全菌抗原检测禽霍乱血清抗体ELISA方法的建立

采用C48-1全菌抗原烘干包被聚苯乙烯微量反应板,建立了检测禽霍乱血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被浓度为0.5×108cfu/mL,被检血清最佳稀释度为1∶800,确立了用于定量检测ELISA效价的回归方程:y=1.611 2+0.431 4x(r=0.96)。通过阻断试验、交叉试验、重复试验等方法证明本方法在特异性、灵敏性、稳定性上均达到了较为满意的结果,且易于操作,适用于疫病诊断和大规模的血清流行病学调查。

鸭疫里默氏杆菌抗体检测的全菌体抗原间接ELISA方法的建立

本研究建立了检测鸭疫里默氏杆菌(Rimerrlla anatipestifer,RA)抗体的全菌体抗原间接ELISA方法,最佳血清稀释倍数为1:100。以RA1的甲醛灭活全菌体为包被抗原,棋盘滴定法试验确定其最适抗原包被浓度为5×108CFU/mL。与全菌体裂解抗原和重组P25蛋白为包被抗原的间接ELISA方法相比较,三者均可检测不同血清型RA标准阳性血清,结果符合性良好。用该方法检测雏鸭接种鸭疫里默氏杆菌蜂胶灭活疫苗后血清抗体水平的变化,发现免疫后10天抗体水平开始上升,二免后10天抗体水平达到峰值。