新型全自动免疫组化染色机在临床病理工作中高标准化应用体会

探讨新型全自动免疫组化染色机在临床病理工作中高标准化操作的应用,为临床病理诊断提供有力依据。

简介全自动免疫组化染色机

免疫组化染色就是用免疫学方法进行组织化学染色,免疫组织化学技术是利用已知的特异性抗体与特异性抗原结合的特点,通过化学反应使标记于特异性抗体上的显色剂显现出颜色,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的技术。

Bond-Max全自动免疫组化染色机的日常维护

早期的免疫组化通过手工操作完成,由于整个制片过程复杂,耗时较长,技术人员在手工操作中对标本前处理的试剂孵育温度和时间难以准确把握,导致染色效果和重复性都较差[1-2]。近期医院引进1台Bond-Max全自动免疫组化染色机,免疫组化的所有步骤(烤片、脱蜡、抗原修复、阻断、标记一抗、二抗、显色直到复染)都可以自动完成,真正实现全自动操作,不仅节省人力,也确保免疫组化染色质量恒定。现分享我们对全自动免疫组化染色机在使用和维护中的体会和认识。

全自动免疫组化染色仪比较不同抗原修复液对p53的染色结果

p53是一种与人类肿瘤相关性极高的抑癌基因,其参与细胞周期的调控。准确检测p53的表达对肿瘤诊断、治疗及预后具有重要意义[1]。基因测序是检测其突变的金标准,但在实际工作中,免疫组化法检测p53表达最为简便实惠。抗原修复技术是影响免疫组化染色结果的重要因素,其中以抗原修复液的pH值和加热条件最为关键[2]。随着全自动免疫组化染色仪的广泛应用,免疫组化流程更加规范化,操作更加标准化,但抗原修复仍是一个亟待解决的问题。

观察全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)评价胃癌HER2状态的效果

探讨荧光原位杂交(FISH)和全自动免疫组化(IHC)评价胃癌表皮生长因子受体2(HER2)状态的效果。方法 对我院胃食管交界处腺癌或手术切除原发性胃石蜡组织标本展开FISH和IHC检测,288例标本采集时间为2019.1.1-2023.12.31,对FISH和IHC检测的胃癌HER2蛋白与基因表达情况加以分析。结果 228例标本中,50例(21.93%)表达为IHC2+与3+,178例(78.07%)表达为0+与1+。FISH检测HER2基因扩增病理病例34例,其中31例IHC+1病例FISH检测有27例扩增,未扩增病例共2例,来源于17号染色体多体;FISH检测扩增病例共2例,来源于IHC2+的19例;在检测FISH下可检出HER2扩增34例,其中低度、中度以及高度扩增分别有15例(44.12%)、10例(29.41%)、9例(26.47%);扩增病理中17号染色体非整倍性者17例,其中亚二体性、低多体性、高多体性各有1例(5.88%)、11例(64.71%)、5例(29.41%);HER2蛋白表达与WHO分化程度与Lauren分级密切相关,P<0.05;HER2基因扩增、Lauren分级、肿瘤分化程度三者之间关系密切,P<0.05。结论 HER2基因扩增中17号染色体多倍体发生比例与分化程度相对更高,HER2阳性率偏高,以肠型多见,IHC虽能够用于胃癌HER2的筛查,但若遇到无法明确的病例,可借助FISH检测进一步确诊,能够有效提升临床诊断的准确性。

淋巴瘤组织切片CD10全自动免疫组化最佳染色条件初探

CD10又称共同型急性淋巴细胞白血病抗原,表达于上皮和非上皮组织,在粒细胞、未成熟的淋巴细胞及生发中心细胞阳性[1-2]。在病理诊断中,该抗体主要用于一些淋巴瘤和白血病的分型和诊断,如弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lym-phoma,DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma,FL)、Burkitt淋巴瘤、前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)及滤泡性T细胞淋巴瘤等。由此可见,CD10免疫组化检测在淋巴瘤类型鉴别诊断中非常重要,但作者在工作中发现,较多基层医院的会诊切片CD10免疫组化染色效果欠佳,甚至影响诊断,分析其原因,除了组织蜡块固定等因素外,更多的原因是未摸索出适合本实验室的最佳染色方案。为此,本实验室在全自动免疫组化平台基础上进行该抗体临床实验室自建项目(laboratory developed test,LDT)实验,建立实验室内部质控方案,取得了良好的染色效果,现介绍如下。

浅谈做好全自动染色机苏木精染色系统质量管控的体会

随着自动化技术的全面普及和对HE染色质量高水平要求,全自动染色机以其高效、稳定、染色均一且节约人力的优点,逐步代替手工应用到常规HE染色中。全自动染色机苏木精染色系统质量的优劣是影响HE染色成功的关键因素之一。在实际工作中,苏木精染色系统的把控通常依靠技术人员的经验,缺乏统一标准。因此本研究通过室内质控指标的设置、监测苏木精pH值以及染色程序预警等方法,为提升苏木精染色系统的质量提供量化指标,更好地管控HE染色质量。

全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败解决方案

该文分析总结了Leica Bond Max全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败的原因,以及对常见人员操作失误与机器自身故障进行了总结,并提供了对应的解决方案。

全自动免疫组化染色仪与人工操作的比较

目的:探讨Autostainer全自动免疫组化染色仪在免疫组化中的应用。方法:选用常用的AAT、CerBb-2、CK、HBcAg、ER、PR、Ki-67等30多种一抗,使用统一的二抗,每种待测一抗用2种方法进行免疫组化染色,对比2种方法的实验情况。结果:使用全自动免疫组化染色仪染色背景干净,无边缘效应,着色均匀,阳性定位准确,均优于人工操作。结论:使用全自动免疫组化染色仪进行免疫组化染色不仅自动化程度高,省时省力,而且重复好,标准化程度高,提供更准确、更科学的实验结果。

优化全自动免疫组化仪切片贴片位置

随着免疫组化染色标准化、规范化的推行,全自动免疫组化仪以其操作简单、重复性高、染色流程标准化等优点被广泛应用。但免疫组化的染色步骤繁多,稍有失误就会影响染色结果,进而影响病理诊断的准确性[1-2]。设立对照是控制染色质量的重要措施之一,可以根据对照结果判断免疫组化染色过程中操作步骤的可行性、使用试剂的可靠性[3]。日常工作中,因组织贴片区域不恰当,尤其是阳性对照贴片位置偏离全自动免疫组化染色区域,不可避免的会出现一些染色假象,本文通过观察四种常用全自动免疫组化仪不同位置的多组织外对照免疫组化染色结果,探讨在不同染色平台组织贴片的最佳染色位置。

全自动免疫组化染色仪在临床病理的应用

目的探讨全自动免疫组化染色仪在临床病理工作中的应用。方法利用全自动免疫组化染色仪替代手工操作,对临床病理工作中60余种常用抗原指标进行检测。结果切片着色均匀、定位准确、背景清晰。结论全自动免疫组化染色仪可以避免各种手工操作误差对免疫组化染色的影响,有利于促进免疫组化的标准化,从而可以广泛地应用于临床病理。

全自动免疫组化染色仪染色失败的常见原因及改进措施

影响免疫组化染色结果的因素很多，如组织固定、抗原修复、抗体质量、显色过程、缓冲液pH值等。全自动免疫组化染色仪以其标准化、操作简便、自动化而逐渐被病理界广泛使用，但新设备的使用也带来一些新的问题。

全自动免疫组化染色仪与手工免疫染色的比较

目的观察比较Ventana全自动免疫组化染色仪与手工免疫染色的应用。方法选用常规应用的多种免疫试剂一抗和同种二抗,并采用机器操作与手工操作两种方法进行免疫组化染色,对比实验结果。结果应用全自动染色仪阳性染色着色均匀,定位准确,无边缘效应,背景清晰,各项指标均优于手工操作染色的组织。结论使用全自动免疫组化染色仪不仅标准化程度高,利于规范操作,更减少了手工操作染色带来的人为误差,能为临床病理诊断提供更准确的依据。

全自动免疫组化染色平台在临床病理检查中的应用

目的探讨全自动免疫组化染色仪在临床病理检查中的应用价值。方法用统一的二抗,同一种一抗对临床常用于检测乳腺癌的ER、PR、HER-2、Ki-67、p53等5种免疫组化抗体,分别采用全自动免疫组化仪(实验组)和手工操作法(对照组)进行免疫组化染色,对比两组检测的结果。结果实验组和对照组ER、PR、HER-2、Ki-67、p53等5种免疫组化抗体在边缘效应、特异性、着色情况、背景等均有差异。全自动免疫组化染色仪染色结果均匀,阳性定位准确,背景较清晰,无边缘效应,检测结果理想,优于手工操作法。结论全自动免疫组化染色仪工作比较稳定,染色效果优良,标准化程度高,能减少手工操作的误差,易于质量控制,可为临床诊断和治疗提供更加准确和科学的实验依据。

全自动免疫组化仪在标准化染色质量控制中的应用

目的:探讨全自动免疫组化仪在标准化染色质量控制中的应用。方法:选择广谱细胞角蛋白(CKpan)、雌激素受体(ER)、突触素(Syn)、上皮生长因子受体(EGFR)及C-erbB-2蛋白(HER2)等34种抗体(一抗),使用统一的第二抗体(二抗),分别采用手工操作和全自动免疫组化仪两种方法对340张病理切片进行染色,统计比较两种方法的染色优良率,同时回顾性分析室间质量控制染色评价结果。结果:两种方法染色质量结果比较:1手工操作的170张病理切片中染色质量优等101张(占59.4%),良49张(占28.8%),差20张(占11.8%),优良率为88.2%;2全自动免疫组化仪染色的170张病理切片中染色质量优等140张(占82.3%),良28张(占16.5%),差2张(占1.2%),优良率为98.8%;两种方法优良率比较差异显著有统计学意义(x^2=15.746,P<0.05);室间质量控制平均判读符合率为97.9%,染色符合率为96.0%,整体符合率为93.9%。结论:全自动免疫组化仪染色标准化程度高,染色均匀,定位准确,背景干净,无边缘效应,重复性好,能保证染色结果的准确与稳定,为临床病理诊断、判断预后和指导用药提供科学、准确及可靠的依据。

全自动免疫组化染色仪在胸腹水脱落细胞诊断中的应用价值

免疫组化技术已日益成为病理诊断不可缺少的重要辅助诊断方法，免疫组化结果的准确性和重复性至关重要。但免疫组化过程中操作步骤很多，容易受各种因素的影响，造成假阳性或假阴性，重复性差，给病理医师作出明确诊断带来困难，影响临床治疗。因此使用全自动免疫组化染色仪，将免疫组化的操作过程标准化，以达到免疫组化的质量控制要求，已成为病理技术质量控制的必然趋势。随着全自动免疫组化染色仪在活检组织中的成功应用，胸腹水脱落细胞的全自动免疫组化染色也正逐步开展。我们对20例液基细胞学检查怀疑恶性肿瘤的胸腹水进行离心包埋切片，并采用全自动免疫组化染色仪操作，效果显著，现报道如下。

全自动免疫组化染色仪使用的临床分析

目的总结Ventana全自动免疫组化染色仪使用过程中的工作特点,并比较其与传统手工操作免疫染色差异,分析其优势、探讨不足。方法选择同一时间段内乳腺癌、卵巢癌、甲状腺癌、消化系统癌、肺癌、肾癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤等免疫组化病例,用机器操作与手工操作两种方法进行免疫组化染色,对比实验结果。结果应用全自动免疫组化染色仪35种常用抗体中32种阳性染色着色均匀,定位准确,背景清晰,仅3种抗体(CA125、AAT、CD10)机器染色效果不佳,染色满意率:91.4%(32/35)。结论 Ventana全自动免疫组化染色仪区别于手工操作,运行过程中对某些细节步骤有特殊要求,其总体优势多:标准化程度优良、工作效率高、染色效果满意,其在临床病理诊断领域中将日益得到广泛应用。

探讨外院会诊玻片行全自动免疫组化仪染色异常的优化方法

免疫组化技术可以检测细胞来源、辨认细胞产物及了解分化程度等,为病理诊断和鉴别诊断提供客观依据,并为疾病治疗提供指导。在精准医疗时代,全自动免疫组化仪以其自动化程度高、操作简便、染色流程标准化等特点,在病理科广泛应用[1-2]。但全自动免疫组化仪染色也会遇到组织玻片非特异染色、染色偏弱或无法着色等问题[3],其中以外院送检的会诊组织在罗氏Ventana免疫组化染色时最为常见。

全自动免疫组化染色仪在抗肝纤维化中的应用研究

目的初步研究全自动免疫组化染色仪在临床病理工作中的应用。方法选取2012年1～4月使用姜黄素治疗的肝纤维化的小鼠12只,分为观察组和对照组。观察组6只小鼠肝脏组织使用全自动免疫组化染色仪进行免疫组化检测,对照组6只小鼠肝脏组织使用手工方法进行免疫组化检测,统计两组免疫组化切片着色均匀度、定位准确度、背景清晰度、单位组织面积抗体使用量、染色时间来评价两种免疫组化方法。结果观察组6只小鼠组织切片着色均匀5例,定位准确6例和背景清晰6例,均显著高于对照组(P均<0.05)。观察组抗体使用量为1.2 ng/cm2,平均染色时间15 min,均显著低于对照组(P均<0.05)。结论全自动免疫组化染色仪具有着色均匀、定位准确、背景清晰、节约抗体和节省时间等特点,是适合病理研究人员和操作人员使用的现代仪器。

全自动免疫组化仪的应用及影响其染色质量的因素探讨

目前,在免疫组织化学染色中,全自动免疫组化仪越来越多地得到应用。与传统手工操作方法相比,它具有精确、科学、灵活、方便、高效、环保的特点,优势明显。同时,新设备的使用也带来了很多新的问题,对染色结果存在很多新的影响因素。对全自动免疫组化仪的这些优势和不足进行探讨,有利于更好地保证染色质量,从而进一步保证诊断的准确性。