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表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺研究
1
作者
陈晓
李伟国
+4 位作者
宋欢欢
苏晓蕊
王同燕
谭菲菲
田克恭
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第2期49-57,共9页
为建立一套表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺,提高反应器上猪瘟病毒E2蛋白的表达量,以商业化培养基为基础,通过对关键营养组分添加量的DOE试验设计优化,获得一种组合补料配方,并在3 L反应器上对补料方式进行优化,以最大限度...
为建立一套表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺,提高反应器上猪瘟病毒E2蛋白的表达量,以商业化培养基为基础,通过对关键营养组分添加量的DOE试验设计优化,获得一种组合补料配方,并在3 L反应器上对补料方式进行优化,以最大限度提高细胞密度。进一步在反应器上摸索了通气策略,以精确调控猪瘟E2重组杆状病毒培养过程的营养代谢平衡,解决副产物乳酸和氨过度积累导致细胞活力下降的问题。首次使用半连续补料工艺与渗透压动态平衡相结合的补料策略以及定向调节通气的工艺模式,使猪瘟病毒E2蛋白的表达量由130 mg/L增加至520 mg/L,提高了3倍。将3 L反应器工艺在100 L反应器上进行了连续3个批次的验证,结果猪瘟病毒E2蛋白的表达量均大于500 mg/L,收获猪瘟E2蛋白制备的疫苗抗体均在2周后转阳,且抗体水平持续上升,接种后8周抗体阻断率仍维持在80%左右。综上,3 L反应器工艺能够稳定放大至100 L反应器,建立了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒100 L反应器工艺,且100 L反应器上重组蛋白的表达量稳定、免疫原性良好。
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关键词
猪瘟病毒
E2蛋白
重组杆状病毒
关键营养单元
半连续补料
定向调节
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职称材料
题名
表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺研究
1
作者
陈晓
李伟国
宋欢欢
苏晓蕊
王同燕
谭菲菲
田克恭
机构
国家兽用药品工程技术研究中心
普莱柯生物工程股份有限公司
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第2期49-57,共9页
基金
郑洛新国家自主创新示范区创新引领型产业集群专项(201200211200)
云南省田克恭专家工作站(2019IC062)。
文摘
为建立一套表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺,提高反应器上猪瘟病毒E2蛋白的表达量,以商业化培养基为基础,通过对关键营养组分添加量的DOE试验设计优化,获得一种组合补料配方,并在3 L反应器上对补料方式进行优化,以最大限度提高细胞密度。进一步在反应器上摸索了通气策略,以精确调控猪瘟E2重组杆状病毒培养过程的营养代谢平衡,解决副产物乳酸和氨过度积累导致细胞活力下降的问题。首次使用半连续补料工艺与渗透压动态平衡相结合的补料策略以及定向调节通气的工艺模式,使猪瘟病毒E2蛋白的表达量由130 mg/L增加至520 mg/L,提高了3倍。将3 L反应器工艺在100 L反应器上进行了连续3个批次的验证,结果猪瘟病毒E2蛋白的表达量均大于500 mg/L,收获猪瘟E2蛋白制备的疫苗抗体均在2周后转阳,且抗体水平持续上升,接种后8周抗体阻断率仍维持在80%左右。综上,3 L反应器工艺能够稳定放大至100 L反应器,建立了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒100 L反应器工艺,且100 L反应器上重组蛋白的表达量稳定、免疫原性良好。
关键词
猪瘟病毒
E2蛋白
重组杆状病毒
关键营养单元
半连续补料
定向调节
Keywords
Classical swine fever virus
E2 protein
recombinant baculovirus
key nutrient units
semicontinuous feeding
ventilation mode
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺研究
陈晓
李伟国
宋欢欢
苏晓蕊
王同燕
谭菲菲
田克恭
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024
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