上皮性卵巢癌中八聚体结合转录因子4、Notch1及DLL4的表达及其临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌(EOC)中八聚体结合转录因子4(OCT4)、Notch1及DLL4蛋白表达之间的关系及其功能意义。方法收集207例EOC术后标本和65例卵巢良性上皮性肿瘤标本,应用免疫组化学法检测EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中OCT4、Notch1以及DLL4蛋白的表达情况。结果 EOC组织和卵巢良性上皮性肿瘤组织中,OCT4、Notch1和DLL4蛋白的阳性表达率分别为60.0%、61.8%、60.9%和9.2%、6.2%、0,差异均有统计学意义(P<0.05);OCT4、Notch1和DLL4的表达与EOC的组织学分化、FIGO分期、盆腔淋巴结转移有关(P<0.05);DLL4蛋白的表达分别与OCT4和Notch1的表达呈正相关关系(r值分别为0.758和0.704,P均<0.001),同时,OCT4与Notch1蛋白的表达亦呈正相关(r=0.645,P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析表明,OCT4、Notch1和DLL4蛋白的过表达均与患者的生存率有关,3种蛋白表达阳性组患者生存率均明显低于蛋白表达阴性组患者(P<0.05)。多因素分析:OCT4、DLL4蛋白的表达和FIGO分期是影响EOC根治术后患者预后的独立因素(P<0.05)。结论OCT4、Notch1及DLL4的过表达与EOC的组织学分化程度、转移和预后等因素密切相关,联合检测这些指标可能对于EOC患者的病情进展和预后判断给予重要提示。

大肠癌细胞中八聚体结合转录因子4与人类白细胞分化抗原133的表达及相关性

目的探讨大肠癌细胞中人类白细胞分化抗原133(CD133)与八聚体结合转录因子4(OCT4)的表达情况及其相关性。方法采用磁珠细胞分离技术分选出人结肠癌细胞系的CD133+细胞和CD133-细胞,检测两种细胞中OCT4的表达。分别改变CD133+和CD133-细胞中OCT4的表达,观察其对CD133的表达的影响。采用肿瘤球形成实验检验肿瘤细胞干性生物学行为的改变。结果 CD133+细胞中OCT4呈现高表达,CD133-细胞中OCT4基本无表达。CD133+细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)高度抵抗,并且更容易在无血清培养基中形成肿瘤球。干扰OCT4的表达可以降低CD133+细胞中CD133的表达水平,增加对5-FU的敏感性,并且减少肿瘤球形成能力。过表达OCT4增加CD133-细胞CD133的表达水平,降低对5-FU的敏感性,并且减少肿瘤球形成能力。结论 OCT4与CD133在大肠癌细胞中均有表达,OCT4对CD133有直接调控作用。

八聚体结合转录因子4对食管鳞状细胞癌细胞侵袭、迁移的影响

目的探讨八聚体结合转录因子4(Oct4)对食管鳞状细胞癌细胞活力、侵袭、迁移的影响及其机制。方法利用脂质体将Oct4对照和Oct4 shRNA分别转染至食管鳞状细胞癌细胞Eca109,分别记为对照组和干扰组。采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Oct4 mRNA的表达情况,CCK-8法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测Eca109细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、Twist蛋白的表达情况。结果RT-PCR检测结果显示,转染后,干扰组Eca109细胞中Oct4 mRNA的相对表达量明显低于对照组(P﹤0.01)。CCK-8法检测结果显示,干扰组Eca109细胞的活力明显低于对照组(P﹤0.01)。细胞划痕实验结果显示,迁移24 h后,干扰组Eca109细胞的迁移速率明显低于对照组(P﹤0.01)。Transwell检测结果显示,干扰组Eca109细胞的侵袭数目明显少于对照组(P﹤0.01)。Western blot检测结果显示,干扰组Eca109细胞中MMP2、MMP9、vimentin、Twist蛋白的相对表达量均明显低于对照组,E-cadherin蛋白的相对表达量明显高于对照组(P﹤0.01)。结论下调Oct4的表达能明显抑制食管鳞状细胞癌细胞Eca109的活力及侵袭、迁移能力,以及抑制食管鳞状细胞癌细胞Eca109中MMP2、MMP9、vimentin、Twist蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达。

人膀胱移行细胞癌组织中八聚体转录因子4蛋白表达

目的:检测人膀胱移行细胞癌组织中核转录因子4(Oct4)蛋白的表达情况,并探讨其在膀胱移行细胞癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测44例膀胱移行细胞癌(Ⅰ级7例,Ⅱ级27例,Ⅲ级10例)、2例非典型增生、19例癌旁组织和15例正常膀胱黏膜组织中Oct4蛋白的表达情况。结果:膀胱移行细胞癌和癌旁组织中Oct4蛋白的阳性表达率分别为63.6%(28/44)和36.8%(7/19),非典型增生和正常膀胱黏膜上皮组织中无Oct4表达,差异有统计学意义(P<0.05)。且膀胱移行细胞癌组织中Oct4蛋白的表达与分化程度相关(P<0.05)。结论:Oct4蛋白的表达可速膀胱移行细胞的恶性转化。

八聚体结合转录因子4调控细胞应激反应的研究进展

八聚体结合转录因子(Oct)4是维持胚胎干细胞多能性和自我更新的关键性调控因子,其功能多样性已成为研究热点之一。本文就Oct4基因转录异构体、Oct4基因剪接异构体、Oct4基因对细胞应激反应的调控作用、Oct4基因对牙髓细胞的调控作用等研究进展作一综述。

蛋白精氨酸N-甲基转移酶4上调八聚体结合转录因子4表达促进胃癌细胞的干性

目的探讨蛋白精氨酸N-甲基转移酶(protein arginine N-methyltransferase,PRMTs)调控八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor4,Oct4)的表达及其对胃癌细胞"干性"的影响。方法以pc DNA3.1载体构建PRMT4过表达质粒,转染至人胃腺癌MKN45细胞;倒置相差显微镜下观察肿瘤细胞成球能力的变化;qRT-PCR和Western blot检测胃癌干细胞标志物CD44、Lgr5及"干性"维持分子Nanog、Oct4的改变;继而构建含Oct4基因启动子荧光素酶报告载体,分析PRMT4对Oct4启动子活性的影响;最后采用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)实验证实PRMT4与Oct4基因启动子结合情况。结果 MKN45细胞转染蛋白精氨酸N-甲基转移酶-4基因过表达载体后,形成肿瘤干细胞球的能力显著增强;随后qRT-PCR及Western blot检测结果显示胃癌干细胞标志物CD44、Lgr5的mRNA及蛋白水平上调;此外,过表达PRMT4可明显增加"干性"维持分子Oct4的mRNA及蛋白水平,而对Nanog则无明显影响;双荧光素酶实验结果显示,与对照组相比,PRMT4过表达组Oct4的启动子活性明显增强(P<0.05);染色质免疫共沉淀实验结果证实,PRMT4可与Oct4启动子结合。结论 PRMT4可结合至Oct4基因启动子上,通过增加启动子活性,从而促进Oct4转录及表达,进而增强胃癌细胞的干性。

神经母细胞瘤中八聚体结合转录因子4的表达及与瘤细胞侵袭转移的关系初探

目的:观察八聚体结合转录因子4(Oct4)在神经母细胞瘤中的表达情况,并探讨其与神经母细胞瘤转移和侵袭的关系。方法:采用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测神经母细胞瘤组织及癌旁组织中Oct4的表达情况。收集患者临床病理参数,分析Oct4表达与神经母细胞瘤临床病理参数之间的关系。采用电穿孔转染法,将Oct4 si RNA转入神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中,通过伤口愈合实验和Boyden小室检测Oct4对神经母细胞瘤SK-N-MC细胞转移和侵袭能力的影响。结果:神经母细胞瘤组织中Oct4的表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。Oct4的阳性表达率与患者有无淋巴结转移和分化程度密切相关(P<0.01),但与患者性别、年龄、肿瘤大小和临床病理分期均无明显关系(P>0.05);转染Oct4 si RNA可显著抑制神经母细胞瘤SKN-MC细胞的转移和侵袭能力(P<0.01)。结论:Oct4具有促进神经母细胞瘤转移和侵袭的作用,其高表达可能与神经母细胞瘤的发生和发展密切相关。

八聚体结合蛋白-4对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨八聚体结合蛋白-4(octamer-bindingprotein-4,Oct 4)在胃癌(gastriccarcinoma)组织及其4株细胞系(MKN-28、SGC-7901、BGC-823和GES-1)中的表达,并分析其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法收集20例胃癌手术患者的癌变组织和20例正常组织,通过Real time PCR(RT-PCR)和Western blot法检测Oct 4在胃癌组织及其4株细胞系中的表达水平。在干扰掉Oct 4后,采用MTT的方法检测BGC-823细胞的增殖活性,通过Transwell小室法检测BGC-832细胞的侵袭活性,利用Western blot法检测MMP-2及MMP-9的表达。结果 RT-PCR检测发现Oct 4 mRNA在胃癌组织中高表达,而在正常组织中低表达,Western blot法检测发现Oct 4在BGC-832表达水平最高。下调Oct 4的表达导致BGC-823细胞增殖和侵袭活性被抑制,MMP-2及MMP-9的表达水平均降低。结论 Oct 4在胃癌组织和胃癌细胞系中高表达,并且敲除Oct 4会导致胃癌细胞的增殖和侵袭活性明显减弱,降低MMP-2及MMP-9的表达水平。Oct 4在胃癌组织中的过量表达有助于胃癌的临床诊断,同时Oct 4在胃癌的恶性肿瘤生物活性中发挥着重要作用。

八聚体结合转录因子4通过调节上皮-间质转化促进食管鳞状细胞癌进展和放疗抵抗

目的探讨八聚体结合转录因子4(Oct4)与食管鳞状细胞癌进展和放疗抵抗的具体作用和分子机制。方法利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库,分析Oct4基因在不同类型肿瘤组织和对应癌旁正常组织中的表达差异。2013年1月至2022年5月在河南省胸科医院接受手术联合放疗治疗的196例食管鳞状细胞癌患者,收集其临床资料及手术切除组织标本,采用免疫组化法检测癌及癌旁组织中Oct4蛋白的表达。通过慢病毒包装系统构建上调和下调Oct4的食管鳞状细胞癌细胞系,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,克隆形成实验检测细胞的放疗敏感性,免疫荧光实验检测DNA损伤水平,Western blot检测Oct4、人磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、E-cadherin、N-cadherin、vimentin、锌指E盒结合同源盒1(ZEB1)的表达。结果GEPIA数据库资料分析显示,食管癌组织中Oct4 mRNA的表达水平高于其癌旁组织(P<0.05)。196例食管鳞状细胞癌患者的肿瘤组织中Oct4蛋白表达水平为78.35±1.42,高于癌旁组织(16.27±0.49,P<0.001)。Oct4高表达组患者的生存时间明显短于Oct4低表达组(中位生存时间分别为25.40和47.00个月;HR=1.68,P=0.022)。与对照组比较,Oct4上调组KYSE510细胞增殖能力增强(培养72 h,吸光度分别为1.73±0.19和1.35±0.10,P=0.007),迁移能力增强[培养24 h,细胞迁移率分别为(41.67±1.20)%和(23.67±1.86)%,P=0.001],放疗敏感性降低(辐射增敏比分别为0.69±0.06和1.00±0.02,P=0.010),放疗后γ-H2AX表达水平降低,ZEB1、vimentin和N-cadherin表达升高,E-cadherin表达下降;Oct4下调1组和Oct4下调2组KYSE150细胞增殖能力减弱(培养72 h,吸光度分别为2.51±0.17、2.38±0.16和3.33±0.07,均P<0.01),迁移能力下降[培养24 h,细胞迁移率分别为(13.33±0.88)%、(13.00±1.00)%和(40.33±2.03)%,均P<0.001],放疗敏感性增强(辐射增敏比分别为1.34±0.11、1.24±0.07和1.00±0.02,均P<0.05),放疗后γ-H2AX表达水平升高,ZEB1、vimentin和N-cadherin表达下降,E-cadherin表达升高。与对照组比较,ZEB1下调组KYSE510细胞增殖能力减弱(培养72 h,吸光度分别为1.33±0.15和1.81±0.16,P=0.002),放疗敏感性增强(辐射增敏比分别为1.37±0.11和1.00±0.01,P=0.037),放疗后γ-H2AX表达水平升高。结论Oct4参与调节食管鳞状细胞癌细胞上皮-间质转化,进而促进食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和放疗抵抗。

T细胞因子3基因沉默对小鼠睾丸胚胎癌细胞Oct4表达的影响

目的:探讨T细胞因子3(TCF3)基因沉默对小鼠睾丸胚胎癌F9细胞干性基因Oct4表达的影响,阐明TCF3对F9细胞中Oct4表达调控的作用机制。方法:采用RNAi技术将TCF3基因沉默作为TCF3干涉组,同时设立空白对照组和阴性对照组。采用RT-PCR和Western blotting方法观察各组细胞TCF3和Oct4mRNA和蛋白表达水平,细胞免疫荧光法观察F9细胞中Oct4的表达。结果:Oct4在F9细胞核中高度表达。与空白对照和阴性对照组比较,TCF3干涉组TCF3mRNA和蛋白表达水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.01);Oct4mRNA和蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);而空白对照组与阴性对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TCF3基因干涉可以促进F9细胞中Oct4的转录和蛋白表达,提示TCF3可以负向调控F9细胞中Oct4的表达,是Oct4的抑制因子之一。

干细胞转录因子SOX2、OCT4在不同分化程度胃癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:肿瘤组织的分化程度是决定胃癌预后的重要因素,本研究检测胃癌组织中性别决定相关基因簇2(sex determining region Y-box 2,SOX2)、八聚体结合蛋白-4(octamer binding factor 4,OCT4)的表达,探讨SOX2、OCT4的表达与胃癌患者临床病理因素及预后的关系及意义。方法:通过实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)和免疫组化检测了60例分化程度不同的胃癌组织与正常黏膜组织中SOX2和OCT4的mRNA及蛋白的表达量,并分析SOX2和OCT4基因的表达水平与患者临床病理参数的关系。结果:q RT-PCR、Western blot检测显示,高分化胃癌组织SOX2 mRNA和蛋白的相对表达量与正常胃黏膜组织比较差异无统计学意义(t=0.103 3,P>0.05;t=0.116,P>0.05),但显著高于中分化胃癌组织(t=12.48,P<0.05;t=22.78,P<0.05)和低分化胃癌组织(t=17.56,P<0.05;t=30.00,P<0.05),差异有统计学意义。与SOX2相反,高分化胃癌组织OCT4 mRNA的相对表达量与正常胃黏膜组织比较差异无统计学意义(t=2.436,P>0.05;t=1.064,P>0.05),但显著低于中分化胃癌组织(t=13.23,P<0.05;t=25.56,P<0.05)和低分化胃癌组织(t=12.10,P<0.05;t=69.48,P<0.05),差异有统计学意义。免疫组化显示,高分化胃癌组织中SOX2的阳性表达率(10/21)高于中分化胃癌组织(7/20)和低分化胃癌组织(2/19,P<0.05),高分化胃癌组织中OCT4的阳性表达率(2/21)低于中分化胃癌组织(6/20)和低分化胃癌组织(12/19,P<0.05),与临床病理参数相比较,胃癌中SOX2和OCT4蛋白的表达与患者的性别、年龄无关,差异无统计学意义(P>0.05)。与病理分期、浸润程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。结论:SOX2基因的低表达水平和OCT4的高表达水平促进胃癌的发生、发展和侵袭,有望成为胃癌诊断、治疗和预后判断的一个指标。

OCT4与EMT相关因子在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:观察上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关因子E-钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)以及干细胞因子八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)在浸润性乳腺癌中的表达情况及OCT4与E-钙黏着蛋白和波形蛋白的相关性。方法:收集河北医科大学第四医院2009年手术切除的浸润性乳腺癌组织标本40例,实时荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测OCT4、E-钙黏着蛋白和波形蛋白的mRNA和蛋白的表达,分析其与临床病理特征的关系、OCT4和EMT相关蛋白之间的相关性以及与浸润性乳腺癌患者生存率之间的关系。结果:在浸润性乳腺癌组织中,OCT4、E-钙黏着蛋白和波形蛋白表达率分别为30%(12/40)、55%(22/40)和65%(26/40)。OCT4表达与浸润性乳腺癌患者的年龄、组织学分级、淋巴结转移以及Her-2的表达有关,E-钙黏着蛋白表达与淋巴结转移有关,波形蛋白表达与组织学分级和淋巴结转移有关。OCT4 mRNA和蛋白的表达与E-钙黏着蛋白和mRNA蛋白的表达呈负相关,与波形蛋白mRNA和蛋白的表达呈正相关,而E-钙黏着蛋白mRNA和蛋白的表达与波形蛋白mRNA和蛋白的表达也呈负相关。OCT4表达阳性患者的生存率明显低于表达阴性患者,差异具有统计学意义(P<0.05);而E-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达与患者生存率之间未见明显相关性(P>0.05)。结论:干细胞因子OCT4可能通过EMT促进浸润性乳腺癌细胞的转移,可能是影响浸润性乳腺癌预后的因素。

ZBP-89通过抑制八聚体结合转录因子4通路对肝癌细胞干性的影响

目的 观察ZBP-89对八聚体结合转录因子4(Oct4)信号通路和肝癌细胞干性的影响。方法 采用免疫组织化学染色法检测120例肝癌组织中ZBP-89、CD133和上皮细胞黏附因子(EpCAM)的表达,分析ZBP-89的表达水平与CD133、EpCAM的相关性。通过ZBP-89过表达的慢病毒载体和小干扰RNA(siRNA)调节Hep3B细胞中ZBP-89的表达,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Oct4、CD133和EpCAM的表达。结果 在肝癌组织中ZBP-89的表达水平和CD133、EpCAM的表达呈负相关(χ2=45.000,P<0.05;χ2=26.020,P<0.05)。当Hep3B细胞中的ZBP-89表达升高时,Oct4、CD133和EpCAM的表达下降,其中mRNA水平分别为对照组的(0.47±0.03)、(0.63±0.01)、(0.53±0.02)倍(P均<0.05),当ZBP-89的表达下降时Oct4、CD133和EpCAM的表达升高,其中mRNA水平分别为对照组的(2.04±0.03)、(1.62±0.03)、(1.79±0.05)倍(P均<0.05)。Western blot与Real-time PCR结果相一致。结论 ZBP-89可通过抑制Oct4信号通路抑制肝癌细胞的干性。

Oct4与结肠癌发生发展关系的研究进展

八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,Oct4)属于POU转录因子家族,是维持胚胎干细胞自我更新及多能性的关键因子.其不仅表达于胚胎干细胞、原始生殖细胞以及胚胎性肿瘤细胞中,也在多种体细胞肿瘤中高表达,与恶性肿瘤的发生、发展密切相关.新近研究表明Oct4是Wnt及转化生长因子b信号通路的靶基因,参与维持结肠癌肿瘤干细胞的存活,对结肠癌的发生、复发、转移以及预后等有着深远的影响,本文将就Oct4与结肠癌发生、发展的关系作一综述.

Oct4基因在消化系肿瘤中的研究进展

八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcriptionfactor 4,Oct4)基因是POU转录因子家族中的一员,是维持干细胞多潜能性和自我更新的最重要转录因子之一.Oct4不仅在胚胎干细胞和生殖细胞及其肿瘤中有表达,且在多种体细胞恶性肿瘤中也均有表达现象,与恶性肿瘤患者的发生发展及临床预后存在密切的关系,对肿瘤的诊断及治疗有着深远的影响.本文就Oct4在消化系肿瘤中的作用及机制方面的研究给予综述.

OCT4表达与非小细胞肺癌临床病理特征关系的Meta分析

目的:旨在使用Meta分析方法系统评价八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床病理特征的关系。方法:电子检索Pub Med、Embase、中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库、维普中文科技核心全文数据库以及万方数据库,检索时间从建库至2016年3月,查找涉及OCT4表达与NSCLC临床病理特征相关的病例对照研究。参照Cochrane协作网推荐的方法进行筛选及提取数据并评价纳入研究的质量,运用Revman 5.2软件及Stata 12.0软件进行Meta分析。结果:共纳入10个研究,905例患者。OCT4阳性组471例,OCT4阴性组434例。Meta分析结果显示,OCT4阳性表达与肺腺癌(OR=1.75,95%CI=1.22~2.53,P=0.003)、低分化癌(OR=2.93,95%CI=1.25~6.84,P=0.010)、中分化癌(OR=1.81,95%CI=1.12~2.94,P=0.020)、T3/T4期肿瘤(OR=1.95,95%CI=1.10~3.45,P=0.020)、术后生存期短(鳞癌:MD=-4.49,95%CI=-7.73^-1.55,P=0.003;腺癌:MD=-8.52,95%CI=-9.82^-7.23,P=0.000)及总体生存率低下(HR=1.99,95%CI=1.52~2.60)关系较为密切,差异均具有统计学意义。结论:OCT4阳性表达与肺腺癌、NSCLC恶性特征以及预后不良密切相关,可以为肺癌靶向治疗提供可靠的科学依据。

胃癌组织Oct4表达变化及意义

目的探讨八聚体结合蛋白4(Oct4)在胃癌发生、发展中的作用及其机制。方法选择60例胃癌患者手术切除的癌组织及其相应癌旁正常组织,分别应用qRT-PCR技术、Western blotting技术检测Oct4 mRNA和蛋白表达;分析胃癌组织Oct4表达与TGF-β信号通路中TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin效应因子及患者临床病理参数的关系。结果胃癌组织Oct4、Smad3 mRNA和蛋白的相对表达量明显高于癌旁正常组织(P均<0.05),TβRⅡ、Smad2、E-Cadherin mRNA和蛋白的相对表达量明显低于癌旁正常组织(P均<0.05)。胃癌组织Oct4表达与TβRⅡ、Smad2、E-Cadherin蛋白表达呈负相关(r分别为-0.887、-0.912、-0.879,P均<0.01),与Smad3蛋白表达呈正相关(r=0.779,P<0.01)。胃癌组织Oct4表达变化与患者性别、年龄无关(P均>0.05),与肿瘤组织分化程度、临床分期、淋巴结转移和浆膜浸润有关(P均<0.05)。结论胃癌组织Oct4高表达可促进胃癌的发生、发展,其机制可能与Oct4参与调节TGF-β信号通路、诱导细胞发生上皮间质转化有关。

正常及炎症状态人牙髓中八聚体结合转录因子4B的表达

目的研究人正常及炎症牙髓组织中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)的表达特点,检测大肠杆菌脂多糖刺激后人牙髓细胞(HDPCs)中Oct-4B的表达水平,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常及炎症牙髓组织中Oct-4B的表达情况。RT-PCR检测1mg/L脂多糖刺激HDPC24、48、72h后Oct-4B和热休克蛋白70(HSP70)表达水平的变化。结果正常牙髓组织中未检测到Oct-4B的表达,炎症牙髓组织病灶处牙髓成纤维细胞和炎症细胞胞质中Oct-4B表达强阳性。炎症牙髓组织中Oct-4BmRNA水平显著高于正常牙髓组织(P<0.05)。脂多糖刺激48、72h后,HDPC中Oct-4B和HSP70mRNA水平同步上调(P<0.05)。结论 Oct-4B在炎症牙髓组织中高表达,且脂多糖刺激可上调牙髓细胞内Oct-4B表达,Oct-4B可能参与牙髓炎症修复过程。

OCT-4在乳腺浸润性导管癌不同亚型中的表达及意义

目的探讨干细胞特异性基因OCT-4在各亚型乳腺浸润性导管癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测120例四种不同亚型乳腺浸润性导管癌组织中的OCT-4表达情况,并分析其与患者淋巴结转移及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、原癌基因人类表皮生长因子受体-2(HER-2)表达的关系。结果 OCT-4主要表达于细胞核,总阳性率为19.17%(23/120),其中Luminal A型、Luminal B型、Basal-like型、HER-2过表达型OCT-4表达阳性率分别为17.39%(8/44)、19.23%(5/26)、18.75%(6/32)、25.00%(4/16),两两比较P均>0.05(χ2=0.61);Luminal B型、HER-2过表达型中有局部淋巴结转移者OCT-4表达阳性率显著低于无局部淋巴结转移者(P<0.05);OCT-4表达与ER、PR、HER-2的表达均无明显相关性(P>0.05)。结论 OCT-4表达可能影响乳腺浸润性导管癌的浸润、转移及预后,但在各亚型间的作用无显著差异。

miR-143-3p通过调节TGIF2的表达在甲状腺癌中的作用研究

目的探究过表达miR-143-3p对甲状腺癌(thyroid cancer,TC)细胞的影响及其作用机制。方法 Real-time PCR分析正常甲状腺上皮细胞和不同TC细胞中miR-143-3p的表达。Targetscan网站和双荧光素酶报告系统验证miR-143-3p和TGIF2 3’UTR的靶向关系;Real-time PCR检测miR-143-3p和TGIF2 mRNA的过表达效率;过表达成功后,将CAL-62细胞分为对照组、miR-143-3p mimic组、pcDNA-TGIF2组和miR-143-3p+TGIF2组,ELISA检测细胞上清液中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的含量;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫荧光检测活性氧(ROS)产生;显微观察干细胞成球,Western blot检测TGIF2、p-P65、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5 (LGR5)和八聚体结合蛋白4 (OCT4)蛋白表达。体内构建裸鼠移植瘤,检测过表达miR-143-3p对肿瘤生长的影响。结果 miR-143-3p在TC细胞中的表达明显低于正常甲状腺上皮细胞(P<0.05)。Targetscan网站和双荧光素酶报告系统证实miR-143-3p与TGIF2存在靶向关系。miR-143-3p mimic组miR-143-3p的表达上调(P<0.05),TGIF2 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),iNOS、IL-1β和IL-6含量明显降低(P<0.05),抗氧化能力显著下降(P <0.05),干细胞成球能力降低(P <0.05),p-P65、LGR5和OCT4的蛋白表达均显著下调(P<0.05)。pcDNA-TGIF2组的结果相反,过表达miR-143-3p能显著抑制pcDNA-TGIF2的促癌作用。裸鼠移植瘤模型表明过表达miR-143-3p能够减小肿瘤的质量和体积,下调瘤组织中TGIF2和OCT4的表达(P<0.05)。结论过表达miR-143-3p能够通过下调TGIF2的表达抑制TC细胞促炎因子水平、抗氧化能力和干细胞样特性,并抑制裸鼠肿瘤的形成。