血液HBV全自动核酸筛查方法的应用研究

目的:探讨在加样仪上实现血液样本汇集,在RocheMPLC上全自动提取样本HBVDNA ,在COBASAM PLICOR上进行扩增和检测的方法,为血液HBV全自动核酸筛查提供应用依据。方法:在酶联免疫吸附实验(ELISA)筛查血液基础上,应用STAR2 0 0 0加样仪自编程序进行全自动血样汇集( 2 4人份) ,在MPLC上全自动方法提了样本核酸,应用PCR方法在COBASAMPLICOR进行扩增和检测分析结果,从检出限量及抗干扰能力方面进行考评。结果:用国际标准核酸质控品考评及深圳应用,表明全自动汇集,全自动核酸提取及扩增和检测HBVDNA 95 %检出限量为3 8.9IU/ml,95 %CI为2 1～3 2 3 ,2 0mg/dl胆红素、Ig/dl血色素及中等程度的脂血对结果无影响。通过对16 5 12个样本共688个汇集池分析,HBVDNA阳性8例,阳性率为0.0 4 9%。

应用全自动核酸检测系统MPLC-COBAS筛查献血员HIV-1 RNA

目的建立一套全自动核酸检测系统筛检献血员艾滋病病毒1型(HIV-1)核糖核酸(RNA)。方法应用MagNAPureLC(MPLC)系统提取核酸,COBASAmplicor系统进行基因扩增与检测,再应用国际标准品和临床标本验证MPLC-COBAS系统。结果该系统的检测灵敏度(95%CI)HIV1RNA病毒为45～67IU/ml,5124份标本混样检测结果为阴性,81份HIV抗体(抗HIV)酶联免疫吸附试验(ELISA)假阳性混样检测结果及6份追踪样本核酸检测结果均为阴性。结论该系统具有全自动检测、灵敏度高、特异性好的特点,可进一步扩大临床标本检测量,探索出切实有效的核酸检测系统进行献血员筛查HIV1RNA。

核酸检测系统应用于血站血液筛查的使用前确认

目的回顾性分析华益美核酸检测(nucleic acid technology,NAT)系统应用于血站实验室血液筛查的使用前确认的内容和方法,为采供血单位顺利开展核酸检测提供参考。方法按照《血站质量管理规范》、《血站实验室质量管理规范》及《血站核酸检测实验室质量保证指南》的要求进行使用前确认,主要包括检测设备的安装、运行、性能确认,实验人员资质和能力、试剂性能、核酸实验室质量体系文件、信息系统的确认,以及标本处置和风险评估等方面。结果通过对华益美核酸检测系统使用前的确认,为后续NAT有效、平稳开展提供了文件化的证据,提高了血站实验室核酸检测的工作质量。结论有效开展核酸检测系统使用前确认活动是常规核酸检测的前提,是降低实际运行过程中风险的有效手段。

两种血液核酸筛查系统的核酸筛查能力比较研究

目的:对比分析两种国产血液核酸筛查系统的血液核酸筛查能力,以保障患者输血安全。方法:收集并整理无偿献血者2018-2019年使用A血液核酸筛查系统(简称A系统)和2020-2021年使用B血液核酸筛查系统(简称B系统)共计215330份血液核酸标本检测结果资料,其中A系统检测标本104649份,B系统检测标本110681份;分析比较A系统与B系统血液核酸筛查中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、人类免疫缺陷病毒核糖核酸(HIV-RNA)和丙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HCV-RNA)反应性标本,以及标本有效拆分率和反应性率。结果:在215330份检测标本中A系统和B系统共检出159份反应性标本,其中HBV-DNA反应性标本154份,HIV-RNA反应性标本4份,HCV-RNA反应性标本1份。在A系统检测的104649份标本中,有效拆分率为25.11%,标本反应性率为0.54‰,B系统检测的110681份标本中,有效拆分率为44.98%,标本反应性率为0.93‰,两者有效拆分率与标本反应性率比较,差异均有统计学意义(x^(2)=19.554,x^(2)=11.402;P<0.05)。A系统2018年和2019年有效拆分率分别为36.76%和20.00%,标本反应率分别为0.49‰和0.57‰;B系统2020和2021年有效拆分率分别为41.04%和50.53%;标本反应率为1.00‰和0.87‰。结论:在两种国产血液核酸筛查系统的血液核酸筛查能力中,B系统有效拆分率、标本反应性率略高于A系统,且性能较优。

两种多重核酸血液筛查系统在血液筛查应用中的比较

目的通过对两种多重核酸血液筛查系统临床数据分析比较,为血站系统的使用提供参考。方法汇总2018年1-10月哈尔滨市血液中心采用北京万泰和罗氏多重核酸血液筛查系统进行检测的数据及部分阳性标本跟踪数据,统计分析这两个检测系统的性能差异及原因。结果万泰和罗氏核酸检测系统分别检测86 475份和36 641份标本,万泰系统的乙型肝炎病毒(HBV)假阳性率低于罗氏,罗氏系统的丙型肝炎病毒(HCV)和人类免疫缺陷病毒(HIV)假阳性率低于万泰;两个系统的HBV、HCV和HIV的阳性率基本一致。罗氏系统的无效率高于万泰系统。结论两个多重核酸血液筛查系统各有优劣,具有一定互补性,但均能从ELISA阴性标本中检测出一定数量的核酸阳性标本,检出率基本一致,均能提高输血安全性。

罗氏和浩源核酸检测系统的性能比较

目的:研究罗氏和浩源两套多重核酸检测系统对无偿献血者血液标本的检测结果,为本血站实验室的核酸检测系统使用提供参考。方法:汇总2020年1—12月南通市中心血站无偿献血血液标本,经两遍不同厂家试剂的酶联免疫吸附试验剔除双阳性标本后,并采用罗氏或浩源核酸系统进行病毒核酸检测的标本结果,对两套核酸检测(NAT)系统的拆分阳性率和标本阳性检出率进行统计分析。结果:回顾性统计得知罗氏核酸检测系统共检测标本84798例,混检阳性117例,拆分单检阳性标本67例,拆分阳性率57.26%,标本阳性检出率0.79‰;浩源核酸检测系统共检测标本12192例,混检阳性19例,拆分单检阳性标本11例,拆分阳性率57.89%,标本阳性检出率0.90‰。两套核酸检测系统相比较,拆分阳性率,差异无统计学意义(χ2=0.801,P>0.05),标本阳性检出率,差异无统计学意义(χ2=0.167,P>0.05)。结论:两套系统可以互为备用设备,用于血站献血者的血液筛查工作,提高临床供血的安全性。

血液核酸筛查在无偿献血人群中的应用

目的分析探讨血液核酸筛查在无偿献血人群的应用。方法研究纳入齐齐哈尔地区2019年1月—2019年10月38054名无偿献血者,观察本地区无偿献血者HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA检测的阳性率从而评价核酸检测的价值。结果献血员样本38054份中酶免合格样本37513份,经血液核酸筛查系统检出22份核酸反应性标本,包括HBV DNA 21例,HCV RNA1例,未检出HIV RNA。核酸检测22815份样本,共检出14例HBV反应性样本和1例HCV反应性样本,筛查阳性率为0.66‰,拆分阳性率为44.12%。结论经血清学ELISA检测合格的血液仍存在输血传播疾病的风险,主要是HBV。因此,核酸检测技术在无偿献血者血液筛查中的应用,可以最大限度地防止输血疾病的传播,使血液筛查质量显著提高,大幅度的提高献血的安全性。

比较两种核酸检测系统检测能力的结果分析

目的分析比较罗氏和诺华核酸试剂的核酸检测(NAT)能力。方法同时运用罗氏和诺华系统对262例无偿献血者血液标本及10例卫生部室间质评(NCCL)核酸标本进行检测,统计分析比较阳性检测率。结果 245例酶联免疫吸附实验(ELISA)检测阴性的献血者标本中,罗氏和诺华系统分别检出1例和4例NAT阳性,其中仅有诺华1例鉴别实验鉴别为HBV,其余均未能鉴别;17例ELISA检测阳性的标本中,运用罗氏系统检测,11例HBs Ag阳性的标本检出5例NAT阳性,5例抗-HCV阳性的标本检出3例,1例抗-HIV阳性的标本未检出,10例NCCL标本全部正确检出;运用诺华系统检测,上述ELISA阳性标本分别检出3例、3例和0例,NCCL标本也全部正确检出。结论两种核酸检测系统在检测能力上各有优势,均能较好地胜任日常的检测工作。

BacT／ALERT筛查浓缩血小板6年的经验及对过期的浓缩血小板的额外检测以评估假阴性结果的频率

背景及目的 大约每2000单位的血小板有1单位被细菌污染，BacT／ALERT全自动血液培养系统可以用于筛查细菌污染的浓缩血小板。材料及方法资料收集自1998年5月至2004年5月，这期间检测的血小板数量为36896单位，其中的大部分为4份全血白膜层制备的。在全血采集或单采血小板后的当天，5ml～10ml量的血小板样品无菌转移到BacT／ALERT培养瓶内，以检测需氧菌。在整个血小板保存期内（6．5天）监测样品的细菌生长情况。当出现阳性信号时，

石家庄地区2012-2014年献血人群NAT检测情况分析

目的为进一步提高血液安全性,降低输血感染风险,分析在石家庄地区献血者中开展血液传染病毒核酸检测(NAT)的必要性和可行性。方法应用浩源核酸检测系统,对经ALT及两遍HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒螺旋体ELISA检测结果均呈非反应性的287 728份标本,进行HBV DNA、HCV RNA和HIV-1 RNA-3项联合NAT筛查,初筛采用8人份混样法,对检出某项有反应性的混样池进行单人份拆分检测。结果 ELISA检测非反应性的287728份标本,共检测42 472个混样池,检出209个HBV DNA反应性混样池,混样池阳性率为4.92‰;拆分结果为84例HBV DNA阳性,检测阳性率为0.29‰,所有标本中无HCV RNA和HIV-1 RNA的检出。结论核酸检测可缩短血液病毒的检测"窗口期"并有效降低隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的发生几率,进一步提高血液安全性。

国产核酸检测试剂在不同检测系统中的应用

目的:评价同一种国产试剂在不同核酸检测系统进行核酸扩增技术(NAT)检测的应用效果。方法:将97 034人份ALT及酶免双试剂检测阴性的无偿献血者血液标本分为A、B两组进行HBV、HCV、HIV三项联合核酸定性检测,试验均采用上海浩源生物试剂进行8人份混样核酸检测。A组:采用全自动加样仪、核酸提取仪和实时荧光PCR仪检测系统。B组:利用CHITAS及实时荧光PCR仪检测系统。分析比较两组的操作性、运行时间及阳性检出率。结果:A,B两组从操作上比较,A组的手工操作步骤多于B组,B组的自动化程度高于A组。如当天混样/单样测试数不大于48,则B组快于A组。如大于48且不大于96,则两者运行时间基本一致。两组的NAT阳性检出率分别为0.030%,0.043%,两组比较差异无统计意义(P>0.05)。结论:采用同一种国产检测试剂,分别在不同核酸检测系统进行检测,试验结果相关性良好,两者在使用性能、检测结果方面均较稳定;国产检测试剂质量和检测系统的自动化程度已经达到较高水平,但和部分进口产品相比仍有些许差距,我们期待其可以进一步加强,以更好地提高检测效率。

罗氏核酸检测系统性能验证

目的:验证全自动核酸血液筛查系统Cobas-s 201对HBV DNA/HCV RNA/HIV RNA的实时检测满足预期使用要求,符合《血站实验室质量管理规范》、《血站技术操作规程》(2015版)等相关标准的要求。方法:对Cobas-s 201检测HBV DNA/HCV RNA/HIV RNA的分析灵敏度、重复性、抗交叉污染、抗干扰、样本稳定性性能进行验证,并与厂商声明和相关的质量标准进行比较。结果:分析灵敏度、重复性、抗交叉污染、抗干扰、样本稳定性性能验证满足要求,与乌鲁木齐市血液中心比对数据结果符合。结论:Cobas-s 201核酸检测系统满足血站对核酸检测的相关要求。