六味地黄醇提水洗脱部位对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响

目的:探讨六味地黄醇提水洗脱部位对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响,评价其延缓脑衰老的作用。方法:ICR小鼠随机分为5组:空白组、模型组、维生素E组、六味地黄醇提水洗脱部位低、高剂量组。皮下注射D-半乳糖0.14 g.kg-1.d-1制备小鼠亚急性衰老模型。用跳台和Morris水迷宫法检测各组小鼠的学习记忆能力。用酶标法测定各组小鼠血清和脑组织匀浆中衰老相关指标。结果:六味地黄醇提水洗脱部位能使衰老小鼠跳台实验反应时间缩短,错误次数显著减少;水迷宫试验逃避潜伏期时间缩短,穿越次数增多(P<0.05或P<0.01),提高衰老模型小鼠血清SOD、GSH-Px及脑组织Na+-K+-ATP酶活性,并升高GSH/GSSG比值,减少血清MDA和脑组织NO含量,降低NOS活性(P<0.05或P<0.01);减少脑内Aβ含量,但与模型组比较无显著性差异。结论:六味地黄醇提水洗脱部位能够改善D-半乳糖衰老模型小鼠的学习记忆障碍,提高脑组织的抗氧化能力,具有一定延缓脑衰老的作用。

六味地黄汤醇提水洗脱部位对小鼠阴虚模型的影响

目的观察六味地黄汤醇提水洗脱部位对阴虚小鼠体质量、免疫功能、肝组织氧化指标和cAMP、cGMP、T3、T4含量的影响,评价其滋阴作用。方法将小鼠每日灌胃给予甲状腺片(150 mg·kg-1)和利血平(1 mg·kg-1)致阴虚模型,同时给予治疗药物,7 d后检测小鼠体质量增长率、胸腺、脾指数及血浆中cAMP、cGMP、T3、T4,肝匀浆SOD、GSH-Px和MDA等,观察六味地黄汤醇提水洗脱部位对阴虚型小鼠的影响。结果六味地黄汤醇提水洗脱部位能提高阴虚小鼠体质量增长率、胸腺和脾脏指数,降低阴虚小鼠肝组织中SOD和GSH-Px活性,升高MDA含量,降低血清cAMP、T3、T4含量和cAMP/cGMP比值,高剂量组与模型组比较有统计学意义(P<0.05,P<0.01);六味地黄汤亦可改善以上各项指标,但与模型组相比无统计学意义。结论六味地黄汤醇提水洗脱部位具有显著滋阴作用,优于传统六味地黄汤煎剂。

六味地黄汤水提醇溶部位对2型糖尿病大鼠胰岛及肾脏组织形态结构的影响

目的研究六味地黄汤水提醇溶部位对2型糖尿病大鼠胰岛及肾脏的影响。方法采用高糖、高脂饲料喂养4周后,再行腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)且空腹血糖(FBG)≥16.7 mmol/L的大鼠建立2型糖尿病动物模型,将其随机分为空白组、模型组、罗格列酮组和六味地黄汤水提醇溶部位组,观察给药1个月后大鼠空腹血糖(FBG)和大鼠胰岛、肾脏组织的形态结构。结果六味地黄汤水提醇溶部位能降低2型糖尿病大鼠FBG值(P<0.01),对其受损的胰岛及肾脏有修复作用。结论六味地黄汤水提醇溶部位能够修复2型糖尿病大鼠的胰岛及肾脏,胰岛及肾脏是具干预2型糖尿病作用的靶位之一。

菊花不同极性洗脱部位体外抗氧化活性研究及成分分析

目的通过体外抗氧化实验初步明确菊花不同极性洗脱部位,并对其成分组成进行辨识。方法采用中压制备色谱法对菊花醇提物进行分离,使用25%、40%、70%甲醇溶液洗脱得到不同极性部位组分,通过DPPH自由基清除法、总抗氧化能力法(FRAP)和亚硝酸盐清除法对不同极性部位组分的抗氧化活性测定,并利用高效液相色谱法对各部位化学成分进行对照辨识。结果菊花醇提取物不同极性洗脱部位均有一定的抗氧化活性,且在一定浓度范围内呈显著剂量-效应关系,但不同部位的抗氧化活性有差异;在体外抗氧化实验中不同部位抗氧化活性大小顺序为40%甲醇洗脱物>25%甲醇洗脱物>70%甲醇洗脱物;经高效液相色谱(HPLC)分析25%甲醇洗脱物为绿原酸部位,40%甲醇洗脱物为二咖啡酰基奎宁酸类及黄酮苷,70%甲醇洗脱物为黄酮苷元。结论40%甲醇洗脱部位是菊花发挥抗氧化作用的主要活性部位,其主要活性成分为以木犀草苷为代表的黄酮苷类和以3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸为代表的二咖啡酰基奎宁酸类化合物,可为菊花药效物质研究提供参考。

六味地黄汤水提醇溶部位的成分分析及对小鼠的补肾作用机制研究

目的研究分析六味地黄汤水提醇溶部位的主要成分及其补肾作用机制。方法用Hypersile C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(27∶73)为流动相,检测波长为236 nm;流速为1.0 m L·min^(-1);柱温为25℃,用高效液相色谱法测定六味地黄汤水提醇溶部位的主要成分及含量。按照性别和体重将30只小鼠随机分为3组(n=10):正常组、模型组、实验组。实验组按9.75g·kg^(-1)体重灌胃六味地黄汤水提醇溶部位,连续给药9 d;在给药第6天,除正常组外,其他各组按50 mg·kg^(-1)体重灌胃氢化可的松,连续4 d,建立肾阴虚小鼠模型。第10天,用ELISA法测定小鼠血浆环磷酸腺苷(c AMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)含量,用放射免疫分析法测定小鼠血清促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)及睾酮(T)含量。结果莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷的线性范围分别在0.24~2.40μg(r=0.999 6)、0.14~1.38μg(r=0.999 1)、0.12~1.20μg(r=0.999 1)及0.24~2.40μg(r=0.999 4)内,线性关系良好;这4种成分的回收率分别为(100.22±1.80)%,(100.83±1.94)%,(102.40±1.47)%,(101.40±1.50)%,RSD分别为1.80%,1.92%,1.44%,1.50%。在六味地黄汤水提醇溶部位中按生药量计算,莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷的平均含量分别为0.20%,0.02%,0.06%,0.13%。给药9 d后,模型组与实验组c AMP含量分别为(8.20±0.63),(6.90±0.15)nmol·L^(-1),差异有统计学意义(P<0.01);模型组与实验组FSH、E2、T含量分别为(0.54±0.10),(0.88±0.04)m U·m L^(-1);(13.93±0.29),(15.48±0.43)pg·m L^(-1);(2.23±0.14),(5.63±0.48)ng·m L^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论六味地黄汤水提醇溶部位主要含有马钱苷、莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷,其补肾作用机制可能与其调节c AMP含量及HPG轴中各环节激素水平有关。

土大黄提取物对人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响

目的土大黄根醇提物化学组分分析及其对人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)增值的影响。方法利用D101大孔树脂、HPLC对土大黄根70%乙醇提取物(原粗提取物)进行分离纯化、主要化学组分分析,同时观察对HaCaT细胞增殖的作用。结果通过D101大孔树脂处理得到了30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位的出膏率分别为5.4%、14.8%、11%、0.72%。HPLC检测得知,30%洗脱部位占0.151%,成分为大黄素;50%洗脱部位占1.952%,成分为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚;70%洗脱部位占21.409%,成分为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚;90%洗脱部位占1.927%,成分为大黄酸、大黄素、大黄素甲醚;土大黄根70%乙醇提取物(原粗提取物)占1.591%,成分为芦荟大黄素和大黄酸;对HaCaT细胞增殖的抑制作用由强到弱依次为90%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位、50%乙醇洗脱部位、70%乙醇提取物(原粗提取物)、30%乙醇洗脱部位,抑制率分别为17.55%、16.66%、10.99%、10.25%和7.86%。结论土大黄根醇提物70%乙醇洗脱部位是最佳富集部位(21.409%)、也是最佳洗脱部位。土大黄根70%乙醇提取物(原粗提取物)及其不同洗脱部位均对HaCaT细胞增殖具有一定的抑制作用,其作用可能与土大黄所含的蒽醌类成分有关,提示土大黄具有治疗银屑病的作用。

六味地黄汤有效部位对糖尿病脑病大鼠海马组织病理改变的影响

目的:通过观察六味地黄醇提水洗脱部位对糖尿病脑病模型大鼠海马组织氧化应激及神经营养因子表达的影响,评价其对模型大鼠的脑保护作用。方法:雄性SD大鼠,除空白组外其余高糖高脂饲料喂养两个月,腹腔注射STZ 40mg/kg建立糖尿病脑病模型,模型成功后随机分成模型组,六味地黄醇提水洗脱部位低(2.33 g/kg)、高剂量组(9.32 g/kg)、罗格列酮组(5mg/kg),给药一个月后,大鼠称重、眼眶静脉取血,检测血糖。部分动物处死取脑制备海马组织匀浆检测CAT、LPO、iNOS、Na+-K+-ATP酶;其余动物灌注取脑做脑组织病理切片,进行BDNF、IGF-1免疫组化染色,观察海马组织神经营养因子表达情况。结果:六味地黄醇提水洗脱部位可使模型大鼠体重增加,血糖降低(p<0.05或p<0.01);增强CAT、Na+-K+-ATP酶活力,降低iNOS及LPO水平;免疫组化染色显示海马DG颗粒细胞层神经营养因子BDNF和IGF-1表达增多。结论:六味地黄醇提水洗脱部位可通过降血糖,抗氧化,增强神经营养因子表达等途径改善糖尿病模型大鼠海马组织病变,具有一定脑保护作用。