阿米替林中毒对大鼠心脏兰尼碱受体的影响

通过研究阿米替林中毒对大鼠心脏兰尼碱受体2的影响,探索阿米替林的心脏毒性机制。方法 50只健康成年SD大鼠,随机分为5个AMI染毒组及1个空白对照组,根据体重腹腔注射15mg/ml的AMI溶液,观察中毒症状、死亡数量和死亡时间,对24小时未死亡的大鼠颈椎脱臼处死,然后通过iTRAQ技术检测大鼠心肌心脏兰尼碱受体2蛋白含量。结果 大鼠AMI急性中毒主要症状为少动、抽搐、异常呼吸和其他症状;65mg/kg、78mg/kg、94mg/kg、113mg/kg和136mg/kg染毒组大鼠心肌组织中RyR2含量与对照的比值分别为1.034、1.028、0.967、0.934、0.953。结论 阿米替林中毒对大鼠心脏兰尼碱受体2的含量有影响,低剂量组含量上升,高剂量组含量下降,影响其含量变化的机制还需进一步研究。

兰尼碱受体2基因突变与多种类型遗传性心律失常相关

兰尼碱受体2(ryanodine receptor 2,RyR2)是心肌细胞肌质网上重要的钙离子释放通道,在介导心肌收缩和舒张中发挥关键作用。近年来,越来越多的研究报道,编码RyR2蛋白的RYR2基因突变可引发儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速、长QT综合征、特发性心室颤动和心房颤动等多种类型遗传性心律失常。本文旨在综述RYR2基因突变导致的RyR2离子通道功能异常与多种类型遗传性心律失常的发生相关。全面认识RyR2相关的多种遗传性心律失常,将为临床诊疗遗传性心脏疾病开拓思路。

乙酰胆碱受体抗体及兰尼碱受体抗体双阳性新生儿短暂性重症肌无力1例

目的探讨乙酰胆碱受体(AChR)抗体和兰尼碱受体(RyR)抗体双抗体阳性新生儿短暂性重症肌无力(TNMG)病儿的临床特点、诊疗和预后。方法回顾性分析南京医科大学附属连云港医院2021年3月收治的1例AChR与RyR双抗体阳性TNMG的临床资料,并复习相关文献,为早期识别提供临床思路。结果男,30 min,因“气促、呻吟30 min”入院,入院第2天出现呼吸困难逐渐加重,提高氧饱和度仍不能维持在正常范围,自行进奶差,吸吮能力差,偶有吐奶,哭声低。新斯的明试验阳性,神经肌肉疾病检测提示AChR抗体和RyR抗体阳性,其母有3年重症肌无力病史。予气管插管机械通气,鼻饲奶喂养,溴吡斯的明片口服等治疗15 d,病儿病情好转出院,出院后门诊随访至3个月,病儿吃奶好,智力及体格发育在正常范围。结论重症肌无力母亲分娩的新生儿均应转入新生儿重症监护室密切监护,且有TNMG病史的婴儿应长期随访。

细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3与ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块形成的关系

目的:观察细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3(ryanodine receptor 3,RYR3)在动脉粥样硬化斑块形成过程中的改变,探讨两者的相关性。方法:选取6周龄雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个时点处死动物取主动脉根部制作连续切片。(1)HE染色,观察组织形态学的变化,计算机图像分析仪测量斑块面积和血管管腔面积,计算校正斑块面积(斑块面积/血管管腔面积)。(2)免疫组织化学染色,计算机图像分析仪测定不同周龄小鼠细胞钙离子转运蛋白RYR3表达变化。结果:与同周龄对照组小鼠相比,ApoE-/-小鼠体内RYR3表达显著减少(P<0.05),随着ApoE-/-小鼠周龄的增加,RYR3的表达明显减少,且与斑块面积/血管管腔面积呈负相关(r=-0.652,P<0.01)。结论:细胞钙离子转运蛋白RYR3参与动脉粥样硬化的病理过程,且与动脉粥样硬化斑块的形成密切相关。

缬沙坦对心力衰竭家兔心肌细胞肌浆网兰尼碱受体的影响

目的:探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌细胞肌浆网兰尼碱受体(Ry R2)表达及其释钙功能的改变以及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义。方法:27只家兔随机分为三组:假手术组(n=9)、心衰组(n=9)和缬沙坦组(n=9),通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及心肌细胞肌浆网Ry R2的表达和功能的改变。结果:与假手术组比较,心衰组左心室重量指数、左心室舒张末压显著升高(P<0.05),左心室短轴缩短率及左心室射血分数明显降低(P<0.05);与心衰组比较,缬沙坦组左心室重量指数、左心室舒张末期压力显著降低(P<0.05),左心室短轴缩短率及左心室射血分数明显升高(P<0.05);心衰组心肌细胞肌浆网Ry R2表达和其释钙功能显著低于假手术组(P<0.05);缬沙坦组心肌细胞肌浆网RyR2表达和其释钙功能显著高于心衰组(P<0.05)。结论:长期应用缬沙坦能够改善心脏舒缩功能,可能与其增加心肌细胞肌浆网RyR2表达和其释钙功能有关。

兰尼碱受体及其法医学意义

兰尼碱受体是心肌细胞内的钙释放通道。在心脏缺血或肥大等病理过程中兰尼碱受体的功能和数量也会发生明显变化,从而导致心肌细胞处理细胞内钙离子的能力下降或细胞内钙超载,触发致死性的室性心律失常,诱发心源性猝死。

雌激素对大鼠阴道平滑肌细胞兰尼碱受体1和L-型钙通道V1.3表达的影响

目的:研究卵巢去势大鼠阴道平滑肌中兰尼碱受体1(RyR1)和L-型钙通道V1.3(Cav1.3)的表达,以探讨RyR1和Cav1.3与雌激素在女性性功能障碍中的相关性。方法:40只8周龄雌性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组)、假手术4周组(B组)、去势2周组(C组)和去势4周组(D组)。术后2、4周运用全自动化学发光免疫法测定各组大鼠血清雌激素水平,RT-PCR和免疫组化法检测阴道平滑肌中RyR1和Cav1.3的mRNA及其蛋白表达。灰度比值表示RyR1和Cav1.3的mRNA表达量,积分光密度值表示RyR1和Cav1.3蛋白表达量。结果:血清雌激素水平C组[(0.210±0.026)nmol/L]较A组[(0.505±0.053)nmol/L]显著降低(P<0.01),D组[(0.130±0.031)nmol/L]较B组[(0.476±0.058)nmol/L]显著降低(P<0.01)。RyR1和Cav1.3在各组大鼠阴道平滑肌内均有表达。RyR1mRNA灰度比值C组(0.680±0.073)较A组(0.950±0.064)显著降低(P<0.01),D组(0.220±0.032)较B组(0.890±0.072)显著降低(P<0.01);Cav1.3mRNA灰度比值C组(0.580±0.043)较A组(0.870±0.019)显著降低(P<0.01),D组(0.190±0.020)较B组(0.820±0.021)显著降低(P<0.01)。RyR1蛋白表达积分光密度值C组(96.67±7.75)较A组(123.69±10.66)显著降低(P<0.01),D组(86.45±8.16)较B组(109.31±9.87)显著降低(P<0.01);Cav1.3蛋白表达积分光密度值C组(87.97±6.96)较A组(106.46±8.04)显著下降(P<0.01),D组(69.43±8.30)较B组(97.38±7.56)显著降低(P<0.01)。结论:RyR1和Cav1.3在大鼠阴道平滑肌内均有表达,雌激素可能通过影响大鼠阴道平滑肌中RyR1和Cav1.3的表达参与女性性反应调控。

双酚A通过雌激素受体影响小鼠睾丸和附睾兰尼碱受体基因的表达

目的:观察双酚A对雄性小鼠睾丸和附睾中兰尼碱受体(ryanodine receptors,RyRs)基因表达的影响及雌激素受体(estrogen receptor,ERα和ERβ)在其中的作用。方法:将野生型小鼠、ERα基因敲除小鼠(αERKO)和ERβ基因敲除小鼠(βERKO)均随机分为双酚A组[100μg/(kg·d)]和对照组,经口灌胃染毒30 d后(对照组以玉米油灌胃),荧光定量PCR法检测睾丸和附睾中RyR1,RyR2和RyR3 mRNA表达的变化。结果:双酚A可使小鼠睾丸中RyR1和RyR3 mRNA表达水平均明显升高,而RyR2 mRNA表达水平显著降低,附睾中RyR1、RyR2和RyR3 mRNA表达水平明显升高(P均<0.05)。应用ERKO小鼠实验结果显示,双酚A通过ERα和ERβ影响睾丸RyR2以及附睾RyR2和RyR3 mRNA的表达,对附睾RyR1 mRNA的调控则依赖于ERα。结论:双酚A可以影响雄性小鼠睾丸和附睾中兰尼碱受体3种亚型的基因表达,ERα和ERβ在此过程中发挥了重要作用。

尿皮质素诱导心肌细胞内钙离子升高与兰尼碱受体活化的关系研究

目的探讨尿皮质素(urocortin)诱导乳大鼠心肌细胞内钙离子浓度[Ca2+]i升高与兰尼碱受体(RyR)之间的关系。方法采用体外培养的乳大鼠心肌细胞进行指标测定。采用Till阳离子测定系统,以Fura-2/AM为荧光探针,观察心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化。结果 urocortin使心肌细胞内钙离子浓度升高;兰尼碱受体抑制剂Ryanodine和IP3受体抑制剂Xestospongin C能够部分抑制urocortin诱导的心肌细胞内钙离子浓度升高,差别有统计学意义(P<0.01)。结论urocortin能够诱导心肌细胞内钙离子浓度[Ca2+]i升高,其作用可能与活化RyR和IP3受体使心肌细胞肌质网内钙离子释放有关。

钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ和兰尼碱受体2与内质网钙渗漏关系的研究进展

内质网是人体Ca2＋中转站,是钙循环的重要调节中心.内质网通过调节心肌细胞内游离Ca2＋的浓度来控制心肌的收缩和舒张.心肌细胞膜上L型Ca2＋通道开放,形成内向Ca2＋流激活肌浆网Ca2＋释放通道,使得大量Ca2＋进入细胞质.当细胞质内游离Ca2浓度达10-5mmol/L时,肌钙蛋白被激活,使肌球蛋白和肌动蛋白相互接触,引起心肌收缩.心肌收缩后内质网钙泵又将细胞内游离Ca2＋重新泵回内质网中储存.当细胞质内游离Ca2＋浓度降低至10-7mmol/L时,肌球蛋白和肌动蛋白分离,引起心肌舒张,这样就形成一个完整的心脏收缩-舒张过程.任何原因导致的内质网Ca2＋渗漏,都会引起Ca2＋调节异常,使得心肌细胞收缩、舒张功能障碍,最终引起心力衰竭和心律失常等疾病的发生.钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）是细胞内Ca2＋的关键调节分子,兰尼碱受体2（RyR2）是内质网Ca2＋释放的重要通道,本文对CaMKⅡ-RyR2和内质网钙渗漏的关系进行综述.

肌质网兰尼碱受体在心力衰竭中的作用

肌质网在心肌的舒缩功能中有重要作用 ,心力衰竭时其功能及组成蛋白发生变化 ,尤其是肌质网兰尼碱受体钙释放通道越来越受到重视。心力衰竭时兰尼碱受体通道过磷酸化使其与FKBP12 .6分子的结合能力下降 ,引起Ca2 + 信号传导的去耦联 ,兴奋 收缩耦联的丧失和舒张时肌质网的Ca2 + 释放等 ,可以导致心肌去极化和触发致死性的室性心律失常。β

基因突变致心肌组织兰尼碱受体功能缺陷的研究进展

兰尼碱受体是心肌细胞上的一种钙离子释放通道,当基因发生突变时可导致延迟后除极致心脏猝死性室性心动过速的发生,但到目前为止,具体的分子生物学机制却不是很清楚,可能与其调节蛋白-FK506结合蛋白的解离、Ca^(2+)激活域值降低及通道内部各功能域之间作用受损等引起的舒张期钙离子渗漏有关,现就关于基因突变所致兰尼碱受体功能障碍发生机制的各种学说做一综述。

雄激素对大鼠阴茎海绵体平滑肌中兰尼碱受体1和电压门控钙离子通道1.3表达的影响研究

目的:研究兰尼碱受体1(RyR1)和电压门控钙离子通道1.3(CaV1.3)在去势大鼠阴茎海绵体平滑肌的表达,探讨其在去势后勃起功能障碍发生中的作用。方法:40只8周龄雄性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组),假手术4周组(B组),去势2周组(C组),去势4周组(D组)。术后实验各组检测血清睾酮(T)水平,免疫组化及RT-PCR技术检测RyR1和CaV1.3在大鼠阴茎海绵体平滑肌中的表达。结果:血清T水平C组[(15.97±5.67)nmol/L]和D组[(2.03±1.57)nmol/L]分别较A组[(90.54±20.13)nmol/L]和B组[(120.35±30.32)nmol/L]显著下降(P<0.05)。RyR1、CaV1.3在各组大鼠阴茎海绵体平滑肌中均有表达,RyR1 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.51±0.24)和D组(0.33±0.15)分别较A组(1.53±0.25)和B组(1.37±0.23)显著降低(P<0.05);CaV1.3 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.50±0.12)和D组(0.32±0.07)分别较A组(1.33±0.05)和B组(1.25±0.03)显著降低(P<0.05)。RyR1蛋白积分光密度值(IA)C组(120.36±25.78)和D组(67.39±30.54)分别较A组(300.96±135.12)和B组(330.38±128.59)显著降低(P<0.05);CaV1.3蛋白IA C组(103.37±39.52)和D组(67.56±20.15)分别较A组(298.68±126.35)和B组(327.35±117.37)显著降低(P<0.05)。雄激素水平与RyR1、CaV1.3在阴茎海绵体平滑肌中的表达水平具有正相关性。结论:雄激素可能通过RyR1、CaV1.3的表达调控阴茎勃起功能。

兰尼碱受体2参与重大心脏疾病发生发展机制的研究进展

心血管疾病是全球范围内首要的致死原因,严重威胁人类的生命健康。兰尼碱2受体(RyR2)是心肌细胞肌浆网上重要的钙释放通道,其调控机制复杂,一些相关研究仍存在争议。RyR2的基因突变、结构改变、功能障碍或与相关蛋白的相互作用异常均可造成RyR2受体的钙释放阈值降低,引起肌浆网钙异常释放,诱发或加重多种心脏疾病。以RyR2为靶点的药物对心脏疾病很可能具有治疗作用。一种针对RyR2靶点的新药已进入Ⅱ期临床试验,随着RyR2结构、功能及作用机制研究的进一步深入,必将为心血管疾病的早期诊断、鉴别、药物研发等提供更加准确可靠的信息。本文就RyR2参与重大心脏疾病发生与发展机制的研究进行综述。

L型钙离子通道Cav1.3和兰尼碱受体RyR1在老龄大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:研究L型钙离子通道(Cav1.3)及兰尼碱受体(RyR1)在老龄大鼠阴茎海绵体中的表达,为探索老龄性ED发生机制提供依据。方法:A组(2月龄)和B组(18月龄)雄性健康清洁组SD大鼠各10只,测其血清睾酮,采用RT-PCR和免疫组化方法分析两组Cav1.3和RyR1在阴茎海绵体的表达。结果:血清睾酮值在B组较A组显著下降[(1 356±424)ng/Lvs(2 744±964)ng/L,P<0.05]。免疫组化结果积分吸光度(IA)值B组中Cav1.3蛋白表达较A组显著下降(18.65±8.47vs75.48±14.28,P<0.05),B组中RyR1蛋白表达较A组显著下降(21.37±9.64vs78.23±13.57,P<0.05)。Cav1.3 mRNA在B组阴茎海绵体表达较A组显著下降(0.382±0.046vs1.137±0.415,P<0.05),RyR1 mRNA在B组阴茎海绵体表达较A组显著下降(0.146±0.053vs1.215±0.261,P<0.05)。结论:Cav1.3和RyR1在老龄性大鼠阴茎海绵体中表达的降低可能是老龄性ED的发生机制之一。

FKBP12/12.6调控心肌兰尼碱受体的研究进展

某些心血管疾病如心律失常、心力衰竭等与心肌肌浆网兰尼碱受体2(RyR2)功能密切相关。FKBP12/12.6作为RyR2的关键调控蛋白,在稳定RyR2的结构及维持其功能的过程中具有重要作用。通过修复FKBP12/12.6与RyR2之间的相互作用可以改善RyR2功能,达到治疗作用。针对不同发病机制,靶向修复FKBP12/12.6与RyR2之间的相互作用,将成为未来治疗心血管疾病的重要突破点。

兰尼碱受体1结构及其通道门控机制的研究进展

兰尼碱受体（ryanodine receptor,RyR）是位于肌浆网膜上的细胞内Ca2＋释放通道,在骨骼肌和心肌兴奋收缩偶联等生理过程中发挥重要作用。随着单粒子冷冻电镜技术的应用以及数据分析能力的提高,近期来自中国、美国以及德国的3个课题组分别获得了整体分辨率为3.8（1=10-10 m）、4.8和6.1的高清晰RyR1结构图片,相关研究同时发表于2015年第1期的Nature上,是近年来RyR结构及其门控研究的重要进展。RyR1为相对分子质量〉2 200 000的同源四聚体离子通道,主要包括由NTD、SPRY、P1、P2、B-sol以及C-sol等结构域组成的胞质区和由S1~S6、VSL以及CTD等结构域组成的通道区。Ca2＋作为RyR1门控的主要影响因子,能够与胞质区EF-hand亚结构域结合,引起通道构象的变化并最终导致通道的开放。

兰尼碱受体2调节及其与心律失常的关系

兰尼碱受体2是广泛存在于肌浆网上的Ca2+释放通道,受到多种因子的调节,兰尼碱受体2参与心肌细胞的兴奋-收缩耦联,兰尼碱受体2的结构或调节异常与心力衰竭及致死性心律失常的发生关系密切。现对兰尼碱受体2的结构、调节及其在心律失常中的作用机制作一阐述。

兰尼碱受体2在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床病理学意义

目的:探讨兰尼碱受体2(ryanodine receptor 2,RyR2)在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床病理学意义。方法:使用聚合酶链式反应、蛋白质印迹、免疫组织化学染色等方法检测RyR2在浸润性乳腺癌患者乳腺癌、乳腺癌旁和正常乳腺组织样本中的表达水平,并分析其与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移和超声检查特征间的关系。结果和结论:RyR2在浸润性乳腺癌组织中的表达水平显著低于乳腺癌旁和正常乳腺组织(均P<0.01),且其在浸润性乳腺癌组织中的低表达与乳腺癌的组织学分级高、雌激素受体阴性、存在微钙化和淋巴结转移相关(均P<0.05)。结合超声检查和RyR2检测结果能为浸润性乳腺癌的诊断提供更准确的判读结果。

兰尼碱受体2在老龄大鼠术后认知功能障碍中的作用

目的评价兰尼碱受体2(RyR2)在老龄大鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用。方法SPF级健康雄性SD大鼠60只,20月龄,体质量600~650 g,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、POCD组(P组)和丹曲林组(D组)。P组和D组在七氟烷麻醉下行左侧胫骨骨折闭合复位内固定术制备大鼠POCD模型。D组于术前30 min时尾静脉注射RyR抑制剂丹曲林2 mg/kg。分别于术前1 d和于术后7 d时行Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能,并于术后7 d水迷宫实验开始前行旷场实验检测大鼠自发运动功能。水迷宫实验结束后处死大鼠取海马组织,采用Western blot法检测RyR2和裂解的caspase-3的表达,采用流式细胞术检测海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度,HE染色观察海马CA1区病理学结果。结果3组旷场实验运动速度、路程以及旷场中心停留时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,P组术后逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,海马RyR2和裂解的caspase-3表达上调,神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度升高(P<0.05),海马CA1区发生病理学损伤;与P组比较,D组术后时逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,海马RyR2和裂解的caspase-3表达下调,神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度降低(P<0.05),海马CA1区病理学损伤减轻。结论RyR2激活参与了老龄大鼠POCD的过程,可能与增加钙超载诱发的海马神经元凋亡有关。