ERK1/2信号通路介导PDGF-CC诱导的鼠心肌纤维化及其机制

目的研究ERK1/2通路在血小板源性生长因子(PDGF)-CC诱导的鼠心肌纤维化中的作用及其可能的机制。方法取SD大鼠乳鼠心脏组织,差速贴壁法分离并纯化心肌成纤维细胞。按不同药物处理随机分成对照组(CON组)、PDGF-CC(P组)、PDGF-CC+ERK1/2抑制剂U0126(PU组)。MTT法检测心肌成纤维细胞的增殖,qRT-PCR法检测mRNA含量,Western blot法分析蛋白表达量。结果MTT法显示P组细胞数较CON组显著增加(P<0.01),而PU组细胞数较P组明显减少(P<0.01)。qRT-PCR法显示P组中PDGF-α受体(PDGFR-α)、ERK1、ERK2、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅠ、ColⅢ)的mRNA表达水平均明显高于CON组(P<0.001),PDGFR-β的mRNA表达量在P组与CON组间差异无统计学意义。与P组相比,PU组中PDGFR-α、ERK1、ERK2、ColⅠ和ColⅢmRNA表达均明显下降(P<0.01)。Western blot法显示P组中磷酸化PDGFR-α(pPDGFR-α)、ERK1/2、p-ERK1/2、ColⅠ和ColⅢ的表达量均明显高于CON组(P<0.001),PU组中p-PDGFR-α、ERK1/2、p-ERK1/2、ColⅠ和ColⅢ蛋白表达量均显著低于P组(P<0.001)。结论 PDGF-CC可能通过结合PDGFR-α激活ERK1/2信号通路,诱导鼠心肌成纤维细胞过量增殖伴胶原蛋白的合成,参与心肌纤维化的发生。