致病性嗜水气单胞菌保护性抗原的研究

本试验采用SDS－PAGE对10株嗜水气单胞菌（Ah）的外膜蛋白（OMP）和脂多糖（LPS）进行分析，结果显示大多数菌株具有相似的OMP图谱，而LPS则有较大的差异，用鲫鱼抗AhJ-1株全菌血清进行免疫转印，发现S蛋白（S－layerProtein）是70％Ah菌株的共同抗原，而LPS则有明显的抗原多样性，AhJ－1株抗血清仅能与同源菌株起反应。用AhJ－1株HEC毒素（Hemolvticactivity，Enterotoxicity，Cytotoxicity，HEC）的单克隆抗体检测此10株Ah，8株细菌可产生抗原性相同的HEC毒素。用纯化的AhJ－1株的S蛋白、LPS及HEC毒素（预先天活）分别免疫小鼠，强化免疫后，对同源菌株的攻击均能完全保护；S蛋白免疫组和HEC毒素免疫组对异源菌株TPS－30的攻击均能保护，而LPS免疫组则不能完全保护。上述结果表明，S蛋白和HEC毒素是Ah的主要共同保护抗原。AhJ-1株有望成为预防嗜水气单胞菌败血症的疫苗生产菌株。

嗜水气单胞菌主要外膜蛋白对欧洲鳗鲡的免疫保护试验

制备出4株分属3个不同血清型嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白(MOMP)免疫刺激复合物(ISCOMs)亚单位疫苗,腹腔注射免疫欧洲鳗鲡,ELISA法测得免疫后第14d和第30d所采集的血清的平均抗体效价在1∶320—1∶1280之间。免疫印迹结果显示,在印迹膜上对应的位置均可检测到MOMP的主要蛋白条带。第40d的免疫保护试验表明,免疫欧鳗对TPS-30菌株约100倍半数致死剂量的攻击无免疫保护作用,其中的3组被测免疫欧鳗对TPS-30菌株约10倍半数致死剂量的攻击的免疫保护率皆在80%以上。上述试验结果提示,嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白是重要的保护性抗原,在制备成ISCOMs亚单位疫苗的情况下,较小的剂量免疫一次即可显示出较高的相对免疫保护率,且没有明显的血清型特异性。