基于网络药理学和分子对接技术研究八珍益智方治疗阿尔茨海默病的潜在作用机制

目的利用网络药理学方法及分子对接技术,研究八珍益智方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的潜在药效物质基础和作用机制,为其临床应用提供理论依据。方法通过TCMSP、BATMAN-TCM、TCMID、中国知网(CNKI)和Pubmed数据库检索八珍益智方8味组方药材化学成分和作用靶点;通过GeneCards、OMIM数据库查询AD的相关靶点;利用R语言3.6.3得到药物和疾病的交集靶点;借助String数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建PPI网络,筛选核心靶点;通过DAVID数据库进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;利用AutoDock tools 1.5.6、AutoDock vina 1.1.2进行分子对接。结果八珍益智方共收集到200个化学成分和226个靶点,Cytoscape 3.7.2软件筛选出包括AKT1、MAPK3、IL-6、VEGFA、CASP3等37个核心靶点,槲皮素、山柰酚、柚皮苷、豆甾醇、7-甲氧基-2-甲基异黄酮等15个核心化合物。GO富集分析得到1331个条目(P<0.05),KEGG通路富集得到相关通路65条(P<0.05)。分子对接结果显示15个核心化合物和AKT1、MAPK3、IL-6、VEGFA、CASP3具有较好的亲和力。结论八珍益智方治疗AD的通路主要涉及癌症的途径、MAPK信号通路、前列腺癌、神经活性配体-受体相互作用、钙信号通路等,研究结果为八珍益智方治疗AD作用机制的进一步阐明提供了指引。

八珍益智方中非挥发性成分在大鼠体内的代谢产物

目的分析八珍益智方中非挥发性成分在大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃给予八珍益智方水煎液(13.95 g/kg)后,采用超高效液相色谱⁃线性离子阱⁃静电轨道阱串联质谱联用(UHPLC⁃LTQ⁃Orbitrap⁃MS)法分析其血浆、胆汁、尿液、粪便中的非挥发性成分。结果共鉴定出6个原型及40个代谢产物,主要发生Ⅰ相代谢反应(氧化、去甲基化等)、II相代谢反应(磺化、葡萄糖醛酸化、甘氨酸或谷胱甘肽结合等)。结论该方法快速有效,可用于鉴定大鼠体内八珍益智方代谢产物,并为进一步研究该复方制剂的功效物质基础和药动学提供依据。

八珍益智方改善老年小鼠轻度认知功能障碍初步功效评价研究

目的:探讨八珍益智方对老年小鼠轻度认知功能障碍功效影响。方法:随机将昆明种小鼠分为青年对照组、老年对照组、脑复康组、八珍组(低)、八珍组(中)、八珍组(高),通过运用避暗试验和跳台试验观察老年小鼠认知功能改善情况。结果:老年对照组较青年对照组小鼠学习记忆功能明显减退,差异极其显著;八珍益智方组和脑复康组均能改善老年小鼠的认知功能,与老年对照组相比,有统计学差异;八珍益智方中、高剂量组老年小鼠认知功能改善优于脑复康组。结论:八珍益智方具有显著改善轻度认知功能障碍功效。

八珍益智方UPLC指纹图谱研究及多成分定量测定

目的:采用超高效液相色谱(UPLC)建立八珍益智方指纹图谱和多成分定量分析方法。方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),检测波长254 nm(甘草酸)及300 nm(原儿茶酸、甘草苷、橙皮苷、异甘草苷、川陈皮素、桔皮素)。通过对照品比对与Q-TOF/MS技术对共有峰进行指认,采用UPLC-PAD进行含量测定。结果:测得10批次八珍益智方样品的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.936;共确定八珍益智方指纹图谱19个共有峰,指认14个化学成分,对其中原儿茶酸、甘草苷、橙皮苷、异甘草苷、川陈皮素、桔皮素、甘草酸7个成分进行含量测定。上述7个成分在一定浓度范围内呈良好线性关系,相关系数均大于0.9999;方法学考察结果显示各项指标均符合要求,回收率范围为92.8%~106.7%,RSD小于4.2%。10批样品中原儿茶酸、甘草苷、橙皮苷、异甘草苷、川陈皮素、桔皮素、甘草酸含量范围分别为0.006~0.017、0.035~0.220、0.622~2.113、0.015~0.045、0.007~0.022、0.003~0.010、0.237~0.642 mg·g^(-1)。结论:所建立的指纹图谱及多指标成分含量测定的分析方法稳定可行,专属性强,可用于八珍益智方的质量控制,为新药研发和临床安全用药提供依据。