六价铬还原细菌Bacillus cereus S5.4的筛选鉴定及还原特性研究

六价铬生物毒性极大，是造成环境污染的主要重金属之一，其生物治理策略已引起了广泛关注。已经发现许多微生物具有六价铬抗性和还原性，但能工业应用的还十分有限。从宝钢电镀污泥中分离得到一系列高六价铬抗性菌株，其中一株S5．4显示出高六价铬还原性，经形态和生理生化特征及16s rDNA序列比对，鉴定为Bacillus cereus。该菌株好氧生长，在固体LB培养基上培养48h能耐受40mmol／L Cr^6＋，并对Mn^2＋、Ba^2＋和Mo^6＋也显出高抗性；在液体LB培养基中培养72h完全还原2mmol／L Cr^6＋，并能在补充培养基和六价铬的条件下连续还原。该菌株还原六价铬时，最适浓度为2mmol／L Cr^6＋，最适温度范围30～37℃，最适pH7～9。

地下海水池塘六价铬还原菌的多样性研究

从六价铬超标的地下海水池塘中采集底泥,以2216E培养基添加重铬酸钾为手段,筛选出对六价铬离子具有抗性的特异菌株。用细菌通用16SrDNA引物进行PCR扩增,PCR产物纯化后连接pMD18-T载体,导入大肠杆菌感受态细胞。然后对插入片段测序获得分离培养菌株的16SrDNA碱基全序列。通过NCBI比对,对分离的抗性菌株进行分子鉴定,确定其所属的分类地位。用PHYLIP软件,对16SrDNA碱基序列构建系统进化树,分析地下海水池塘六价铬还原菌的多样性。试验结果获得8株对六价铬有明显抗性的菌株,测序后发现8株菌为不同种的菌株,16SrDNA核酸序列相似度为88%,与已发表的序列或菌株的相似性为98%以上,属于6个属的8个不同的种。研究结果表明,铬超标地下海水池塘的活性底泥中六价铬抗性细菌菌株多样性十分丰富,通过进一步的还原性研究,可以筛选出对六价铬有还原特性的抗性菌株。