全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败解决方案

该文分析总结了Leica Bond Max全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败的原因,以及对常见人员操作失误与机器自身故障进行了总结,并提供了对应的解决方案。

观察全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)评价胃癌HER2状态的效果

探讨荧光原位杂交(FISH)和全自动免疫组化(IHC)评价胃癌表皮生长因子受体2(HER2)状态的效果。方法 对我院胃食管交界处腺癌或手术切除原发性胃石蜡组织标本展开FISH和IHC检测,288例标本采集时间为2019.1.1-2023.12.31,对FISH和IHC检测的胃癌HER2蛋白与基因表达情况加以分析。结果 228例标本中,50例(21.93%)表达为IHC2+与3+,178例(78.07%)表达为0+与1+。FISH检测HER2基因扩增病理病例34例,其中31例IHC+1病例FISH检测有27例扩增,未扩增病例共2例,来源于17号染色体多体;FISH检测扩增病例共2例,来源于IHC2+的19例;在检测FISH下可检出HER2扩增34例,其中低度、中度以及高度扩增分别有15例(44.12%)、10例(29.41%)、9例(26.47%);扩增病理中17号染色体非整倍性者17例,其中亚二体性、低多体性、高多体性各有1例(5.88%)、11例(64.71%)、5例(29.41%);HER2蛋白表达与WHO分化程度与Lauren分级密切相关,P<0.05;HER2基因扩增、Lauren分级、肿瘤分化程度三者之间关系密切,P<0.05。结论 HER2基因扩增中17号染色体多倍体发生比例与分化程度相对更高,HER2阳性率偏高,以肠型多见,IHC虽能够用于胃癌HER2的筛查,但若遇到无法明确的病例,可借助FISH检测进一步确诊,能够有效提升临床诊断的准确性。

全自动免疫组化仪在EBER原位杂交中的应用体会

临床上普遍采用免疫组化法来检测EB病毒,但免疫组化检测操作步骤繁琐,易受环境及人为因素的影响且结果不稳定等。随着科学技术的发展,各大中型医院病理科的仪器设备自动化程度越来越高,并且伴随医院规模的扩大,病理工作量不断增长,传统的手工操作已经逐步被全自动化仪器取代。目前全自动免疫组化仪主要应用于常规免疫组化工作,而原位杂交方面的应用尚未普及。

全自动免疫组化仪的应用体会

免疫组织化学技术在病理诊断与鉴别诊断中具有十分重要的作用。为保证免疫组化制片的准确性,可重复性与整体染色的一致性,全自动免疫组化染色机已被广泛使用。作者总结了全自动免疫组化染色机在使用过程中的体会,旨在通过加深对全自动免疫组化染色机的了解,以提高免疫组化制片质量。

全自动免疫组化和荧光原位杂交检测胃癌HER2状态的效果评价

目的观察全自动免疫组化(IHC)技术和荧光原位杂交(FISH)技术检测胃癌HER2状态的效果。方法选择本院2017年3月至2018年3月收治的80例行手术治疗的胃癌患者为观察对象,采集患者病理组织后应用IHC和FISH技术进行HER2状态检测,观察HER2基因扩增和蛋白表达情况。结果患者病理组织检查结果显示,FISH检测HER2基因扩增15例,阳性率为18.75%;IHC检测HER2蛋白表达28例,阳性率为35.00%;IHC检测阳性率明显高于FISH检测,差异有统计学意义(P<0.05)。HER2基因扩增和蛋白表达与Lauren分级、分化程度有明显相关性,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论IHC检测蛋白表达阳性率较高,两者联合检测可预测患者预后。

免疫组化阳性对照组织的选择

目的探讨在进行免疫组化质控时如何选择阳性对照组织。方法选择取材标本中良性扁桃体、阑尾组织和肿瘤旁正常的肝脏、肾脏、乳腺、结肠组织,切成0.3 cm×0.3 cm×0.4 cm大小的组织块,经过脱水、浸蜡、包埋等组织处理后制成阳性对照组织蜡块。将阳性对照块进行连续切片,厚度为4μm,进行CK5/6、P63、CD34、ER等40种抗体的免疫组化染色,对染色结果进行分析。结果40种抗体中扁桃体30种阳性,阑尾32种阳性,肝脏26种阳性,肾脏19种阳性,乳腺21种阳性,结肠28种阳性。结论扁桃体适合做标记鳞状上皮、淋巴系统以及血管和淋巴管相关抗体的阳性对照,阑尾适合做标记腺上皮、平滑肌组织、神经内分泌系统、血管和淋巴管相关抗体的阳性对照,其他正常组织分别适合做同类组织肿瘤标本的阳性对照。

回顾分析174例FISH和IHC全自动平台检测HER-2基因的状态

目的:分析全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)技术平台检测乳腺浸润性导管癌患者的HER-2蛋白(即C-erbB2蛋白)和HER-2基因扩增的结果的一致性,分析蛋白基因表达状况与临床病理特征的关系。方法:回顾性分析174例乳腺浸润性导管癌患者的临床资料,样本经手术、麦默通活检或穿刺取样。分析IHC和FISH检测结果;比较IHC检测C-erbB2蛋白与FISH检测HER-2基因的一致性;分析FISH与IHC检测结果与ER、PR及临床病理参数的关系。结果:FISH检测显示,HER-2基因无扩增表达(-)101例、HER-2基因有不同程度的扩增表达(+)73例;IHC检测显示,C-erbB2蛋白(-)、(+)、(++)、(+++)分别为4、15、114、41例;C-erbB2蛋白(+)和HER-2基因扩增(-)的一致率86.7%(13/15),C-erbB2蛋白(++)和HER-2基因扩增(-)的一致率70.1%(81/114),C-erbB2蛋白(+++)和HER-2基因扩增(+)的一致率92.7%(38/41),两者阳性结果具有高度一致性(Kappa=0.766,P<0.001);FISH检测结果与年龄有关(P<0.05),IHC检测结果与组织学分级有关(P<0.05),两种检测方法结果与肿瘤直径、淋巴结转移、ER、PR状态等均无关(P>0.05)。结论:可以利用一致性非常好的IHC和FISH两大平台来检测乳腺浸润性导管癌HER-2蛋白和基因的表达状态,以协助临床用药指导;IHC相对价格便宜,初步筛查蛋白结果,可以优先采用,对于结果为不确定的(++)IHC检测标本,再进一步应用FISH法明确HER-2基因扩增状态,以免误导临床;检测操作和阅片判读过程中规范化流程和高科技仪器设备起到很好的辅助作用。

浅谈大肠癌中错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的表达与其临床病理特征的关系

对包头地区大肠癌中错配修复(mismatch repair,MMR)基因MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的蛋白水平表达率与临床病理特征的相关意义进行分析。方法 对393例大肠癌组织采用LEICA BOND-MAX全自动免化染色机检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2四种MMR蛋白表达,其中出现一种及以上失表达则为MMR基因缺陷(dMMR),反之为MMR基因完整(pMMR),并对临床病理资料回顾性分析探讨。结果 (1)393例中dMMR组31例,失表达率约占7.9%,而pMMR组362例,约占92.1%。表达缺失类型MSH2和MSH6阴性 3例(0.8%),MSH6阴性4例(1.0%),PMS2阴性2例(0.5%),其中常见的共同失表达以MLH1和PMS2更常见,共有22例,约占5.6%。(2)MLH1和PMS2表达缺失在右半结肠发生率22.7%,高于左半结肠。(3)对大肠癌患者MMR蛋白表达未缺失与缺失组在病理特征中肿瘤直径、发生部位和分化程度方面进行对比分析,差异均有统计学意义(P<0.05),但在性别、年龄、组织类型、分泌黏液、侵犯深度、神经侵犯、脉管癌栓及淋巴结转移等方面对比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 错配修复蛋白与大肠癌部分临床病理特征存在一定的密切相关性,错配修复蛋白的表达对指导大肠癌患者的诊疗及判断临床预后可能有一定的参考价值。