基于网络药理学探讨六君安胃方减少结肠癌化疗期间消化道不良反应的作用机制研究

目的通过网络药理学方法探讨六君安胃方减少结肠癌化疗期间消化道不良反应的作用机制。方法通过检索中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)对六君安胃方中六味中药的化学成分、作用靶点进行筛选,并在GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等相关数据库中筛选出"chemotherapy-induced nausea and vomiting(CINV)"、"chemotherapy-induced diarrhea(CID)"相关靶点。利用STRING和Cytoscape3.6.0构建PPI网络图并通过网络拓扑分析获得关键蛋白靶点;利用R软件ClusterProfiler进行GO及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路功能富集分析;利用AutoTools1.5.6进行有效化学成分与关键蛋白靶点的分子对接。结果六君安胃方中的中药有效化学成分共103个,潜在作用靶点406个,CINV、CID疾病相关作用靶点851个,通过PPI网络拓扑分析得到关键蛋白靶点,前5个分别为AKT1、MAPK3、MAPK1、MAPK8、JUN;GO富集结果显示,氧化应激反应、凋亡信号通路调节、膜筏、膜微区域、泛素样蛋白连接酶结合、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激活酶活性等排名靠前;KEGG富集通路结果显示,PI3K-AKt信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路等信号通路为主要作用通路;分子对接显示党参中的木犀草素与AKT1结合性最好。结论六君安胃方可能通过调节AKT1、MAPK3、MAPK1等关键蛋白,干预PI3K-AKt等相关炎症信号通路来减少化疗期间消化道不良反应。

基于质谱分析和网络药理学探究六君安胃方对化疗相关性腹泻小鼠小肠组织NF-κB与iNOS蛋白的影响

目的探究六君安胃方防治化疗相关性腹泻的潜在关键靶点及其对化疗相关性腹泻小鼠小肠组织NF-κB与iNOS蛋白的影响,揭示其抗炎止泻活性成分及分子作用机制。方法采用高分辨质谱技术对六君安胃方的化学成分进行定性分析。检索PubChem数据库获得六君安胃方活性成分,利用Swiss Target Prediction数据库进行靶点预测;检索DisGeNET、OMIM、GeneCards数据库获得化疗相关性腹泻相关靶点;将六君安胃方活性成分靶点与腹泻疾病相关的靶点取交集,得到六君安胃方治疗化疗相关性腹泻的潜在靶点;采用Cytoscape 3.7.1软件构建PPI网络及“成分-靶点-通路”网络;DAVID数据库对交集靶点进行GO功能、KEGG通路富集分析;利用Autodock软件将网络中预测到的潜在活性成分和靶点进行分子对接验证。将60只C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、阳性对照组及六君安胃方高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组小鼠腹腔注射氟尿嘧啶注射液50 mg/kg制备化疗相关性腹泻小鼠模型。各组给予相应药物干预14 d后,采用Western blot法检测小鼠空肠NF-κB、iNOS蛋白表达。结果共鉴定出197个化学成分,经筛选得到156个六君安胃方防治化疗相关腹泻的关键成分,涉及82个潜在作用靶点,主要通过NOS2等关键靶点,癌症通路、PI3K-Akt、NF-κB信号通路发挥作用。实验结果显示,六君安胃方可降低化疗相关性腹泻小鼠肠组织NF-κB、iNOS蛋白表达。结论揭示了六君安胃方的药效物质基础,可通过降低NF-κB及iNOS水平,影响肠道组织的炎症反应,改善肠黏膜屏障功能,进而改善化疗相关性腹泻。