补肾活血中药治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的临床研究

【目的】探讨补肾活血中药治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的临床疗效。【方法】将42例肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者随机分为对照组和治疗组各21例,分别口服中成药骨仙片和补肾活血中药,连续治疗3个月。观察两组患者治疗前后膝部评分、膝部功能评分和X线摄片的变化。【结果】治疗组优良率为85.7%,对照组优良率为66.6%,2组比较差异有显著性意义(P<0.05),提示治疗组疗效优于对照组。两组患者治疗后膝部活动痛、膝部伸直迟滞、行走和上下楼梯困难、使用手杖支撑等评分均有改善,与治疗前比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);两组治疗后总评分均有显著性提高(P<0.05)。【结论】补肾活血中药能改善患者的临床症状和膝关节功能,为治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的有效药物之一。

中药关节康治疗膝骨性关节炎的临床研究

【目的】观察具有补肾活血功效的中药复方关节康(主要由熟地、牛膝、杜仲、枸杞、丹参、红花、木香、补骨脂等药物组成)对膝关节骨性关节炎的治疗效果,为其进一步临床推广运用奠定基础。【方法】参照美国风湿病协会膝关节骨性关节炎(1995)的诊断标准及膝关节骨性关节炎Ⅱ期临床试验方案选择病例,入选病例随机分为关节康治疗组和西乐葆对照组,分别予以关节康片和西乐葆胶囊口服,连续治疗6周。按改良的膝关节骨性关节炎病情评分标准及疗效判定标准,从症状体征(膝部疼痛、膝部功能)及中医证候两方面进行疗效观察。【结果】关节康组与西乐葆组的疗效比较无显著性差异(P>0.05),西乐葆改善疼痛的效果较好(P<0.01),关节康改善中医证候的效果较好(P<0.01)。【结论】关节康治疗膝关节骨性关节炎的疗效与西乐葆相当,且在改善患者全身状况上具有一定优势,值得进一步开发研究和推广应用。

中药内服外敷辅助秋水仙碱治疗急性痛风性关节炎60例

目的探讨中药内服外敷辅助治疗急性痛风性关节炎的临床疗效及对视觉模拟疼痛(VAS)评分、血尿酸(BUA)及血沉(ESR)的影响。方法选取2017年3月至2018年6月河北省沧州中西医结合医院收治的急性痛风性关节炎病人120例,按随机数字表法分为对照组(60例)与观察组(60例)。对照组给予秋水仙碱片治疗,观察组在对照组的基础上联合中药内服外敷辅助治疗。比较两组治疗前后的BUA、ESR、肝肾功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)与血肌酐(Scr)水平变化,VAS评分和临床症状积分,观察其临床疗效和不良反应。结果观察组治疗有效率96.67%高于对照组81.67%(P<0.05);两组治疗前BUA、ESR、ALT、Scr比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后BUA、ESR、Scr组内比较均有好转,且观察组的BUA[(423.17±9.02)umol/L比(510.57±9.76)umol/L]和ESR[(38.49±1.27)mm/h比(46.31±1.18)mm/h]、Scr[(80.96±13.19)umol/L比(90.92±19.73)umol/L]水平均优于对照组(P<0.05);两组治疗前VAS、临床症状积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后VAS、临床症状积分较治疗前均有改善,且观察组VAS[(2.02±1.07)分比(3.11±1.15)分]、临床症状积分[(7.02±2.69)分比(9.62±2.73)分]均低于对照组(P<0.05);对照组与观察组不良反应发生率比较(6.67%比8.33%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药内服外敷辅助治疗急性痛风性关节炎的临床疗效确切,有效改善相关临床症状及血沉、尿酸等水平,具有较高安全性,值得推广。

个体化护理干预在中药熏蒸治疗类风湿性关节炎中的效果观察

[目的]总结个体化护理干预在中药熏蒸治疗类风湿性关节炎疼痛中的作用.[方法]对本院2008年1月至2010年1月收治的类风湿性关节炎68例,在采用中药熏蒸及非激素抗炎止痛药（NSAIDs）治疗的同时,分别应用个体化护理干预（A组,n=35）以及常规护理（B组,n=33）.在完成NSAIDs治疗及缓解疾病的抗风湿药（ DMARDs）治疗20 d 后,比较两组疗效和评定两组的抑郁情况及程度.[结果]A组的总有效率91.4%（32/35）显著高于B 组81.8%（27/33）,差异有显著性（P〈0.05）.A 组治疗后抑郁指数（0.28±0.05）较B组显著减少（0.44±0.05）（P〈0.05）.[结论]在个体化护理干预下中药熏蒸治疗类风湿性关节炎疼痛常规护理效果显著,且能改善患者抑郁情绪。

膝骨关节炎患者中医生存质量量表的建立及应用评价

【目的】探索建立膝骨关节炎中医生存质量量表及中医药温通活血法对血瘀寒凝型膝骨关节炎患者生存质量的评价。【方法】分别采用自拟膝骨关节炎中医生存质量量表和SF-36生存质量调查问卷,对温通活血制剂(筋骨痛消丸)治疗的32例膝骨关节炎患者的生存质量进行了治疗前后的对比观察研究。【结果】膝骨关节炎中医临床症状及日常活动量化评分表评分结果显示,治疗后患者的中医临床症状、日常活动及综合评分均低于治疗前(P<0.01),说明患者的临床症状及日常活动均有明显改善;SF-36生存质量调查问卷评分结果也显示,治疗后患者在躯体健康(PF)、躯体角色功能(RP)、躯体疼痛(BP)、总体健康(GH)、生命活力(VT)、社会功能(SF)、情绪角色功能(RE)、心理健康(MH)等8个维度上较治疗前均有显著性改善(均P<0.01),在综合评分上也有显著性提高(P<0.01)。【结论】自拟膝骨关节炎中医生存质量量表和SF-36生存质量调查问卷对中医药温通活血法治疗血瘀寒凝型膝骨关节炎的疗效做出了基本一致性的评价,既说明温通活血法对膝骨关节炎患者的生存质量有改善作用,也说明该量表能较客观地对该病患者的临床情况作出评价,也反映中国文化和中医特色,为如何建立中医自己的生存质量评价标准提供一条可行的途径,具有一定的借鉴意义。

骨炎定含药血清对人骨关节炎软骨细胞保护作用的机理探讨

[目的]观察骨炎定含药血清对人骨关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原(collage Ⅱ)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。[方法]SD大鼠10只,给予骨炎定2.4 g·kg-1·d-1灌胃,空白对照组给予等容积生理盐水灌胃,连续1个月,采血得含药血清和空白血清;从髋关节炎行关节置换术中获取离体股骨头关节软骨,进行软骨细胞分离培养;治疗组加入骨炎定含药血清,空白对照组加入空白血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测含药血清对软骨细胞增殖的影响,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测含药血清对软骨细胞iNOS和collage Ⅱ信使核糖核酸(mRNA)表达的影响。[结果]骨炎定含药血清可促进软骨细胞增殖,降低iNOS mRNA的表达,增强collage ⅡmRNA的表达,与空白对照组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。[结论]补肾益气活血方剂骨炎定治疗骨性关节炎的疗效可能与其促进软骨细胞增殖,抑制iNOS表达,增强Ⅱ型胶原表达,保护软骨细胞的作用有关。

益气化瘀利水方干预兔膝骨关节炎软骨中胰岛素样生长因子1的变化

目的:观察益气化瘀利水方对实验性兔骨关节炎软骨中胰岛素样生长因子1的影响。方法:实验于2003-07/12在上海中医药大学脊柱病研究所完成。取雄性6月龄新西兰大白兔20只,随机分为正常组、模型组、益气化瘀利水方组和氨糖美辛组,每组5只。按Colombo法建立家兔膝骨关节炎模型,术后第5～8周给药。益气化瘀利水方组给予益气化瘀利水方(由生黄芪、汉防己、左秦艽、地鳖虫、制苍术、川牛膝、全当归、仙灵脾、生米仁等组成,自制制剂)0.09g/(kg·d),氨糖美辛组给予氨糖美辛(非甾体类消炎镇痛药物,批号030401)0.09g/(kg·d),均与兔饲料混合均匀,制成定量颗粒饲料,确保其当天吃完。正常组及模型组均未给药。各组于术后第9周取右胫骨平台关节软骨,采用免疫组化方法进行染色,光镜下观察,并利用图像分析测定其胰岛素样生长因子1表达的积分吸光度。结果:20只新西兰大白兔均进入结果分析。①正常组软骨表面光滑,软骨细胞为圆形呈散在、无序排列。模型组软骨表面广泛碎裂、剥脱,可见软骨细胞簇集。益气化瘀利水方组软骨表面可见小的碎裂,软骨细胞呈散在排列。氨糖美辛组软骨表面粗糙不平,软骨细胞呈散在排列,可见细胞集簇现象。正常组、益气化瘀利水方组、氨糖美辛组软骨细胞及间质中胰岛素样生长因子1染色呈淡黄色。模型组在簇集的软骨细胞的胞浆和细胞核内胰岛素样生长因子1染色呈黄褐色。②各组关节软骨切片胰岛素样生长因子1染色强度的积分吸光度图像分析:模型组明显高于正常组(17.08±2.27,4.75±0.88,P<0.01);益气化瘀利水方组和氨糖美辛组比较,差异无显著性(10.43±2.37,9.27±2.44,P>0.05);益气化瘀利水方组和氨糖美辛组明显低于模型组(F=29.71,P<0.01)。结论:益气化瘀利水方可抑制骨质增生,其作用可能是通过调控胰岛素样生长因子1而达到的。

中药汤剂结合刺络放血治疗急性痛风性关节炎的临床疗效

[目的]探讨中药汤剂结合刺络放血治疗急性痛风性关节炎的临床价。[方法]选取2018年2月至2019年10月本院收治的114例确诊为急性痛风性关节炎的患者,按照入院顺序奇偶法随机分为观察组(n=57)及对照组(n=57)。对照组给予依托考昔片治疗,观察组在对照组的基础上行自拟中药汤剂联合刺络放血治疗.治疗7 d后,比较两组患者治疗前后红细胞血沉率(ESR)、血尿酸(UA)及炎症因子水平,关节肿胀疼痛评分及临床疗效。[结果]观察组患者治疗后总有效率为94.74%(54/57),高于对照组的75.44(43/57)(P<0.05);治疗后两组患者关节肿胀及疼痛评分、ESR及UA水平、白介素6(1L-6)、白介素1β(IL-1β)及C反应蛋白(CRP)水平较治疗前均下降(P<0.05),且观察组较对照组下降更为显著(P<0.05)。[结论]自拟中药汤剂联合刺络放血在治疗急性痛风性关节炎患者能降低血清相关炎症因子水平,缓解患者临床症状,具有较好的临床疗效。

强骨胶囊对绝经后膝骨性关节炎妇女膝关节有效活动度的影响

目的:观察强骨胶囊对绝经后膝关节骨性关节炎妇女膝关节有效活动度的影响,并与雌激素干预效果比较。方法:选择2001/2003在北京妇产医院内分泌门诊就诊或体检的原发性骨性关节炎膝关节功能障碍的绝经妇女120例。设为愿接受实验观察的妇女30例为对照组,年龄41～60岁,绝经时间1～8年,膝关节有效活动度60°～95°。将其余90例妇女随机分为3组,中药+激素组(n=30):采用中药强骨胶囊联合雌激素戊酸雌二醇治疗;中药组(n=30):单纯用中药强骨胶囊治疗;激素组(n=30):单纯用雌激素戊酸雌二醇周期序贯治疗。年龄40～59岁,绝经时间1～7年,膝关节有效活动度57°～100°。各组均于治疗前及治疗后12周采用肌肉功能分析仪测定患者下肢膝关节的有效活动度。结果:按意向处理分析,120例完成了实验过程。中药+激素组、中药组、激素组双下肢膝关节的有效活动范围较治疗前均有明显升高,增高幅值分别为犤(30.13±10.99)%,(18.99±6.15)%,(19.31±6.89)%,(t=-4.018,-3.165,-3.274,P<0.01)犦,其中中药+激素组增加幅度明显高于中药组和激素组犤t=2.981,2.712,P<0.01);激素组略高于中药组(P>0.05)犦;对照组膝关节的有效活动范围较治疗前明显下降,下降幅值为犤(9.67±3.97)%,(t=2.863,P<0.01)犦。结论:中药强骨胶囊能改善绝经妇女膝骨性关节炎膝关节的有效活动度,其效果与雌激素戊酸雌二醇相仿,两药联用效果更好。

青藤碱对佐剂性关节炎大鼠炎症免疫功能的影响

【目的】观察青藤碱(SINO)对佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症免疫功能的影响。【方法】选用SD大鼠随机分为正常组,模型组,SINO低、中、高剂量组(剂量分别为60、120、240 mg/kg),雷公藤多苷(TPT)组(剂量为30 mg/kg);除正常组外,其他组均采用弗氏完全佐剂足跖皮内注射复制AA模型;各组于造模后第12天开始给药,连续12 d;观察不同时间段的大鼠足趾肿胀度及关节评分;采用放射免疫法检测滑膜细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;观察各组大鼠滑膜细胞的超微结构;采用逆转录—聚合酶链反应检测各组滑膜细胞IL-1β mRNA、TNF-α mRNA的表达。【结果】各剂量组SINO均可不同程度降低大鼠足趾肿胀度和关节炎评分,抑制滑膜细胞产生IL-1β、TNF-α,降低滑膜细胞IL-1β mRNA、TNF-α mRNA的表达(P<0.05或P<0.01),恢复AA大鼠滑膜细胞的形态。【结论】SINO治疗类风湿性关节炎的作用可能与其能抑制滑膜细胞分泌炎性介质,恢复滑膜细胞形态有关。

清痹洗方熏洗对类风湿性关节炎热痹证临床疗效的影响

[目的]观察中药清痹洗方(由豨莶草、黄柏、赤芍、生地、汉防己、苍术、旱莲草、蜂房、乳香、没药、徐长卿、红花、牛膝、威灵仙、冰片、薄荷等药物组成)熏洗对类风湿性关节炎(RA)疗效的影响。[方法]将60例RA患者随机分为治疗组(30例)和对照组(30例)。治疗组给予清痹洗方熏洗,并口服通痹灵片和尼美舒利;对照组只服用通痹灵片和尼美舒利,不用清痹洗方熏洗。两组的疗程均为1个月。观察两组治疗前后晨僵时间、握力、压痛关节数、压痛指数、关节休息痛、肿胀关节数、肿胀指数、病人和医生评价等临床症状、体征的变化情况;观察两组患者治疗前后血中类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、白细胞计数(WBC)和血小板计数(PLT)等指标的变化情况。[结果]治疗组的总有效率为90.0%,对照组为66.7%,治疗组的疗效优于对照组(P<0.01)。治疗1个月后,两组患者的晨僵时间、双手平均握力、关节压痛和关节肿胀均有明显改善(与治疗前比较,P<0.01),且治疗组优于对照组(P<0.01)。两组治疗后血中RF、CRP、ESR、WBC和PLT等指标均有下降(与治疗前比较,P<0.01),且治疗组血中CRP、ESR、PLT的下降较对照组明显(P<0.01)。[结论]清痹洗方熏洗对类风湿性关节炎热痹证患者的临床疗效有一定的促进作用。

痹肿消汤对实验性关节炎大鼠血浆肿瘤坏死因子α和滑膜血管内皮生长因子表达影响的同步实验

目的:观察实验性关节炎大鼠应用中药痹肿消汤干预后,促进滑膜血管翳形成的细胞因子肿瘤坏死因子α与血管内皮生长因子表达的变化,并与甲氨喋呤做标准对照。方法:实验于2003-05/11在中西医结合研究所实验室进行。取健康SD大鼠95只,随机分为4组:①正常组(n=5):不进行任何处理,于第25天处死。②模型组(n=30):采用牛II型胶原与完全福氏佐剂注射免疫诱导大鼠实验性关节炎模型,不给药。③甲氨喋呤组(n=30):同前造模,造模后即灌服甲氨喋呤0.43mg/kg,每周1次。④痹肿消汤组(n=30):同前造模,造模后即灌服痹肿消汤(白花蛇舌草、肿节风、薏米、络石藤、丹参、骨碎补等组成,2.07g/mL)10mL/kg,2次/d。后3组于造模后21d重复免疫1次,在造模后第25,30,35,40,45天分别处死6只大鼠,各组大鼠不同时间点血浆肿瘤坏死因子α水平用放射免疫法测定,滑膜组织血管内皮生长因子表达水平以免疫组化法检测,两种因子之间的关系用直线相关分析。结果:纳入的95只大鼠全部进入结果分析。①血浆肿瘤坏死因子α水平:造模后第25天模型组、痹肿消汤组与甲氨喋呤组均明显高于正常组犤(51.90±6.02),(32.68±8.76),(41.10±6.87),(10.37±1.29)μg/L,P<0.01犦;模型组高于痹肿消汤组及甲氨喋呤组(P<0.01或0.05),甲氨喋呤组高于痹肿消汤组(P<0.05)。随着时间的延长,模型组肿瘤坏死因子α水平逐渐升高,而痹肿消汤组及甲氨喋呤组则逐渐下降,且痹肿消汤组降低较甲氨喋呤组明显(P<0.05)。②滑膜血管内皮生长因子阳性细胞表达:正常组未见,其他3组均可见。在各时间点,模型组均明显高于痹肿消汤组和甲氨喋呤组(P<0.01),随着时间延长,症状加重,其表达逐渐升高;而痹肿消汤组和甲氨喋呤组则逐渐降低,且痹肿消汤组降低较甲氨喋呤组明显(P<0.05)。③肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子的相关性:两者呈正相关(r=0.893,2.478,P<0.01,0.05)。结论:痹肿消汤可降低关节炎大鼠血浆中肿瘤坏死因子α和关节滑膜组织中血管内皮生长因子的表达,从而阻抑滑膜血管翳形成;且痹肿消汤阻断肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子的作用优于甲氨喋呤。

奇士乐对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

目的研究中药复方奇士乐对佐剂性关节炎(AA)大鼠的免疫调节作用。方法以弗氏完全佐剂(FCA)制备AA大鼠模型,奇士乐灌胃(ig)给药治疗AA大鼠,以雷公藤多苷片ig给药作阳性对照。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)诱导的AA大鼠脾淋巴细胞增殖反应;放免法测定白细胞介素(IL)-1、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量。结果奇士乐能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀;上调ConA、LPS诱导的AA大鼠脾淋巴细胞增殖反应,促进IL-2分泌水平;同时奇士乐还可抑制AA大鼠腹腔巨噬细胞过高的IL-1、TNF-α、IL-6和PGE2的分泌。结论奇士乐对AA大鼠紊乱的免疫功能具有调节作用,其机制可能与调节细胞因子水平有关。

通痹灵对胶原诱导型关节炎大鼠关节破坏的影响

【目的】观察通痹灵对胶原诱导型关节炎(CIA)模型大鼠关节破坏的影响。【方法】采用牛Ⅱ型胶原混合弗氏不完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射复制CIA模型,造模成功后随机分为模型组、通痹灵组(剂量为3.0 g.kg-1.d-1)、甲氨蝶呤组(MTX组,剂量为每周7.6 mg.kg-1),并设正常对照组;各组按设计剂量灌胃相应药物或生理盐水35 d后,采用容积法评价后肢肿胀度,采用乳腺钼靶机进行全身X光照片,比较各组大鼠各关节破坏程度的差异。【结果】通痹灵可显著性减轻CIA模型大鼠的足肿胀度和四肢关节肿胀数,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);模型组大鼠X光片显示各关节骨面受到严重侵蚀,关节间隙变窄,通痹灵可显著性抑制CIA大鼠的关节破坏程度(P<0.05或P<0.01),其作用与阳性对照药MTX相仿(P>0.05)。【结论】通痹灵治疗类风湿性关节炎的作用可能与其抑制关节破坏程度,减轻关节炎症有关。

二藤合剂氯仿提取物对类风湿性关节炎T细胞的免疫调节作用

[目的]观察二藤合剂氯仿提取物对活化的类风湿性关节炎(RA)患者T细胞表达CD69以及Jurkat细胞周期的影响, 推测其可能的细胞免疫调控机制。[方法]培养Jurkat细胞,加入二藤合剂各提取物培养72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测增殖率,筛选有效部位;无菌抽取RA患者全血,与不同浓度二藤合剂氯仿提取物或染料木黄酮预孵30 min后,再加植物血凝素(PHA)培养24 h,采用流式细胞术检测T淋巴细胞CD69的表达率;培养Jurkat细胞,加不同浓度的二藤合剂氯仿提取物或氨甲喋呤(MTX)继续培养48 h,流式细胞术检测细胞周期。[结果]二藤合剂各提取物中以氯仿提取物抑制Jurkat细胞增殖作用最强;10mg/L和20mg/L的二藤合剂氯仿提取物可显著抑制PHA刺激下RA患者的T细胞,尤其是CD4 T细胞表达CD69;10mg/L浓度的氯仿提取物主要将细胞增殖周期抑制在G1期,与MTX作用于S期有明显区别。[结论] 二藤合剂氯仿提取物可抑制RA患者T细胞尤其是CD4 T细胞的早期活化,阻止T细胞能量和原料合成,从而阻断其DNA 合成过程,减少细胞向G2期的转化,为其用于RA的治疗提供了实验依据。

蜈蚣龙蛇汤配合西药治疗类风湿关节炎效果观察

目的:观察蜈蚣龙蛇汤联合甲氨蝶呤与青霉胺对类风湿关节炎患者的治疗效果,并与甲氨蝶呤联合青霉胺治疗结果做比较。方法:①选择1996-10/2002-03湘雅医院和湖南中医学院附属衡阳医院内科门诊就诊和住院类风湿关节炎患者76例。按随机抽签法分为2组:治疗组40例(男15例,女25例,年龄27～60岁),对照组36例(男15例,女20例;年龄26～58岁)。均符合美国风湿病协会1987年修订的类风湿性关节炎诊断标准,且对治疗方案和检测指标知情同意。②两组均采用甲氨蝶呤联合青霉胺,甲氨蝶呤每周10mg,一次口服,青霉胺口服250mg/次,2次/d。治疗组除此外,还接受蜈蚣龙蛇汤方药的治疗,该方药组成:蜈蚣1条(去头足,约1g),地龙10g,白花蛇1条(约1g,研末兑服),制川乌3g(先煎),制草乌3g(先煎),血竭3g(研末兑服),制天南星5g(先煎),土鳖虫5g,大伸筋10g,威灵仙10g,乳香10g,没药10g,续断10g,白芷10g,透骨草10g,当归20g,川芎20g,甘草20g(由湘雅医院和湖南中医学院附属衡阳医院中药房提供),文火煎,分2次服,1剂/d。两组均以12周为1疗程,连续服用2个疗程后评定疗效。参照《中药新药临床研究指导原则》制订标准评定疗效。观察两组患者治疗前后晨僵时间,双手握力,20m步行时间,压痛指数,肿胀指数。于治疗前后采用Western法测血沉;采用乳胶凝集法测类风湿因子;采用免疫比浊法测免疫球蛋白IgM,IgG,IgA,C反应蛋白,血清补体C3。两组间计量资料和计数资料差异比较分别采用t检验和χ2检验。结果:类风湿关节炎患者76例均进入结果分析。①总有效率:治疗组明显高于对照组,分别为92%和67%(P<0.01)。②临床症状、体征:两组治疗后晨僵时间、压痛指数、肿胀指数、功能指数、20m步行时间明显低于治疗前和对照组治疗后(P<0.05～0.01),双手握力明显高于治疗前和对照组治疗后(P<0.01,0.05)。③实验室检查指标:治疗组治疗后各项实验室指标与治疗前和对照组治疗后比较,均有明显降低(P<0.01),而对照组只有血沉、类风湿因子、C反应蛋白、免疫球蛋白A明显降低(P<0.05～0.01)。结论:蜈蚣龙蛇汤联合甲氨蝶呤与青霉胺对治疗类风湿关节炎有效,效果优于单纯甲氨蝶呤与青霉胺联合用药。

痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质组学研究

目的:观察痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变,分析痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。方法:实验于2004-05/2005-02在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。70只SD大鼠随机分为3组,正常组10只,其余60只大鼠采用牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎模型,选取造模成功者再随机分为两组,即痹肿消汤组和模型组。痹肿消汤煎液制备:白花蛇舌草15g,肿节风30g,丹参15g,络石藤20g,骨碎补15g,苡米30g等15味中药,双蒸水煎2次,30min/次,两煎混合,G4滤器过滤,于60℃水浴中浓缩成每毫升药液含生药116g。痹肿消汤组灌服痹肿消汤煎液10mL/kg(相当于生药62.1g),2次/d灌服;模型组灌服生理盐水10mL/kg,2次/d灌服。正常组自由进水。应用双向凝胶电泳技术分别分离正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠关节滑膜的总蛋白后,经胶体考染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点,应用MALDI-TOF-MS质谱仪得到相应的肽质量指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:纳入实验的70只大鼠,造模不成功被淘汰7只,最终痹肿消汤组26只、模型组27只、对照组10只,共63只大鼠进入结果分析。①建立了正常组、模型组和痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱,其平均蛋白质点数分别为947±39,994±41,1031±52,其匹配率为92%,91%,94.2%。②发现并鉴定了正常组、模型组和痹肿消汤组大鼠滑膜的差异表达大于2倍的蛋白质点55个,这些差异表达蛋白质的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化应激、信号转导及细胞骨架蛋白,随即用免疫印迹的方法差异蛋白质annexin1、aldolaseA在正常组、模型组、痹肿消汤组中的表达,其结果也显示了类似的表达差异。结论:类风湿关节炎模型关节滑膜病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程。滑膜组织的比较蛋白质组学分析是一种筛选病变相关蛋白的可靠方法之一。annexin1、aldolaseA可能与实验性关节炎的关节滑膜病变有关;痹肿消汤可能通过对实验性关节炎大鼠滑膜蛋白质表达的调控达到治疗目的。

胶原诱导性关节炎大鼠灌服痹肿消汤后滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达

目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠灌服痹肿消汤后滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达变化。方法:实验于2005-02/06在蛋白质组国家重点实验室完成,选用78只健康SD大鼠,按随机数字表法分为3组:①正常对照组(n=10)。②模型组(n=35)。③痹肿消汤组(n=33)。模型组和痹肿消汤组大鼠采用牛Ⅱ型胶原10mg与完全福氏佐剂5mL混合注射诱导大鼠关节炎模型;正常对照组注射等量生理盐水。痹肿消汤组于初次免疫7d后开始灌服痹肿消汤(由白花蛇舌草15g,肿节风30g,丹参15g,苡米30g等15味中药组成),按10mL/kg标准给药,2次/d;模型组与正常对照组每天灌服相同体积的生理盐水。观察大鼠一般情况,并定期对其进行关节炎指数评分(0分:无关节炎;4分:关节严重肿胀且不能负重。关节炎指数=四肢关节评分之和,平均关节炎指数=总关节炎指数/每组大鼠的总数)。各组大鼠分别于造模后25d,35d,45d麻醉断头处死。取踝跖关节作病理检查,采用免疫印迹法检测大鼠在不同时间点滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达,运用ImageTool3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果:对未出现红斑、肿胀等关节炎体征或体征不明显的大鼠予以舍弃,进入结果分析的大鼠共70只,正常对照组、模型组及痹肿消汤组分别为10,30,30只。①各组大鼠的关节炎指数比较:模型组大鼠在造模14d后关节炎症状进行性加重,平均关节炎指数增加;痹肿消汤组平均关节炎指数于造模25d和30d达高峰,但仍较模型组低。②各组大鼠滑膜病理学改变:模型组大鼠滑膜组织中炎性细胞浸润,血管增生,滑膜增厚等特征改变持续加重,而痹肿消汤组显示炎症减轻,新生血管减少,滑膜增厚不明显。③各组大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达:模型组造模后45d膜联蛋白Ⅰ表达明显低于正常对照组(P<0.01),在造模后25d,35d,45d膜联蛋白Ⅰ的表达水平呈递减趋势。痹肿消汤组大鼠膜联蛋白Ⅰ表达水平明显高于模型组与正常对照组(P<0.05～0.01),且在造模后25d,35d,45d呈递增趋势。结论:痹肿消汤具有上调胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ表达的作用,这可能是该药控制类风湿关节炎病程发展的途径之一。

豹皮樟总黄酮对佐剂性关节炎大鼠炎症免疫功能的影响

目的研究豹皮樟有效部位总黄酮(LCTF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症免疫功能的影响,探讨其治疗作用的机制。方法SD大鼠左后足跖皮内注射0·1ml,弗氏完全佐剂复制AA模型;大鼠免疫后12d开始分别灌胃LCTF66·5、133、266mg/kg,连续给药12d。组织块培养法分离培养大鼠滑膜细胞,透射电镜分析滑膜细胞内具分泌功能细胞器的形态学改变;放射免疫测定法检测腹腔巨噬细胞、滑膜细胞分泌IL-1β水平;探讨LCTF作用机制。结果LCTF133、266mg/kg可恢复A、B型滑膜细胞的分泌功能;纠正AA大鼠腹腔巨噬细胞、滑膜细胞过高分泌IL-1β的功能。结论LCTF可恢复AA大鼠滑膜细胞的形态及改善腹腔巨噬细胞、滑膜细胞过高的分泌炎性介质的功能是其治疗AA的途径之一。