全蝎酶解液最佳灭活工艺的研究

目的:研究全蝎酶解液的最佳灭活工艺。方法:以灭活温度、时间和pH值为考察因素,设计正交试验,用考马斯亮蓝法和改良Lowry法相结合测定相对寡肽含量,以灭活后相对寡肽含量和灭活前相对寡肽含量差的绝对值为指标,选择最佳灭活工艺。结果:以实验方案A1B2C2所得相对寡肽含量差最低。结论:在pH值为1.5的环境下,以温度为65℃,灭活25 min的灭活工艺最佳。

高效毛细管电泳指纹图谱法检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的实验研究

建立了用高效毛细管电泳指纹图谱法来检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10k Da)的分析方法。采用未涂层弹性熔融石英毛细管柱(93 cm×0.75μm),有效柱长为79 cm;二极管阵列检测器;50 mbar压力进样10s;运行电压为-30 kV;柱温为20℃;运行时间为60 min;考察不同检测波长、缓冲溶液种类、pH、浓度等对色谱峰的影响,并对10批样品做了相似度评价。在缓冲溶液浓度为0.2 mol·L-1、pH=5.0硼酸缓冲溶液时响应值较高,谱图效果最好;检测波长为220 nm时出峰较多、吸收好,初步建立了以25个峰为共有峰的指纹图谱。结论:25个峰的高效毛细管电泳指纹图谱共有模式可以作为全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的鉴别方法。

全蝎酶解液超滤物对三种细胞抗肿瘤活性比较研究

目的:比较全蝎酶解液>10kDa分子量段超滤物对喉癌Hep-2、肺腺癌A549、乳腺癌MCF-7三种细胞的抗肿瘤抑制作用。方法:根据张盼盼^([1])等人方法进行酶解,经过10kDa超滤膜滤过,采用MTT法探究不同浓度超滤物对三种癌细胞的抑制作用。结果:药物对喉癌Hep-2的抑制作用比对肺腺癌A549的抑制作用强,在实验设置浓度内药物对乳腺癌MCF-7的抑制作用先增强后降低。