式细胞仪检测分离前肝癌细胞中EpCAM阳性细胞比率为(13.3±1.106)%,分离后的肝癌干细胞中EpCAM阳性细胞比率达到(99.5±0.200)%,细胞存活率为(96.5±1.518)%。结论采用免疫磁珠分选系统分离肝癌干细胞操作简便、快速有效,为肝癌干细胞的进一步研究奠定了基础。

全自动微生物磁珠分选系统检测单核细胞增生李斯特菌效果研究

目的:研究全自动微生物磁珠分选系统对食品中单增李斯特氏菌的检测效果。方法:取400份自然样品,用磁珠分选系统和国标法对样品进行对比检测。结果:全自动微生物磁珠分选系统相较国标法对自然样品中单核细胞增生李斯特氏菌阳性检出率有一定程度提高。结论:全自动微生物磁珠分选系统简单易用,标准化程度高,可以和国标检测方法相结合以提高单增李斯特氏菌的检出率。

人牙髓干细胞体外分选分化的初步实验研究

目的体外培养人牙髓细胞，分选牙髓干细胞并诱导其分化。方法选择因正畸目的而拔除的健康完整双尖牙，酶消化法进行牙髓细胞培养，并进行来源鉴定。单抗Stro-1标记牙髓干细胞、免疫磁珠分选系统进行分选。矿化液定向诱导分选后的牙髓干细胞，比较诱导前后stro-1染色及改良Gomori钙钴法染色检测碱性磷酸酶（ALP）的改变。结果体外培养人牙髓细胞呈成纤维细胞样，抗波形丝蛋白染色阳性，抗角蛋白染色阴性。牙髓干细胞Stro-1检测阳性，牙髓细胞中干细胞阳性率约为10％。矿化诱导后细胞stro-1阴性、ALP阳性表达。结论采用免疫磁珠分选系统分离出人牙髓干细胞，初步验证干细胞分化潜能，为其后续生物学特性研究提供实验基础。