激光共聚集显微镜检测大肠癌细胞株中Claudin-1的表达

目的检测紧密连接蛋白Claudin-1在人类大肠癌细胞株中表达。方法采用激光共聚集显微镜检测Claudin-1在3株不同转移潜能人类大肠癌细胞株中的表达。结果Claudin-1在SW1116(Dukes’ A期)为细胞膜、细胞浆表达;SW480(Dukes’ B期)以细胞浆表达为主;SW620(Dukes’ C期)为细胞核、细胞浆表达。结论Claudin-1的表达部位随着大肠癌的进展出现异位,即Claudin-1由细胞表面膜转移至细胞浆和细胞核。

垂体腺苷环化酶激活多肽抑制β淀粉样蛋白对Neuro-2a细胞神经毒性作用的机制

通过MTT方法检测细胞活性 ,同时采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子的瞬时运动 ,研究了垂体腺苷环化酶激活多肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide 2 7,PACAP2 7)通过调节细胞内钙对抗淀粉样蛋白Aβ2 5 35引起Neuro 2a细胞神经毒性作用的可能机制。结果表明 ,PACAP在一定浓度范围内 (<0 1μmol/L)可提高Neuro 2a细胞增殖能力并对抗Aβ引起的神经毒性 ,此作用可以被PACAP受体竞争性拮抗剂PACAP6 2 7所抑制。 2 5 μmol/LAβ使细胞内钙离子缓慢上升 ,并有一个较长时间的平台期。 0 1μmol/L的PACAP使细胞内钙离子迅速升高后下降 ,10min后回到接近基线水平 ,伴有较长时间的不应期。用PACAP预处理细胞 10min后Aβ引起细胞内钙的慢上升不再出现。推测 ,PACAP受体激活引起瞬时内向钙离子运动 ,而后伴随一个较长时间的不应期 ,可能是一个消除凋亡或阻止凋亡启动的保护机制。

大光斑低能量Q开关Nd:YAG激光治疗黄褐斑的临床及动物研究

目的探索激光治疗黄褐斑的合适方法和作用机制。方法采用大光斑低能量的QSNY分别进行临床试验和动物实验,并通过皮肤反应、MCI、CLSM和组织病理学等多种方法评估该方法治疗黄褐斑的有效性和安全性。结果临床试验显示：治疗结束后,基本治愈8例,显效25例,好转12例,无效1例,有效率为73.33%;MCI显著降低,较治疗前有统计学意义（P〈0.05）;CLSM见基底层及棘层中下部黑素显著减少,但是可见MC,且树突长。动物实验显示：治疗结束后豚鼠皮肤色素沉着完全消退,MCI显著降低,较治疗前有统计学意义（P〈0.01）,CLSM和组织病理见毛囊周围及基底层黑素颗粒和MC均显著减少;但是随访4周发现色素沉着复发,肉眼达治疗前的80%~90%,MCI显著增高,但较治疗前有统计学差异（P〈0.05）;CLSM和硫酸亚铁染色见黑素颗粒明显增加,MC的数目、密度明显增多。阳性对照组皮肤治疗前后无明显改变。结论大光斑低能量的QSNY治疗黄褐斑短期内疗效肯定,副作用小,但有复发的高风险。

高血黏度对小鼠脑细胞内游离钙浓度及脑组织丙二醛含量的影响

目的 :探讨慢性脑供血不足对脑细胞内 [Ca2 + ]i,脑组织丙二醛 (MDA)及超氧化物歧化酶 (SOD)含量的影响 .方法 :采用高分子右旋糖酐法建立小鼠高血黏度动物模型 ,以Fluo 3/AM为细胞内游离钙离子的荧光指示剂 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定脑细胞内 [Ca2 + ]i 的变化 ;用硫代巴比妥酸法及黄嘌呤氧化酶发光法分别测定脑组织匀浆MDA ,SOD含量 .结果 :高血黏度小鼠脑细胞内 [Ca2 + ]i 明显升高 (P <0 .0 1 ) ,脑组织匀浆中MDA含量明显升高 (P <0 .0 5 ) ,SOD含量明显降低 (P <0 .0 5 ) .相关分析显示小鼠全血高、低切黏度与脑细胞内 [Ca2 + ]i 均呈显著正相关关系 (Spearman等级相关系数分别为 0 .76 9,0 .82 1 ,P <0 .0 1 ) ;全血低切黏度与脑组织MDA含量也呈显著正相关关系 (Pearson相关系数为 0 .72 0 ,P <0 .0 1 ) .结论

Amiloride对离体自发高血压大鼠心肌肥厚的影响

目的:观察amilorid(阿米洛利)对自发高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心肌细胞内pH值(pHi)的影响。方法:胶原酶灌流分离得到单个心室肌细胞,以pH荧光染色剂BCECF/AM染色后,在激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)下,测量细胞内的荧光强度。结果:SHR对照组心肌细胞内荧光强度比正常SD大鼠对照组显著升高(P<0.01);高剂量、低剂量amiloride组和enalapril组心肌细胞内的荧光强度与SHR对照组比较,均明显下降(P值均<0.01);amiloride组低于enalapril给药组(P<0.01)。结论:SHR心肌细胞内pHi明显升高。amiloride,enalapril可以降低SHR心肌细胞内pHi,amiloride的作用比enalapril更明显。