MPure-12全自动核酸纯化仪与Chelex-100法的比较

目的通过对DNA含量不同的血痕和多种类型生物学检材进行DNA提取和STR分型检测,探讨MPure-12全自动核酸纯化仪(MPure-12法)在DNA提取中的法医学应用价值。方法收集血痕、精斑、唾液等9种类型的生物学检材,应用MPure-12法和传统Chelex-100法提取DNA,经过PCR扩增和电泳,获取STR分型图谱。结果 MPure-12法对发根、口香糖、烟蒂、肌肉组织、唾液斑、血痕、精斑这些检材能够成功分型,唾液出现了个别等位基因丢失现象,接触拭子分型较差。Chelex-100法对血量为20μL、15μL、10μL、5μL、1μL制成的血痕均有完整分型结果,MPure-12法在血量为1μL时出现等位基因丢失现象。结论 MPure-12法适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法提取DNA的效果可能更优。仪器应用于DNA提取具有操作简单、快速、提取效率高,分型成功率高,减少人为污染等优势。

两种全自动核酸纯化仪的应用

目的探讨QIAsymphony SP和QIAcube全自动核酸纯化仪在微量和含抑制剂类检材中的DNA提取效果。方法应用QIAsymphony SP和QIAcube的不同纯化方法提取含有30、100、150和300个细胞制成的棉签拭子以及含有血红素、腐殖酸、猪油、土壤、铁锈和润滑油6种类型抑制剂的样本,将提取到的DNA模板进行PCR扩增和STR分型,比较不同纯化方法的提取效率和抑制剂去除能力。结果不同纯化方法的提取效果相当,30、100和300个细胞的样本提取得到的DNA,经扩增检测均有70.83%~100.00%的基因座检出,且均能很好地去除上述6种类型抑制剂。结论两种全自动核酸纯化仪均有良好的抑制剂去除效果,对于仅有30个细胞的棉签拭子,经过DNA提取扩增之后,样本也有较高的基因座检出率,能够满足基层DNA实验室工作的需求,实现实验室的标准化建设。