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八氯腺苷对A549和H1299细胞周期的影响及机制探讨
1
作者
范芳
安国顺
+2 位作者
李淑艳
倪菊华
贾弘禔
《贵州医药》
CAS
2014年第9期771-775,共5页
目的八氯腺苷对肺癌细胞株A549和H1299细胞增殖及细胞周期的影响及其机制探讨。方法 A549和H1299经10.0μmol/L八氯腺苷处理后,MTT法检测细胞生长和增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测DNA-PKcs、γ-H2AX、Ku80、Ku70及T...
目的八氯腺苷对肺癌细胞株A549和H1299细胞增殖及细胞周期的影响及其机制探讨。方法 A549和H1299经10.0μmol/L八氯腺苷处理后,MTT法检测细胞生长和增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测DNA-PKcs、γ-H2AX、Ku80、Ku70及TopoⅠ的表达情况。结果 MTT法检测结果显示,用10.0μmol/L八氯腺苷分别处理A549、H1299细胞24、48、72h后,A549、H1299细胞生长被抑制;流式细胞分析则显示,A549、H1299细胞G2/M期细胞数增多;Western blot结果表明,γ-H2AX的表达均增加,DNA-PKcs蛋白的表达均下降,而Ku80、Ku70的表达未见明显变化;经八氯腺苷处理后TopoⅠ蛋白在A549细胞中的表达逐渐增加,而在H1299细胞中的表达却逐渐下降。结论八氯腺苷可抑制A549和H1299细胞生长,诱导细胞发生G2/M期阻滞,其机制可能与DNA-PKcs表达下调有关。在A549细胞中TopoⅠ可能通过p53依赖途径介导DNA损伤修复,从而引发对细胞的毒性作用;而在p53缺失的H1299细胞中可能是通过其它途径调控细胞周期。
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关键词
八氯腺苷
细胞周期
DNA依赖蛋白激酶催化亚基
拓扑异构酶I
下载PDF
职称材料
八氯腺苷诱导SH-SY5Y和SK-N-SH细胞G_2/M期阻滞的分子机制不同
被引量:
4
2
作者
朱玄
安国顺
+3 位作者
李淑艳
潘颖
倪菊华
贾弘禔
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期584-590,共7页
为探索八氯腺苷的抗肿瘤作用机制,以神经母细胞瘤SH-SY5Y和SK-N-SH细胞为对象,采用四唑盐比色实验(MTT法)证明,八氯腺苷具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性.流式细胞分析显示,10 μmol/L八氯腺苷作用48 ...
为探索八氯腺苷的抗肿瘤作用机制,以神经母细胞瘤SH-SY5Y和SK-N-SH细胞为对象,采用四唑盐比色实验(MTT法)证明,八氯腺苷具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性.流式细胞分析显示,10 μmol/L八氯腺苷作用48 h后可导致靶细胞生长停滞于G2/M期;SH-SY5Y细胞发生明显细胞凋亡,但SK-N-SH细胞却未见凋亡.Hoechst 33342染色显示,SK-N-SH细胞发生了核分裂异常.蛋白质免疫印迹分析证明,10μmol/L八氯腺苷处理SH-SY5Y 48~72 h后,G2检验点调节蛋白ATM、Chk1、Cdc25C和Cdc2磷酸化形式明显上调,同时伴有caspase-3的激活,提示SH-SY5Y细胞发生了G3检验点通路和细胞凋亡途径的激活.与SH-SY5Y细胞不同,在SK-N-SH细胞中,八氯腺苷处理24~96 h时,磷酸化ATM、磷酸化Chk1/Chk2、磷酸化Cdc25C以及磷酸化Cdc2的水平呈现逐渐降低的趋势.结果提示,SK-N-SH细胞在八氯腺苷处理后发生了G2检验点失败.蛋白质免疫印迹分析还显示,八氯腺苷可诱导p53在SH-SY5Y细胞的表达,但却不能影响SK-N-SH细胞的p53组成性表达水平.p21在SK-N-SH的组成性表达随八氯腺苷处理时间延长而逐渐减少,但在处理前后的SH-SY5Y细胞均未检测到p21蛋白的表达.上述实验结果提示,八氯腺苷抑制两种细胞增殖的机制不同:在SH-SY5Y细胞,八氯腺苷可激活ATM-Chk-Cdc25C-Cdc2/cyclin途径和凋亡通路,使细胞发生G2/M期阻滞和细胞凋亡;在SK-N-SH细胞,八氯腺苷诱导G2检验点失败,导致细胞阻滞在有丝分裂期,并发生有丝分裂异常.2种不同的细胞命运可能还与p53和p21表达不同有关.
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关键词
八氯腺苷
G2/M期阻滞
凋亡
有丝分裂异常
肿瘤
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职称材料
题名
八氯腺苷对A549和H1299细胞周期的影响及机制探讨
1
作者
范芳
安国顺
李淑艳
倪菊华
贾弘禔
机构
遵义医学院生物化学教研室
北京大学医学部生物化学与分子生物学系
出处
《贵州医药》
CAS
2014年第9期771-775,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.30471975)
文摘
目的八氯腺苷对肺癌细胞株A549和H1299细胞增殖及细胞周期的影响及其机制探讨。方法 A549和H1299经10.0μmol/L八氯腺苷处理后,MTT法检测细胞生长和增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测DNA-PKcs、γ-H2AX、Ku80、Ku70及TopoⅠ的表达情况。结果 MTT法检测结果显示,用10.0μmol/L八氯腺苷分别处理A549、H1299细胞24、48、72h后,A549、H1299细胞生长被抑制;流式细胞分析则显示,A549、H1299细胞G2/M期细胞数增多;Western blot结果表明,γ-H2AX的表达均增加,DNA-PKcs蛋白的表达均下降,而Ku80、Ku70的表达未见明显变化;经八氯腺苷处理后TopoⅠ蛋白在A549细胞中的表达逐渐增加,而在H1299细胞中的表达却逐渐下降。结论八氯腺苷可抑制A549和H1299细胞生长,诱导细胞发生G2/M期阻滞,其机制可能与DNA-PKcs表达下调有关。在A549细胞中TopoⅠ可能通过p53依赖途径介导DNA损伤修复,从而引发对细胞的毒性作用;而在p53缺失的H1299细胞中可能是通过其它途径调控细胞周期。
关键词
八氯腺苷
细胞周期
DNA依赖蛋白激酶催化亚基
拓扑异构酶I
Keywords
8-chloro-adenosine
Cell cycle
DNA-PKcs Topo Ⅰ
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
八氯腺苷诱导SH-SY5Y和SK-N-SH细胞G_2/M期阻滞的分子机制不同
被引量:
4
2
作者
朱玄
安国顺
李淑艳
潘颖
倪菊华
贾弘禔
机构
首都医科大学生物化学与分子生物学系
北京大学医学部生物化学与分子生物学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期584-590,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30471975)~~
文摘
为探索八氯腺苷的抗肿瘤作用机制,以神经母细胞瘤SH-SY5Y和SK-N-SH细胞为对象,采用四唑盐比色实验(MTT法)证明,八氯腺苷具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性.流式细胞分析显示,10 μmol/L八氯腺苷作用48 h后可导致靶细胞生长停滞于G2/M期;SH-SY5Y细胞发生明显细胞凋亡,但SK-N-SH细胞却未见凋亡.Hoechst 33342染色显示,SK-N-SH细胞发生了核分裂异常.蛋白质免疫印迹分析证明,10μmol/L八氯腺苷处理SH-SY5Y 48~72 h后,G2检验点调节蛋白ATM、Chk1、Cdc25C和Cdc2磷酸化形式明显上调,同时伴有caspase-3的激活,提示SH-SY5Y细胞发生了G3检验点通路和细胞凋亡途径的激活.与SH-SY5Y细胞不同,在SK-N-SH细胞中,八氯腺苷处理24~96 h时,磷酸化ATM、磷酸化Chk1/Chk2、磷酸化Cdc25C以及磷酸化Cdc2的水平呈现逐渐降低的趋势.结果提示,SK-N-SH细胞在八氯腺苷处理后发生了G2检验点失败.蛋白质免疫印迹分析还显示,八氯腺苷可诱导p53在SH-SY5Y细胞的表达,但却不能影响SK-N-SH细胞的p53组成性表达水平.p21在SK-N-SH的组成性表达随八氯腺苷处理时间延长而逐渐减少,但在处理前后的SH-SY5Y细胞均未检测到p21蛋白的表达.上述实验结果提示,八氯腺苷抑制两种细胞增殖的机制不同:在SH-SY5Y细胞,八氯腺苷可激活ATM-Chk-Cdc25C-Cdc2/cyclin途径和凋亡通路,使细胞发生G2/M期阻滞和细胞凋亡;在SK-N-SH细胞,八氯腺苷诱导G2检验点失败,导致细胞阻滞在有丝分裂期,并发生有丝分裂异常.2种不同的细胞命运可能还与p53和p21表达不同有关.
关键词
八氯腺苷
G2/M期阻滞
凋亡
有丝分裂异常
肿瘤
Keywords
8-Cl-Ado
G2/M arrest
apoptosis
aberrant mitosis
tumor
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
八氯腺苷对A549和H1299细胞周期的影响及机制探讨
范芳
安国顺
李淑艳
倪菊华
贾弘禔
《贵州医药》
CAS
2014
0
下载PDF
职称材料
2
八氯腺苷诱导SH-SY5Y和SK-N-SH细胞G_2/M期阻滞的分子机制不同
朱玄
安国顺
李淑艳
潘颖
倪菊华
贾弘禔
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
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职称材料
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