净信科技多样品动物组织研磨方法的优化

将小鼠的不同脏器用传统的组织研磨方法和近年来开发出来的全自动样品快速研磨机进行匀浆,产物提取总RNA后,用OligodT进行反转录,然后利用小鼠β-Actin基因的特异引物和Taqman探针进行定量,结果发现对于较难捣碎的组织如小鼠尾巴和肌肉,用传统的组织研磨方法和未优化的多样品组织匀浆方法制备的RNA产量没有差别;对于较易磨碎的组织如小鼠心、肺和胃组织,未优化的多样品组织匀浆方法制备的RNA产量反而不如传统的组织研磨方法;通过降低多样品组织捣碎仪匀浆时的温度或匀浆时加入提取RNA的RNAiso Plμs等优化措施后,多样品组织匀浆方法制备的RNA产量比传统的组织研磨方法有所提高,不同样品中获得的β-Actin RNA拷贝数趋于一致。利用优化的多样品组织匀浆方法制备RNA具有快速、和产量高、样品处理过程中人为因素少等优点,特别适合于大量RNA样品的制备。