芩术仙灵散对夏季公兔抗氧化能力、生殖激素水平和生殖能力的影响

为了探究芩术仙灵散对夏季公兔抗氧化能力、生殖激素水平和生殖能力的影响,将18只健康、性成熟新西兰公兔随机分成3组,分别为常温对照组(全价饲料),高温高湿组(全价饲料)和给药组(全价饲料+芩术仙灵散2.5 g/d)。常温对照组饲养在温度25℃、相对湿度60%的动物房中,其他组饲养在夏季自然温度与光照的动物房中。记录试验兔日采食量和爬跨率,通过生化分析仪检测抗氧化能力,显微镜观察精子形态,放射免疫法检测生殖激素水平。结果:与常温对照组相比,高温高湿组公兔日采食量、爬跨率、抗氧化能力、精液品质和激素水平均显著降低(P<0.05),射精反应时间显著延长(P<0.05)。与高温高湿组比较,给药组公兔日采食量、爬跨率、抗氧化能力、激素水平均显著升高(P<0.05);射精反应时间缩短了3.67 s(P<0.05);精液品质改善明显,精子畸形率降低了1.72%(P<0.05),精子活率升高了8%(P<0.05)。本研究表明,公兔在夏季产生了热应激,日粮中添加芩术仙灵散可提高夏季公兔抗氧化能力、生殖激素水平和生殖能力。

不同比例“张杂谷”对种公兔精液品质及血清生化指标的影响

试验旨在探讨“张杂谷”对种公兔精液品质及血清生化指标的影响。选择36只健康的成年伊拉公兔,随机分为6组,每组6个重复,每个重复1只公兔。各组公兔分别饲喂含谷子水平为0、5%、10%、15%、20%和25%的饲粮。预试期7 d,正式试验期90 d。结果显示,与第30 d相比,第60 d和第90 d时试验组种公兔的精子活力和精子密度提高(P<0.05),采精量和精子畸形率无显著变化(P>0.05)。不同水平“张杂谷”对种公兔的血清生化指标无显著影响(P>0.05)。研究表明,从饲粮成本、公兔精液品质等多方面考虑,“张杂谷”添加比例为10%时效果最佳。

全株谷草对种公兔精液品质、血清生殖激素、抗氧化能力和免疫功能的影响

试验旨在探讨全株谷草对种公兔精液品质、血清生殖激素、抗氧化能力和免疫功能的影响。选择36只成年伊拉种公兔,随机分为6组,每组6个重复,单笼饲养。对照组及Ⅰ组~Ⅴ组分别饲喂使用0、5%、10%、15%、20%和25%全株谷草等量代替苜蓿草粉的饲粮。预试期7 d,正式试验期90 d。结果表明,随着试验时间的延长,各组精子畸形率呈下降趋势。与第30 d相比,第60、90 d各组的精子活力和精子密度显著提高(P<0.05)。第60、90 d时,与Ⅳ组、Ⅴ组相比,对照组和Ⅰ组~Ⅲ组的精子活力和精子密度显著增加(P<0.05)。与Ⅳ组、Ⅴ组相比,Ⅱ组、Ⅲ组血清中睾酮(TESTO)含量显著升高(P<0.05)。与对照组相比,Ⅳ组、Ⅴ组血清中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),Ⅲ组~Ⅴ组的免疫球蛋白A(IgA)含量显著增加(P<0.05)。研究表明,全株谷草对种公兔精液品质、血清生殖激素、抗氧化能力和免疫功能具有正向调控作用,综合生产性能及经济效益,全株谷草替代水平以15%最为适宜。

酵母铬缓解热应激种公兔生化指标及对免疫功能的影响

试验旨在探讨酵母铬对热应激环境下种公兔生化指标及免疫功能的影响。选用体重约3.50 kg的8月龄健康种公兔72只,随机分成6组,每组6个重复,每个重复2只,对照组采食正常饲粮,试验组在饲粮中分别加入0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/kg酵母铬(以铬计),热应激环境(25~30℃)预试7 d,正式饲养30 d。结果显示:0.6、0.8、1.0 mg/kg酵母铬组种公兔血清总蛋白、球蛋白和碱性磷酸酶均高于对照组(P<0.05或P<0.01),其他组略高于对照组(P>0.05);0.4、0.6、0.8、1.0 mg/kg酵母铬组尿素氮、胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、肌酸激酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶均低于对照组(P<0.05或P<0.01),其他组略低于对照组(P>0.05);除试验0.2 mg/kg酵母铬组外,其他试验组种公兔全血T淋巴细胞转化率均有升高(P<0.05或P<0.01)。由此可见,热应激下,饲粮中加入0.6、0.8、1.0 mg/kg酵母铬(以铬计)不但可以调节种公兔血清各项生化指标,还可增强蛋白质合成和提高免疫性能,降低肝细胞膜的通透性,对维护机体健康有一定积极作用。

复方中药提取物对公兔生殖生理的影响

【目的】讨论不同剂量复方中药提取物对公兔精液品质、生殖激素、睾丸形态及精子顶体完整性的影响,为提高公兔的繁殖性能及研制此类功能的中药饲料添加剂提供理论依据。【方法】选取24只新西兰公兔,随机分为4组,每组6只,空白对照组公兔不添加复方中药提取物,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组公兔分别添加150、300、600 mg/kg复方中药提取物。试验周期为12周,饲喂周期为8周。分别于试验第4、8、12周采集血液样本,于试验第8、10、12周采集精液样本,进行血清中性激素的测定与精液品质鉴定。【结果】与对照组相比,8~12周试验组兔精子密度、精子活率、A级精子数量均显著升高(P<0.05),试验Ⅲ组兔精子顶体完整率显著升高(P<0.05);10~12周试验Ⅲ组兔精子畸形率显著降低(P<0.05)。试验组兔睾丸组织表面被膜由较厚的不规则致密结缔组织构成,睾丸内大量曲精小管基底膜清晰可见,曲精小管上皮是由生精细胞与支持细胞构成的复层上皮,曲精小管上皮分布大量精原细胞和分化的精母细胞,管腔内可见数量丰富的精子,间质无明显异常。4~12周试验Ⅱ、Ⅲ组兔血清中促卵泡素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)含量均显著高于对照组(P<0.05)。【结论】复方中药提取物可明显改善公兔精液品质,提高精子顶体完整率,降低精子畸形率;有效改善睾丸形态,促进生殖器官发育;提高血清中FSH、LH、T生殖激素含量。其中600 mg/kg复方中药提取物对于公兔的生殖生理具有显著影响,在实际生产中具有良好的应用前景。

热应激下公兔睾丸组织形态和精液转录组分析

旨在深入了解公兔在热应激环境中睾丸组织形态改变及相应基因谱,对揭示热应激下公兔精液质量下降的机理具有重要意义。本研究选取了6只具有相同饲养水平,体况和体重相近的8月龄新西兰种公兔,通过建立热应激模型得到热应激组(8月份,HS)和未热应激组(5月份,NHS)各3只,分别采集2组公兔的睾丸和精液。通过HE染色,比较不同条件下睾丸组织结构的差异,并利用Illumina Hiseq高通量测序技术对精子进行转录组测序分析,通过生物信息学方法对2组样本间的差异表达基因进行GO、KEGG富集分析,并通过RT-qPCR方法验证转录组测序数据。公兔睾丸组织切片结果显示,与NHS组相比,HS组的睾丸中央出现明显的空泡化和撕裂,生精上皮较薄,受损情况显著,精子细胞数量下降。进一步以log_(2) FoldChange>1和P<0.05为阈值,共筛选出与精子热应激响应相关的差异表达基因1676个,包括ATP 5MC1、MDH2、ALDH 7A1、GAPDHS、PRPS 1等,其中上调基因894个,下调基因782个。GO分析结果显示,差异表达基因富集在应激反应、蛋白质代谢过程、催化活性等相关条目上,KEGG结果显示,差异表达基因富集到MAPK、PI3K-AkT、Toll-like receptor、Ras等信号通路上。RT-qPCR验证了ATP 5MC1、MDH2、PRPS1、ALDH 7A1和GAPDHS等5个差异表达基因的表达水平,与转录组结果趋势一致。综上,热应激能够调控精子发生相关基因的表达,影响相关信号通路及生物学功能。本研究结果为精子发生的分子调控机制提供线索,并为高温环境下家兔的选育提供理论基础。

去势公兔腥味物质及其脂氧合酶同工酶的研究

应用改进的NPT技术提得去势公兔与正常公兔兔肉腥味物质 ,经气—质联谱比较分析 ,初步确定中级醛类是兔肉腥味物质的主导成分。用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测去势公兔与正常公兔体内脂氧合酶 (LOX ,亚油酸∶氧氧化还原酶 ,EC 1 13 11 12 )同工酶的变化 ,结果显示 ,公兔去势后体内缺少了一种LOX同工酶 。

热应激对公兔精液品质、睾丸组织形态及抗氧化指标的影响

为探讨热应激对公兔精液品质、睾丸组织形态及抗氧化物活性的影响,分别测定高温(31±2)℃与适温(18±2)℃条件下公兔采精量及精子活力、密度、畸形率,并取睾丸组织制作石蜡切片进行组织形态观察及制成组织匀浆测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)。结果表明:热应激致使公兔采精量、精子活力和密度显著下降(P<0.05),睾丸组织细胞严重损伤、数量减少,睾丸组织中MDA含量显著增加(P<0.05),而SOD、GSH-Px活性和T-AOC显著降低(P<0.05)。可见,热应激导致公兔精液品质下降,可能与睾丸组织中抗氧化酶活性降低、自由基生成过多、睾丸组织细胞受损有关。

新蛋白构型GnRH多肽疫苗对公兔生殖性能的影响

用蛋白结构修饰后的促性腺激素释放激素并列体二聚物(G6k-GnRH-Tandem-Dimer,GnRH-TDK)2次免疫公兔,研究了该疫苗对公兔生殖性能和生长情况的影响。12只公兔随机分为免疫组和对照组,免疫组于3月龄初免,4周后加免1次。每周采用放射免疫分析法测定公兔血清睾酮水平,发现免疫组睾酮浓度从82.74±16.03ng/ml降至59.24±16.18ng/ml;观察其体重和性行为,免疫组无明显性行为,体重与对照组接近。免疫后9周屠宰公兔比较睾丸重量、体积和精液质量,进行睾丸组织学分析,发现免疫组睾丸大小、精子密度极显著(P<0.01)低于对照组,其睾丸组织结构病变明显。这些现象表明,用新蛋白构型GnRH多肽免疫后,公兔睾酮分泌减少,睾丸发育受阻,精子密度和活力降低,去势效果好,且不影响动物的生长。

GnRH并列体二聚体主动免疫对公兔性腺的影响

用 Gn RH并列体二聚体主动免疫公兔 ,观察了免疫对公兔性腺及体重的影响。结果表明 ,免疫不影响公兔体重的增长 ,而使公兔睾丸重量降低 ,睾丸纵长缩短 。

17β─雌二醇主动免疫对公兔生殖的影响

以１７β－雌二醇－６－人血清白蛋白对新西兰公兔进行主动免疫，用ＲＩＡ检测抗体滴度和１７β－雌二醇及睾酮浓度，并检测睾丸重量和间质细胞面积。结果，试验组各兔均不同程度地产生了１７β－雌二醇抗体，其血浆１７β－雌二醇浓度极显著地低于对照组〔（２０．３±２１．６）ｎｇ／Ｌ，（１６７．７±４９．６）ｎｇ／Ｌ，Ｐ＜０．００１〕，睾酮浓度极显著地高于对照组〔（７．３±７．１）μｇ／Ｌ，（０．５２±０．２９）μｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１〕。每侧睾丸重量和间质细胞面积均极显著地大于对照组〔（３．９４±０．９３）ｇ和（２５２．２５±８５．７８）μｍ２，（２．９８±０．７２）ｇ和（１６１．７９±３６．４５）μｍ２，Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．００１〕。

成年公兔血清FSH、LH和T水平的研究

通过外科手术连续收集活体公兔外周血样 ,用放射免疫法测定血清促卵泡素 ( FSH)、促黄体生成素 ( LH)和睾酮 ( T)水平。 5只健康成年公兔分别安置颈静脉导管 ,以 2 0 min间隔连续采样 1 0次。结果表明 ,血清 FSH、LH和 T含量分别为 ( 2 4 4.95± 4 5.4 9) IU/ L、( 443.64± 1 88.4 4) IU/ L和 ( 1 32 .4 6± 99.2 4 ) nmol/L;LH和 T均呈波动式释放 ,而

不同生长时期伊拉公兔肌内磷脂脂肪酸动态沉积规律及PLS2分析

以伊拉公兔的背部最长肌（longissimus dorsi，LD）、左后腿肌（left rear leg muscle，LL）和腹部肌肉（abdominal muscles，AM）为实验原料，运用气相色谱测定了不同日龄和部位伊拉公兔肌内磷脂的脂肪酸组成。经对比分析显示：随着日龄的增加，伊拉公兔的LD、LL和AM肌内脂肪含量显著增加（P〈0．05），而磷脂含量显著减少（P〈0．05）。在测试的3个部位中，左后腿肌内磷脂相对含量最高，背部最长肌次之，腹部所占比例最小，但是在此期间伊拉兔肌内脂肪和磷脂在肌肉中所占的绝对比例（新鲜肌肉％）变化均不显著。在35-90d，三个部位肌内磷脂的SFA与MUFA比例均显著增加（P〈0．05），与之相对应的是3个部位的PUFA比例均显著降低（P〈0．05）。经PLS2分析可知，35d兔肉的营养价值较好，而90d兔肉更适宜加工，不同日龄LD、LL和AM的肌内磷脂脂肪酸组成均存在显著性差异，其中LL肌内磷脂不仅相对含量较其他部位高，而且从脂肪酸组成来说营养价值更高。

赖氨酸对种公兔精液品质和血液生化指标的影响

为研究日粮赖氨酸水平对新西兰种公兔精液品质和血液生化指标的影响,选择80只成年健康种公兔,随机分为4组,分别饲喂含0.85%、1.00%、1.15%和1.30%赖氨酸的试验日粮。结果表明:日粮赖氨酸水平可显著影响种公兔采精量、精子密度和畸形率(P<0.05),对血液葡萄糖、白蛋白、球蛋白、白球比、尿素氮、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白质量浓度无显著影响(P>0.05)。种公兔适宜的日粮赖氨酸水平为1.15%。

公兔免疫去势效果观察

畜禽阉割是我国中兽医学的瑰宝,已沿用几千年。去势术的发展经历了手术法、药物法及现在的免疫去势法。手术法去势除要求有熟练的技术外,还容易感染;药物法去势则存在着残留问题,操作也不方便,而免疫法去势可望克服上述两种方法的缺陷。 免疫去势法原理是下丘脑分泌十肽促性腺激素释放激素(LHRH)进入垂体门脉系统。

公兔骶髓缺血损伤动物模型的建立及评估

目的建立公兔不同水平骶髓缺血损伤动物模型并应用球海绵体肌反射(bulbocavernosus sphincter reflex,BCR)对模型进行评估。方法 36只新西兰大白兔公兔随机区组法分为实验组(n=30)和对照组(n=6),实验组按照尾头方向结扎左肾动脉和动脉分叉间腰动脉的水平分为1根、2根、3根、4根和5根组共5亚组(n=6),分别结扎1根、2根、3根、4根和5根腰动脉,记录血管结扎后2 h及2 d的BCR波,分别在麻醉清醒和血管结扎后2 d进行运动功能评分,2 d后取骶髓HE切片观察。对照组(n=6)用于排除麻醉、手术对BCR的影响。结果对照组麻醉和手术后不同时间的波幅应用单组重复测量数据的方差分析,差异均无统计学意义(F=1.234和F=1.492,均P>0.05);对照组麻醉和手术后不同时间的潜伏期应用单组重复测量数据的方差分析,差异均无统计学意义(F=0.911和F=3.80,均P>0.05)。实验组术前、结扎后2 h和结扎后2 d三个时间点BCR波幅与基线波幅的百分比值,经单因素重复测量数据的方差分析差异有统计学意义(F=1029.943,P<0.05);实验组术前、结扎后2h和结扎后2 d三个时间点BCR潜伏期,经单因素重复测量数据的方差分析,结果差异有统计学意义(F=22.711,P<0.05)。1根组、2根组手术前后和3根组术后2 d运动功能评分无变化;3根组麻醉清醒后和4根、5根组手术后不同时间运动功能评分与对照组和手术前经Wilcoxon秩和检验均P<0.05,差异均有统计学意义。结论通过尾头方向分别结扎左肾动脉和动脉分叉间不同水平的腰动脉可以建立不同程度的骶髓缺血损伤动物模型。

日粮酸性洗涤纤维水平对新西兰种公兔精液品质、血液生化指标和生殖激素的影响

试验旨在探讨不同酸性洗涤纤维(acid detergent fibre,ADF)水平对2岁新西兰种公兔精液品质、血清生化指标和生殖激素的影响。选用2岁龄种公兔80只,按体重随机分成4组,每组20个重复,每个重复1只,分别饲喂ADF水平为13%、16%、19%、22%的日粮。结果表明,ADF水平对试验兔射精量和精液品质影响差异显著(P<0.05),试验3组射精量显著高于试验1、2组(P<0.05),试验3、4组精液密度显著高于试验1、2组(P<0.05),试验3组精子活力显著高于其它3组(P<0.05);ADF水平对试验兔血清总蛋白和总胆固醇影响差异显著(P<0.05),试验2、3组总蛋白显著高于试验1组(P<0.05),试验1组胆固醇显著高于其它组(P<0.05);ADF水平对试验兔生殖激素含量影响显著(P<0.05),试验2组促黄体素、睾酮和雌二醇显著高于其它3组(P<0.05),试验2组促卵泡素显著高于试验1、4组(P<0.05)。因此,2岁新西兰种公兔适宜的ADF水平应为16%～19%,甚至可以提高到22%。

LRH—A_2、稀土对热应激安哥拉公兔睾丸机能的影响

选择热应激唐行系安哥拉公兔32只,随机分成4组,每组8只。试验1组肌注LRH—A_2,每3天1次,每次5μg,5次后改为5天1次,共注8次。试验2组饲料中加入200ppm 的稀土。试验3组肌注 LRH—A_2(同试验1组)和饲喂稀土日粮(同试验2组)。对照组不予处理。历时一个月。各组兔日粮相同,每只日喂150克,同时补喂青草400克。分别于试验始末测定睾丸体积,采集精液,测定射精量、精子密度及活力,并每组随机配种(人工授精)30只母兔,观察配种受胎率。结果表明:3个试验组睾丸分别比试验前增大9.94%、5.37%和16.71%(P>0.05),而对照组缩小了26.56%(P<0.05);4个组公兔射精量分别增加了0.28、0.31、0.24、0.13mL;精子密度增加了0.1、0.07、0.65和0.1亿/mL;精子活力分别提高0.23、0.24、0.42和0.09。母兔受胎数分别为19、20、23和11只,配种受胎率分别为63.33%、66.67%、76.67%和36.62%,均以试验3组效果最佳(P<0.01和 P<0.05)。试验初步表明,LRH—A_2和稀土元素对热应激公兔睾丸机能恢复有较好效果,两者配合使用有协同作用。