全自动核酸检测分析系统在无偿献血者病毒检测中的应用

目的观察全自动核酸检测分析系统在无偿献血者血液乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和人类免疫缺陷病毒(HIV)检测中的应用效果。方法选取无偿献血者1229例作为研究对象,每位献血者采集2管静脉血,1管用于酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,另1管用于核酸检测。结果核酸检测、ELISA检测的HBV阳性率分别为2.03%、0.98%,差异有统计学意义(P<0.05);核酸检测、ELISA检测的HCV阳性率分别为1.22%、1.14%,差异无统计学意义(P>0.05);核酸检测、ELISA检测的HIV阳性率分别为0.24%、1.06%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论全自动核酸检测分析系统应用于无偿献血者血液HBV、HCV和HIV检测中具有较高的筛查准确率,与ELISA检测方法比较各具优势,2种方法联合应用可提高病毒检测的准确性。

应用全自动核酸检测系统MPLC-COBAS筛查献血员HIV-1 RNA

目的建立一套全自动核酸检测系统筛检献血员艾滋病病毒1型(HIV-1)核糖核酸(RNA)。方法应用MagNAPureLC(MPLC)系统提取核酸,COBASAmplicor系统进行基因扩增与检测,再应用国际标准品和临床标本验证MPLC-COBAS系统。结果该系统的检测灵敏度(95%CI)HIV1RNA病毒为45～67IU/ml,5124份标本混样检测结果为阴性,81份HIV抗体(抗HIV)酶联免疫吸附试验(ELISA)假阳性混样检测结果及6份追踪样本核酸检测结果均为阴性。结论该系统具有全自动检测、灵敏度高、特异性好的特点,可进一步扩大临床标本检测量,探索出切实有效的核酸检测系统进行献血员筛查HIV1RNA。

基于全自动核酸检测平台高敏HCV RNA定量检测性能评价

目的评价全自动核酸检测平台在高敏HCV RNA定量检测的性能及检测临床样本的能力。方法采用WHO国际标准品、HCV RNA假病毒样本、基因型血浆盘及临床样本,评价Pre-NAT II全自动核酸检测体系的正确度、精密度、线性范围、最低检出限/最低定量限、抗干扰能力等指标。结果Pre-NAT II全自动核酸检测体系的精密度<5%,最低检出限为15 IU/mL,线性范围为30~1.0×109 IU/mL。检测WHO国际标准品的实测对数值和理论对数值偏差小于±0.20(-0.04~0.19),对临床常见的内源性干扰物、抗病毒药物和自身免疫疾病样本具有良好的抗干扰能力,且检测临床样本结果与临床常用试剂检测结果一致性(符合率为100%)和相关性(r>0.98)强。结论Pre-NAT II全自动核酸检测体系准确性高、精密性好、定量范围宽、重复性好、抗干扰能力强,能够满足临床应用需求。

两种全自动核酸检测系统对乙肝核酸检测性能的比较

目的比较两种全自动核酸检测系统的检测结果,探讨国产乙肝核酸定量检测的检测性能。方法使用两种系统对相同血浆及血清样本的检测结果,进行系统间一致性和相关性研究。结果国产检测系统与进口检测系统罗氏相比,检验结果的符合率可达97%以上,决定系数在0.95以上,两系统间呈显著线性相关。结论国产乙肝核酸检测可实现全自动操作,且系统性能可与国际水平相当。

HBV DNA高敏检测试剂盒的性能验证和临床应用评价

目的对基于Pre-NAT全自动核酸提取系统的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA高敏检测试剂盒(以下简称高敏试剂)进行性能验证和临床应用评价。方法根据美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的试剂盒性能评价标准,采用高敏试剂分别对HBV标准品、临床HBV DNA高、中、低值样本及阴性样本进行定量检测,评价高敏试剂的精密度、正确度、分析测量范围、临床可报告范围和最低检测限等指标。同时采用高敏试剂和COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 48高敏病毒载量系统检测44份乙型肝炎患者血清,进行方法学比较并分析高敏试剂与COBAS高敏检测系统的相关性。结果高敏试剂检测高、中、低值标本的批内不精密度s_r分别为0.069、0.085、0.059,室内不精密度s_l分别为0.083、30.138、0.117。偏倚标准差为0.25,小于厂家声明的偏倚标准差0.45。分析测量范围广,在25～(1.0×109)IU/mL范围内成线性。样本的最大稀释度为1∶80,功能灵敏度为10 IU/mL,临床可报告范围为10～(8.0×1010)IU/mL。最低检测限为10 IU/mL,低于厂家声明的检测下限20 IU/mL。高敏试剂与COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 48病毒载量系统的相关性好(y=0.987 6 x+0.189 4,r=0.975 4,P<0.05)。结论所评价的高敏试剂的精密度和正确度高,分析测量范围和临床可报告范围宽,最低检测限低,与COBAS高敏检测系统的相关性好,具有良好的临床应用价值。