性别差异对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎模型的影响

目的构建雌性及雄性牛Ⅱ胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎指数、足肿胀度、血清炎症因子及纤溶酶原激活物抑制剂水平、脾指数、膝关节及踝关节病理、右后足爪骨破坏情况、肺间质病变情况。结果雌性CIA大鼠的关节炎指数在初次免疫后第21天较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),但两组足肿胀度在观察的任一时间点均无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠血清肿瘤坏死因子α、白介素1β和脾指数均较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05,P<0.001),纤溶酶原激活物抑制剂水平无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠膝关节和踝关节病理的炎症细胞浸润及滑膜增生评分较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),雌性CIA大鼠膝关节软骨损伤及右后足爪骨破坏程度均较雄性显著升高(P<0.05);雌性和雄性CIA大鼠均出现了肺间质炎症细胞浸润及轻度纤维化,但雌性比雄性的肺间质病变更重。结论使用SD大鼠构建的雌性及雄性CIA模型均能兼具关节炎及肺间质病变,但雌性CIA大鼠的病变程度更重,在使用CIA模型进行RA相关研究时应关注性别差异带来的影响。

三种方法制备兔膝骨关节炎模型的结果分析

目的:寻找一种稳定、方便、快捷的膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)模型制备方法,用以研究KOA的病理机制及防治手段,并为后期科研提供相应理论依据。方法:将24只新西兰大白兔随机分为手术组、制动组、木瓜蛋白酶组、空白组,每组6只。对比模型组(手术组、制动组、木瓜蛋白酶组)家兔造模后与空白组Pelletier评分、Mankin’s评分以及血清及关节液中炎性因子[白细胞介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)-α]的含量水平。结果(:1)大体观察模型组实验兔均出现不同程度的关节僵硬、肿胀,股四头肌萎缩,解剖膝关节均可见股骨内外髁软骨颜色变灰白,软骨面光泽度降低,软骨面有不同程度粗糙、糜烂、溃疡形成,关节周缘骨刺形成;(2)模型组Pelletier评分、Mankin’s评分、血清及关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量均高于空白组(P<0.01),模型组与空白组的差异具有统计学意义(P<0.05);(3)关节腔内注射木瓜蛋白酶制备兔KOA模型更方便快捷,短期内效果更佳,木瓜蛋白酶组血清及关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α含量高于手术组、制动组(P<0.05),木瓜蛋白酶组与手术组、制动组的差异具有统计学意义(P<0.05);(4)手术、关节制动制备较为复杂并存在较多局限性,如手术感染,重新固定等问题,但可以反映真实状况下KOA的发生发展情况。结论:不同造模方法各有优缺点,现阶段仍未有系统且全面的定论。因此,应根据不同造模方法的优缺点结合后续研究来选择合适的动物疾病模型。

Mtb诱导的SD大鼠佐剂性关节炎模型的建立及评价

目的建立一种实验性SD大鼠佐剂性关节炎模型,为类风湿关节炎的研究提供一种简单、实用、可靠的动物模型。方法采用热杀死结核分枝杆菌H37Ra(Mtb)与矿物油混匀,一次性经尾根部皮下注射,诱导SD大鼠实验性类风湿关节炎的发生。在实验周期内,定期检测实验动物体重、血常规,并进行关节炎临床评分、足趾容积测定,以流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群变化;以ELASA方法测定血清TNF-α,关节组织中IL-1、IL-6和内皮生长因子(VEGF)水平;同时检测SD大鼠后腿踝关节软骨及滑膜的病理变化,以X-光检查验证模型骨侵蚀程度,通过多项综合指标评价该模型的可靠性。结果SD大鼠经Mtb免疫14d后,大鼠体重明显减轻,外周血白细胞、血小板及单核细胞数明显升高,T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值增高。从免疫Mtb10d开始,模型组动物足趾和踝关节出现炎症信号,14～16d达到高峰。免疫28d后,大鼠外周血TNF-α水平升高,关节滑膜组织中IL-1和IL-6及VEGF水平上调。显微镜下病理检测结果显示,模型大鼠关节滑膜增生,淋巴细胞浸润,关节软骨增生。结论由Mtb诱导的SD大鼠关节炎模型与临床RA特征相近,具有模型复制成功率高、操作简单、经济实用等特点,可广泛用于抗类风湿关节炎药物的筛选及实验研究中。

寒湿环境对佐剂关节炎模型大鼠炎症反应的影响

目的:考察寒湿环境对佐剂性关节炎模型大鼠炎症反应的影响及乌头汤的干预回调作用,综合揭示"风寒湿三气杂至合而为痹"的科学内涵。方法:采用佐剂性关节炎模型复合寒湿环境制备寒痹动物模型,从造模第6天开始每隔4 d测定大鼠足容积并计算足肿胀率,第16天开始给予乌头汤干预治疗30 d,第45天观察踝关节病理形态学及检测大鼠血清白介素-6(IL-6)、类风湿因子(RF)、抗-环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP)的含量水平。结果给予大鼠寒湿环境刺激后,寒湿对照组与模型对照组比较,足肿胀率、病理损伤程度以及血清因子IL-6、RF、anti-CCP均无统计学意义,但均呈上升趋势;乌头汤治疗后与寒湿对照组比较,大鼠足肿胀率31 d后显著下降,大鼠踝关节损伤明显改善,血清因子IL-6、RF、anti-CCP水平明显降低。结论:寒湿环境通过加重完全弗氏佐剂性关节炎大鼠关节炎症反应,促进RA疾病的发展,且乌头汤具有较好的回调干预作用。

胶原酶诱导的鼠类退行性膝骨关节炎模型应用进展

动物模型为骨关节炎的研究做出了巨大贡献。随着全球老龄化速度加快，退行性膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）的发病率越来越高。

滑膜炎颗粒对Ⅱ型胶原关节炎模型的治疗作用研究

目的：应用Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）模型探讨滑膜炎颗粒对类风湿关节炎滑膜损伤的治疗作用。方法：牛Ⅱ型胶原乳剂大鼠尾根部皮下注射制备CIA模型,取造模成功的大鼠随机分为对照组（Ⅰ）、不完全弗氏佐剂组（Ⅱ）、模型组（Ⅲ）、雷公藤多苷片组（Ⅳ）、醋酸泼尼松龙组（Ⅴ）、滑膜炎颗粒大剂量组（9.68 g生药/kg,Ⅵ）、中剂量组（4.84 g生药/kg,Ⅶ）、小剂量组（2.42 g生药/kg,Ⅷ）,每组11-12只大鼠。通过动态监测给药后各组大鼠足趾容积变化、关节炎指数评分、踝关节病理观察以及流式细胞仪检测大鼠T细胞亚群的变化,考察滑膜颗粒对CIA模型大鼠的治疗作用。结果：加强免疫6 d开始,各造模大鼠出现关节红肿、变形,滑膜炎颗粒各治疗组对关节炎指数评分和足肿胀度均有不同的抑制作用。其中Ⅵ组给药12、21、24 d关节炎指数评分与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。Ⅶ组给药后15、18、24、27、30、33 d足肿胀度与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。给药12、21、24、30 d关节炎指数评分与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。同时各给药组对CIA模型滑膜、软骨、纤维组织及小血管增生和炎性细胞浸润等病理损伤均有不同程度的改善。滑膜炎颗粒各给药组Th细胞百分比、Th/Tc均较模型组有所下降,但与模型组比较差异无统计学意义。结论：滑膜炎颗粒对类风湿关节炎滑膜损伤具有较好的改善作用。

卡介苗在关节炎模型小鼠诱导中的作用

目的:探讨在牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型(Collagen-induced arthritis,CIA)小鼠的诱导过程中,弗氏完全佐剂(FCA)中的卡介苗(BCG)浓度和CIA小鼠关节炎严重程度的关系。方法:将牛Ⅱ型胶原蛋白溶液与含不同BCG的FCA等体积混合乳化,在小鼠尾根部注射进行免疫。免疫后观察小鼠的相关指标包括体重、发病率、血清TNF-α、关节炎指数及小鼠关节和脾脏的病理变化。结果:与1 mg/ml卡介苗组相比,4 mg/ml卡介苗组诱导的CIA小鼠发病早,关节炎指数、关节和脾脏病理评分升高及小鼠体重下降更明显,血清TGF-α明显升高,差异有统计学意义。结论:在进行CIA小鼠诱导时,BCG浓度和CIA小鼠关节炎严重程度呈正相关,实验中可以根据对动物的要求,选择含不同BCG的佐剂来诱导CIA小鼠。

滑膜炎颗粒对Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型改善作用的机制研究

目的：探讨滑膜炎颗粒对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）模型改善作用机制。方法：牛Ⅱ型胶原乳剂大鼠尾根部皮下注射制备CIA模型,造模成功后按随机数字表法分为对照组（Ⅰ）、模型组（Ⅱ）、不完全弗氏佐剂组（Ⅲ）、雷公藤多苷片组（Ⅳ）、醋酸泼尼松龙组（Ⅴ）、滑膜炎颗粒大剂量组（Ⅵ）、中剂量组（Ⅶ）、小剂量组（Ⅷ）,每组各10~11只大鼠。免疫组化方法观察大鼠左膝关节滑膜组织IL-1、TNF-α、Erk、Jnk、Ras、Raf的表达,图像分析软件计算阳性面积比。结果：各造模组大鼠膝关节滑膜组织IL-1、Erk、Jnk、Ras、Raf表达量均较对照组增高;各给药组Erk表达量均较模型组降低,其中Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组Erk表达量与模型组比较差异有统计学意义。结论：IL-1、Erk、Jnk、Ras表达升高,参与CIA模型大鼠滑膜组织病理损伤过程;滑膜炎颗粒改善关节损伤症状可能与降低Erk的表达相关,而与IL-1、TNF、Jnk、Ras、Raf不相关。

兔类风湿性关节炎模型的诱导机制及组织病理学的研究

目的观察鸡卵蛋白诱导性兔类风湿性关节炎模型实验方法的可行性。方法将8只新西兰兔致敏,致敏成功后双膝关节各注射5 mg鸡卵蛋白进行关节炎模型的诱导,测量关节直径和关节表面皮肤温度的变化,诱导1周和4周时分别各随机处死4只,取出关节滑膜和软骨作组织学观察。结果诱导后膝关节直径和关节皮肤温度明显上升(P<0.01),诱导1周时的模型滑膜内可见大量的淋巴细包浸润,诱导4周后滑膜增生更加显著。结论鸡卵蛋白诱导性兔类风湿性关节炎模型的病理过程与人类相似,诱导简单方便,效果稳定,能长期维持,是很好的类风湿性关节炎实验模型。

痛风颗粒对尿酸钠关节炎模型大鼠踝关节肿胀度、血清LP-PLA_2的影响

目的探讨痛风颗粒治疗急性痛风性关节炎的作用机制。方法复制大鼠尿酸钠关节炎模型,观察痛风颗粒对大鼠右踝关节肿胀度、LP-PLA2值的影响。结果痛风颗粒对大鼠踝关节肿胀有明显的抑制作用,能显著降低大鼠血清LP-PLA2值,与秋水仙碱作用相近。结论痛风颗粒对急性痛风性关节炎具有治疗作用,其作用机制与抑制血清LP-PLA2的产生有关。

不同品系大鼠痛风性关节炎模型制备的评价

目的大鼠痛风性关节炎模型(acute gouty arthritis,AGA)在实际研究中应用较多,但不同品系大鼠对尿酸钠晶体的反应性不同,会对成模效果产生一定的影响。文中对比Wistar大鼠和SD大鼠对尿酸钠结晶导致的AGA的敏感程度。方法将Wistar大鼠(32只)和SD大鼠(32只)按随机数表法分别分为空白组和模型组,每组16只。选踝关节后外侧后方为穿刺点,将100μL PBS溶液配制成的20 mg/mL的尿酸钠结晶溶液分别注入SD大鼠和Wistar大鼠右足踝关节造模,分别在造模后9 h和12 h各组按随机数字法抽取8只大鼠测量踝关节直径。麻醉后下腔静脉取血,检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度的变化。结果 Wistar大鼠造模后9 h和12 h模型组关节直径[(0.850±0.201)、(0.235±0.091)mm]较空白组同时间点[(0.080±0.053)、(0.092±0.068)mm]肿胀的差异有统计学意义(P=0.001,P=0.026),SD大鼠造模后9 h和12 h模型组关节直径[(1.128±0.623)、(0.748±0.545)mm]较空白组同时间点[(0.045±0.012)、(0.047±0.015)mm]明显肿胀的差异有统计学意义(P=0.013,P=0.042),2种品系大鼠造模前后关节直径变化差异有统计学意义(P<0.05),但造模后9 h与造模后12 h肿胀程度比较差异均无统计学意义(P>0.05);SD大鼠较Wistar大鼠关节肿胀程度更为明显,差异有统计学意义(P<0.05);且主要炎性因子TNF-α、IL-1β浓度也明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SD大鼠较Wistar大鼠对尿酸钠晶体导致关节炎症反应更为明显,更适合用于尿酸钠晶体导致的AGA的建立。

日龄对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型成功率的影响

为了研究大鼠日龄对Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型(CIA模型)成功率的影响,试验利用鸡Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂制成的乳剂,皮内免疫不同日龄Wistar大鼠,建立类风湿关节炎的大鼠模型,2周后开始测量四肢的足趾部厚度,每周测量1次,根据肿胀程度进行评分。结果表明:31日龄大鼠CIA造模成功率为50%,37日龄大鼠CIA造模成功率为58%,42日龄大鼠CIA造模成功率为92%,49日龄大鼠CIA造模成功率为83%。说明日龄对CIA模型的构建起到关键作用。

中药复方配合针灸对佐剂性关节炎模型大鼠血清IL-1、IL-2及TNF-α水平的影响

目的观察针灸合并中药复方对佐剂性关节炎模型大鼠血清COR、IL-1β及TNF-α水平的影响,探讨中药及针药结合治疗类风湿性关节炎的作用及机制。方法雄性SD大鼠50只随机分为5组,除正常组10只外,其余各组应用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎,给药及针药结合治疗28天后,测定大鼠足肿胀体积并检测IL-1IL-2及TNF-α水平。结果与模型组比较,各组均能降低大鼠足肿胀体积(P<0.01),大鼠血清IL-1、TNF-α水平明显降低,IL-2水平明显升高(P<0.01)。结论实验表明各治疗组对佐剂性关节炎模型大鼠足肿胀有一定的改善作用,但各治疗组之间无统计学差异(P>0.05)。其作用机制可能与免疫及炎性细胞因子调节有关。

抗原诱导兔关节炎模型的建立及早期磁共振表现

目的建立抗原诱导兔关节炎模型并分析其早期磁共振表现。方法7只新西兰兔采用卵清白蛋白致敏后于右膝关节注射相同抗原进行关节炎动物模型的诱导，观察诱导后第5、15天膝关节磁共振表现并作病理对照。结果6只兔右膝关节炎诱导成功，平扫见关节滑模增生、关节积液增多，T1WI均显示为等或稍低信号，T2WI显示为不均匀高信号，两者不易区分，经Gd—DTPA增强扫描后关节滑膜显示为明显强化而关节积液未见明显强化。与第5天图像比较，关节内注射后15天滑膜增生更明显。组织学观察可见右膝关节滑膜增厚、衬里层细胞的增多，衬里及衬里下层炎性细胞浸润，炎性细胞大多为淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞细胞。结论从发病机理、病理表现及磁共振影像等各方面看，抗原诱导兔关节炎模型都是一种较理想的类风湿关节炎动物模型。

胡椒根提取物对大鼠骨关节炎模型的治疗作用

目的对比研究胡椒根两种提取物对大鼠骨关节炎模型的治疗作用。方法建立关节内注射木瓜蛋白酶诱发骨关节炎模型,分别通过设立高、低剂量组、模型组及阳性对照组等多个组别,研究造模4周中两种提取物各个剂量组对大鼠体质量、膝关节直径、关节腔表面状态、及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的影响。结果所有造模动物在实验2周时体质量增长较空白对照组有较大程度减轻(P<0.05)。除醇提物低剂量组外,膝关节直径变化量与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在血清TNF-α、IL-1B、Ⅱ-6炎症因子测定中,挥发油高剂量组、醇提物高剂量组与空白对照组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05),但醇提物高剂量组数值多显示出边缘显著现象(P接近0.05)。结论胡椒根两种提取物在本次试验中所用剂量对骨关节炎模型均有一定程度改善作用,但挥发油提取物高剂量组效果较好。

中医复方对胶原诱导性关节炎模型作用机理的研究现状

类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种原因不明的,慢性全身性炎症性疾病,30～40岁妇女为高危人群。其特点为滑膜增生和外周关节对称性侵蚀性关节炎,但也可导致全身系统性损害。学者们借助胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis，CIA）模型研究中医复方治疗RA的机理，取得了较满意的结果。现就中医复方对CIA模型作用机理的研究现状综述如下。

火针和毫针干预对佐剂性关节炎模型大鼠的比较研究

目的探究火针和毫针干预对于佐剂性关节炎模型大鼠的影响。方法实验以佐剂性关节炎(AA)模型大鼠作为研究对象,将雄性Wistar大鼠适应性饲养1周后,随机分为空白对照组、火针组、毫针组、模型对照组,每组10只。每隔3天测量各组大鼠踝部肿胀情况、体质量变化并进行疼痛测量评定。在造模后第28天每组随机处死2只大鼠,观察左侧踝关节组织切片和足三里部位组织切片。结果 40只大鼠均进入结果分析。火针组、毫针组大鼠经针刺后左踝直径与模型对照组比较有显著性降低(P<0.05),关节疼痛评分与模型对照组比较也有显著性降低(P<0.05)。踝关节切片也可见局部组织炎性反应得到改善,观察足三里部位组织切片可见火针针刺可对肌肉组织造成损伤,但愈合较好。结论火针和毫针干预对于佐剂性关节炎大鼠的症状改善有一定作用,两种针刺方式对肌肉组织损伤较小且愈合良好。

马骨关节炎模型关节液中相关生物指标变化的研究

为了研究马骨关节炎发病机理,试验将13匹蒙古马分成两组,试验组8匹(用两性霉素B诱导并建立马骨关节炎模型),对照组5匹,每周采集1次关节液,直至第9周,用ELISA方法检测关节液中前列腺素E2(PGE_2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的含量。结果表明:试验组关节液中MMP-2、MMP-9、TNF-α和PGE_2的含量有增加的趋势,其中MMP-9、PGE_2在发病初期就显著上升。说明在骨关节炎过程中,关节液中MMP-2、MMP-9、PGE_2、TNF-α都呈上升趋势,这些促炎因子的增加会促进蛋白酶的分泌和软骨的降解。

补肾祛寒治尪汤联合甲氨蝶呤对大鼠胶原诱导关节炎模型的抗炎作用研究

目的评估补肾祛寒治尪汤(简称"治尪汤")联合甲氨蝶呤(MTX)对大鼠胶原诱导关节炎(CIA)模型的作用及高频超声在大鼠关节炎评估中的应用。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、MTX组、治尪汤低剂量联合组、治尪汤高剂量联合组;除正常组外,其余大鼠分别于第1、7天尾部注射浓度为2 mg/mL的Ⅱ胶原乳剂50μL建立CIA模型;第8天开始给药21 d,检测足趾厚度,进行关节炎指数评分,并采用高频超声评估大鼠关节滑膜炎。结果造模后,各组大鼠足趾厚度较正常组明显增厚(P<0.01),第19天治尪汤高剂量联合组大鼠足趾厚度小于模型组(P<0.05);AI评分方面,第13天治尪汤高剂量联合组大鼠AI评分小于模型组(P<0.01);各组与正常组比较滑膜显著增厚,治尪汤低、高剂量联合组与模型组比较滑膜厚度显著降低,治尪汤高剂量联合组较MTX组滑膜厚度显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论高频超声适用于大鼠CIA模型滑膜炎的评估,敏感性优于足趾厚度检测和AI评分,高剂量治尪汤与MTX联用对改善CIA大鼠关节炎有协同增效作用。