GM-CSF与生长抑素共表达基因疫苗的构建和鉴定

以基因疫苗pVGS/2SS-asd为模板,采用分子生物学方法,分别获得目的片段粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和含有乙肝表面抗原S基因的生长抑素基因(SS)。以共表达质粒pIRES为载体,采用基因工程方法,将GM-CSF和SS基因片段分别克隆到载体的多克隆位点A和多克隆位点B上,构建共表达基因疫苗pIRES-GM-CSF/2SS,旨在同时表达GM-CSF和SS两种蛋白。获得表达质粒后,酶切和测序鉴定该共表达基因疫苗,结果显示,该共表达基因疫苗pIRES-GM-CSF/2SS构建成功,为该共表达基因疫苗的后续研究奠定了良好的基础。

中国流行株HIV及其与细胞因子基因共表达核酸疫苗质粒的构建及表达

以表达中国流行株HIV-1gp120基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV-1gp120基因与IFN基因的核酸疫苗质粒pG-PIFN转染BHK-21细胞,以间接免疫荧光鉴定其表达产物。将上述两种质粒经胫前肌注射BALB/c鼠,检测gp120抗体的产生情况及ConA和Lps诱导的T细胞增殖能力。结果显示,荧光显微镜下pGPIFN转染细胞可见绿色荧光而pGP转染细胞未见绿色荧光。pGPIFN与pGP均可刺激小鼠产生抗gp120抗体,协同注射gp120和IFN基因的小鼠产生的抗体滴度明显高于单独注射gp120的小鼠。pGPIFN免疫鼠对ConA和Lps诱导的T细胞增殖能力明显高于单独注射gp120的小鼠。实验结果表明,协同应用IFN基因可明显加强HIV-1gp120基收稿日期:2002-07-19基金项目:国家自然科学基金项目(3977066);国家杰出青年基金项目(39825119)作者简介:郭 焱(1963-),女,吉林省长春市人,长春中医学院基础医学部副教授,硕士,主要从事分子病毒学研究工作。因的免疫反应,为中国流行株HIV-1核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。

pcIL-18-MAGE-1基因疫苗免疫荷瘤小鼠抑瘤作用

目的观察pcIL-18-MAGE-1基因疫苗对MAGE-1(+)及MAGE-1(-)荷瘤小鼠的成瘤情况和生存时间的影响。方法将稳定表达MAGE-1基因的Hepal-6-MAGE-1细胞,接种于C57BL/6J小鼠,制备MAGE-1(+)荷瘤鼠,利用Hepal-6细胞制备MAGE-1(-)荷瘤鼠,实验设为pcIL-18-MAGE-1基因疫苗免疫组、阴性对照组及空白对照组,观察各组小鼠成瘤时间,肿瘤形成率、生长速率,抑瘤效果及生存期;应用HE观察瘤体病理改变。结果 MAGE-1(+)及MAGE-1(-)荷瘤小鼠的成瘤效果较一致,致瘤性检验差异无显著性(P>0.05);HE结果显示瘤体肿瘤细胞排列不规则,可见核分裂;疫苗免疫组成瘤率,生长速率均小于对照组,差异显著(P<0.05)。成瘤时间、生存时间长于对照组(P<0.05),MAGE-1(+)荷瘤鼠免疫组与MAGE-1(-)荷瘤鼠免疫组比较,抑瘤效果显著(P<0.05)。结论 pcIL-18-MAGE共表达基因疫苗对荷瘤鼠具有一定抗肿瘤作用。