脑梗塞患者血浆抑制性氨基酸变化及兴奋性氨基酸的关系

目的目前对兴奋性氨基酸（EAA）和抑制性氨基酸（IAA）的临床研究较少，从临床方面探讨EAA，IAA在脑梗塞发展过程中的作用可为今后临床深人研究提供一定的参考资料。方法应用高效液相色谱法对44例动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞病人急性期和病后2周血浆EAA和IAA的含量进行测定，进行病人自身前后对照并与30例正常人对比。结果脑梗塞病人急性或血浆谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）、牛磷酸（Tau）含量明显高于正常对照组（P＜0.01）；病后2周其血浆含量有所下降，其中Glu含量与急性期相比有显著性差异（P＜0．01），但三者均未恢复正常，与正常对照组相比仍有显著性差异（P＜0．01）；血浆丙氨酸（Ala）、甘氨酸（Gly）在脑梗塞急性期及病后2周与正常对照组相比均无显著性差异（P＞0．05）。结论Glu、Asp作为损伤因素参与了脑梗塞的发生发展过程，研究EAA在脑梗塞中的作用时应同时观察IAA的相应变化．兴奋性毒性指数的概念值得进一步研究。测定血浆Glu的含量可考虑作为估计脑梗塞病程的一项生化指标。

高效液相色谱法测定铊中毒犬不同脑区兴奋性及抑制性氨基酸含量的变化

目的建立以邻苯二甲醛为衍生化试剂的柱前衍生化高效液相色谱法（HPLC），探究普鲁士蓝对铊（T1）中毒犬不同脑区兴奋性氨基酸（EAA）和抑制性氨基酸（IAA）神经递质含量的影响。方法18只比格犬随机分为对照组（NS组）、染毒对照组（T1组）和染毒普鲁士蓝治疗组（PB组），T1组及PB组予以硝酸亚铊（TINO3）半数致死剂量（LD50=45mg／kg）灌胃染毒，PB组予以普鲁士蓝治疗，10d后处死比格犬分离脑组织，采用HPLC测定不同脑区EAA及IAA递质的含量。结果T1中毒犬部分脑区EAA含量升高，普鲁士蓝治疗可降低这一变化，各脑区IAA变化不明显。结论本实验建立的方法能同时测定犬脑组织中天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Gh）、甘氨酸（Gly）和y-氨基丁酸（GABA）的含量，方法稳定、精确；T1中毒后增强了EAA的释放，导致兴奋性毒性。

脊神经节损伤所介导的脊髓背角兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸变化的实验研究

目的研究脊神经节 (DRG)炎性损伤时 ,脊髓背角兴奋性氨基酸 (EAAs)、抑制性氨基酸 (I AAs)含量和脊髓背角谷氨酸 (Glu)、天门冬氨酸 (Asp)免疫组织化学的变化 ,以及与实验动物神经行为异常变化之间的关系。方法健康家兔 5 4只 ,随机分为手术对照组 ( n =2 4) ;炎症损伤组 ( n =2 4)和正常对照组 (n =6)。采用组织氨基酸的含量分析仪测定脊髓背角Glu ,Asp ,GABA ,Tau ,Thr和Ser含量变化。采用免疫组化法观察脊髓背角Glu和Asp分布特点及变化。结果 1.术后 2～ 4周 ,伤侧的Glu ,Asp ,GABA ,Tau ,Ser含量较术前 ,非伤侧显著增高 (P <0 .0 5 )。 2 .术后 2～ 4周 ,其伤侧N 甲基 D 天 (门 )冬氨酸受体 (NMDAR1)免疫阳性纤维在脊髓背角浅层 (Ⅰ ,Ⅱ )和固有层 (Ⅲ ,Ⅳ )的分布密度和染色强度 ,较术前和非伤侧显著降低 (P <0 .0 5 )。结论DRG炎症损伤所介导脊髓背角EAAs释放增加 ,在痛觉过敏的形成和维持中具有重要作用。而IAAs的增加则与机体抗伤害性保护反应相关。DRG炎症损伤初期 ,脊髓背角EAAs/IAAs动态平衡的破坏是伤害性神经细胞兴奋性损伤和伤侧肢体痛觉过敏的主要原因。

高效液相色谱法测定羊水中兴奋性氨基酸、抑制性氨基酸的含量

建立了反相高效液相色谱法测定羊水中兴奋性氨基酸天门冬氨酸、谷氨酸,抑制性氨基酸甘氨酸含量的方法,色谱柱为LUNAC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈水(V/V),按低压梯度洗脱,梯度系统0～4min,乙腈40%;4～20min,乙腈40%～52%;20～30min,乙腈52%～60%;30～40min,乙腈60%～40%。流速0.8mL/min,柱温40℃,紫外检测波长260nm;进样量10μL。结果显示,天门冬氨酸、谷氨酸和甘氨酸三者的线性范围均为2.5～85mg/L;标准加入的回收率为99.6%～102.6%。本方法灵敏度高、测定结果可靠。用本方法对201例不同孕期的羊水作兴奋性和抑制性氨基酸检测,发现羊水中3种氨基酸随妊娠进展而增加的趋势,胎儿畸形或宫内缺氧时羊水中这3种氨基酸水平明显升高。

软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠兴奋性和抑制性氨基酸的影响

目的观察软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠的影响。方法用结扎大鼠两侧颈总动脉和迷走神经的方法复制脑缺血再灌注模型,观察大脑皮层及海马中兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的变化。结果软脉胶囊0.81、2.43g/kg能使大脑皮层及海马中兴奋性氨基酸含量降低,抑制性氨基酸含量升高。结论软脉胶囊对脑缺血再灌注大鼠有保护作用,其作用可能通过降低兴奋性氨基酸的兴奋毒性实现的。

兴奋性和抑制性氨基酸以及机体应激激素表达与前庭性偏头痛的关系探究

目的探究兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素表达与前庭性偏头痛的关系。方法选取2016年7月至2018年3月我院诊治的30例前庭性偏头痛患者为试验组,同时期的30例健康体检者为对照组。比较两组的血清兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素表达情况,并比较试验组中不同疼痛程度患者的检测结果,采用Logistic分析处理兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素与前庭性偏头痛的关系。结果试验组的血清兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素表达水平均显著高于对照组,试验组中重度疼痛患者的血清兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素表达水平均显著高于中度疼痛患者,差异均有统计学意义(P<0.05),且Logistic分析显示,血清兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素均与前庭性偏头痛有密切的关系。结论前庭性偏头痛患者的兴奋性、抑制性氨基酸及机体应激激素均呈现异常表达,且不同疼痛程度患者的表达差异较大,上述指标与前庭性偏头痛之间有密切关系。

兴奋性氨基酸抑制胎鼠神经干细胞的增殖

目的:研究兴奋性氨基酸对体外培养胎鼠神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法:体外分离、培养与鉴定SD胚胎大鼠脑室下带(SVZ)神经干细胞,利用MTT比色法测定兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)和谷氨酸(Glu)对细胞增殖的作用。结果:成功分离出具有胚胎源性的神经干细胞,NMDA和Glu均能导致神经干细胞的增殖活性下降。结论:培养的SVZ区域细胞具有自我更新和多分化潜能,是中枢神经系统干细胞,兴奋性氨基酸能有效地抑制神经干细胞的增殖。

氨基酸分析仪测定脑组织中兴奋及抑制性氨基酸的实验研究

本文在传统分析方法的基础上,采用pH2.20的柠檬酸锂稀释液作为脑组织中兴奋性及抑制性氨基酸样品的预处理,经重复性、回收率以及平均值变异系数等项指标试验,结果改良后的分析方法有较好的重复性、回收率均在96%以上,此方法优于传统的分析方法。

兴奋性氨基酸转运体家族及其在眼科疾病中的研究进展

谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中的主要兴奋性神经递质,谷氨酸酶系统的持续激活会导致神经元的兴奋性毒性,进而引起神经元损伤和细胞死亡。兴奋性氨基酸转运体家族成员是一种多次跨膜蛋白,位于突触前膜、突触囊泡和神经胶质细胞膜上,也是一种高亲和力的钠钾依赖性载体,能够不断清除细胞外残留的谷氨酸,维持正常的突触内外谷氨酸水平和细胞内氧化还原稳态,对于保护细胞免受兴奋性毒性以及氧化应激损伤至关重要,兴奋性氨基酸转运体家族成员表水平达的失调与多种中枢神经系统疾病神经退行性变的发生和发展密切相关。在视网膜组织中,兴奋性氨基酸转运体家族成员广泛表达。目前大量研究表明,兴奋性氨基酸转运体家族成员广泛参与了青光眼、视网膜缺血再灌注损伤、年龄相关性黄斑变性等眼部疾病的发病,但具体机制有待进一步阐明。为此,文章综述了兴奋性氨基酸转运体家族成员的生理功能及其在相关眼科疾病发生和发展中作用的研究进展,为进一步阐明相关眼病发病的分子机制及新的防治靶点的发现提供新的视角。

兴奋性氨基酸与缺血性脑卒中的研究进展

卒中是全球第二大死亡原因,在我国也是导致成人残疾、死亡的首要疾病,其中最常见的卒中类型是急性缺血性脑卒中。缺血性脑卒中(Ischemic stroke, IS)是由血管内血栓形成或栓塞引起脑血流中断,使脑血流灌注下降,主要是以突然起病、局灶性神经功能缺损为特点的急性脑血管疾病。越来越多的研究表明,代谢紊乱与IS的发生、发展密切相关。有研究结果表明,兴奋性氨基酸代谢途径异常与IS的发生、发展密切相关。本综述探讨了兴奋性氨基酸在IS中的进展,强调了其在缺血性卒中的病理生理机制及目前作为潜在治疗靶点的可能性,并为进一步研究提供参考,对兴奋性氨基酸与缺血性脑卒中进行综述。

兴奋性氨基酸在脊髓继发性损伤中作用机制的研究

本实验以Ａｌｌｅｎ法造成脊髓损伤（ＳＣＩ）模型，伤后不同时间分别：（１）取伤段脊髓，采用高效液相色谱法检测脊髓组织谷氨酸（Ｇｌｕ）、天门冬氨酸（Ａｓｐ）的含量变化；（２）给予不同剂量Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗剂４－（３－磷酸基丙基）－２－哌嗪磷酸（ＣＰＰ），４８ｈ后取伤段脊髓以原子吸收光谱法测定其离子改变及水含量。结果发现ＳＣＩ后１０～３０ｍｉｎＧｌｕ、Ａｓｐ较对照组明显升高，其幅度与ＳＣＩ程度呈正相关；损伤组Ｎａ＋、Ｃａ（２＋）和水含量增多，Ｋ＋、Ｍｇ（２＋）减少，ＣＰＰ处理组各种离子和水的改变则较轻，其效果与给药剂量和时间呈正相关。ＣＰＰ的拮抗作用提示ＳＣＩ时的离子和水含量改变与ＮＭＤＡ的过度激活有关。表明ＳＣＩ后急性期兴奋性氨基酸的过度升高很可能参与了脊髓创伤后的继发性损伤过程。

高压氧对急性损伤期全脑缺血再灌注大鼠脑内兴奋性氨基酸水平的影响

目的探讨高压氧(HBO)对缺血再灌注脑内兴奋性氨基酸水平的影响。方法将SD大鼠分为缺血再灌注组(I/R组)、高压氧处理组(HBO组)及假手术对照组(Sham-O组),以四动脉阻断法建立全脑缺血再灌注大鼠模型。动物缺血20min后分别再灌注6h、24h、48h和96h,各HBO组在再灌注后分别行不同次数的高压氧处理。取动物的全脑测定谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)含量。结果24h和48h HBO组Glu水平明显低于对应时间点的I/R组(P<0.01),且24h HBO组Asp含量也低于I/R组(P<0.05),而各时间点I/R组的Glu水平均高于Sham-O组(P<0.01)。结论在一定时间内进行高压氧处理可抑制由全脑缺血再灌注所诱导的兴奋性氨基酸的过度释放,这可能是高压氧治疗缺血再灌注脑损伤的机制之一。

黄芪多糖对缺血缺氧脑损伤大鼠脑组织Ca^(2+)和兴奋性氨基酸的影响

目的:探讨黄芪多糖对缺血缺氧脑损伤大鼠脑组织中Ca^(2+)和兴奋性氨基酸水平的影响。方法:60只大鼠随机分成3组:假手术组、模型组、黄芪多糖组,每组20只。采用改良Longa线栓法制备大鼠中动脉栓塞(MCAO)模型。黄芪多糖组于脑缺血前30 min及术后8 h按1g·kg^(-1)分别腹腔注射给药1次,模型组和假手术组于同时间腹腔注射等容量生理氯化钠溶液。3组均于造模24 h后断头取血2 mL,分离血清,并取全脑,测脑组织的Ca^(2+)含量、脑组织和血清中谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)的含量。结果:模型组脑组织Ca^(2+)、脑组织和血清Glu和Asp含量均明显高于假手术组(P＜0．01),黄芪多糖组这些指标的变化则显著低于模型组(P＜0．01或P＜0．05)。结论:黄芪多糖对缺血缺氧脑损伤大鼠具有脑保护作用,其机制可能与降低脑内Ca^(2+)和兴奋性氨基酸的含量有关。

老年全麻患者围术期血清兴奋性氨基酸浓度的变化及临床意义

目的观察老年全麻患者围术期血清兴奋性氨基酸(EAA)浓度的动态变化。方法择期行非心脏手术气管内全麻患者41例,根据年龄不同分为老年组31例,年龄≥65岁;青年组10例,年龄25～45岁。所有患者术后均使用静脉镇痛。采用简易智力状态检查法(MMSE)分别评估患者麻醉前及术后24、48、72h内的认知功能。于麻醉前(T1)、术毕(T2)、术后24h(T3)、48h(T4)、72h(T5)经颈内静脉采血2ml,采用反相高效液相色谱荧光法(RP-HPLC)检测血清氨基酸浓度。结果 MMSE评分老年组术后24、48h明显低于麻醉前和青年组(P<0.05)。与T1时比较,T3、T4时老年组血清谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp),甘氨酸(Gly)浓度升高(P<0.05或P<0.01),T5时恢复。T1时老年组血清Glu、Asp、Gly浓度低于青年组,但差异无统计学意义;T3时老年组Glu、Asp、Gly明显高于青年组(P<0.05)。结论老年患者术后早期存在EAA水平升高,Glu可能参与术后认知功能障碍(POCD)的病理生理过程,老年患者全麻术后早期血清EAA水平较高可能是老年POCD发病率高的原因之一。

电针对实验性脊髓损伤后兴奋性氨基酸含量的影响

以 72只新西兰白兔为实验动物 ,采用Allen法制成动物脊髓损伤模型。观察损伤脊髓中兴奋性氨基酸谷氨酸、天门冬氨酸含量的变化及电针治疗对这些变化的影响。结果显示 ,脊髓损伤后组织中谷氨酸 (Glu)、天门冬氨酸含量迅速升高 ,电针治疗对脊髓损伤早期的Glu含量升高有抑制作用 ,而后期 ,却有轻度促进Glu含量升高的作用 ,这可能是电针发挥疗效的部分作用机理。

强啡肽对脊髓损伤后兴奋性氨基酸含量变化的影响与意义

为阐明脊髓损伤后病理因于强啡肽（Dyn）与兴奋性氨基酸（EAA）的关系，通过蛛网膜下腹内插管，在伤后20min给予不同剂量、不同种类Dyn，应用高效液相分析技术测定大鼠脊髓损伤后伤段脊髓组织中EAA含量的动态变化。结果显示，DunA使脊髓组织EAA含量显著增加，其增加的量和持续时间与DynA剂量有关，且有剂量依赖性，但不受阿片受体拮抗剂影响。相同剂量的非阿片受体激动剂DynA2－17和阿片受体激动剂DynA1-17对脊髓EAA的改变相似，DnyA1-8也产生显著的EAA改变，但程度较小。本实验结果对Dyn的病理作用包括非阿片受体途径的学说提供了进一步的支持，在非阿片途径中EAA的作用可能是最重要的。

急性脊髓损伤后脑脊液中兴奋性氨基酸含量变化的临床观察

目的：探讨脑脊液中兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量与急性脊髓损伤的关系。方法：采用氨基酸自动分析仪检测２６例急性脊髓损伤患者脑脊液（ＣＳＦ）中天门冬氨基酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）等ＥＡＡ含量的动态变化。结果：脊髓损伤后２４ｈ内ＣＳＦ中Ａｓｐ、Ｇｌｕ显著升高，其升高幅度与脊髓损伤的程度成正相关，即脊髓损伤越重，Ａｓｐ、Ｇｌｕ升高越显著，且预后就越差。结论：伤后ＣＳＦ中ＥＡＡ含量可作为衡量脊髓损伤程度和预后的指标，揭示ＥＡＡ参与脊髓损伤后的病理过程。

兴奋性氨基酸受体的激活介导冷水应激诱导的tau蛋白磷酸化(英文)

为探讨兴奋性神经传递系统是否参与冷水应激引起的tau蛋白磷酸化,将小鼠于4℃冷水应激5min.采用免疫印迹和免疫组织化学方法分析应激后脑内c-fos和磷酸化tau蛋白的表达情况;运用HPLC检测冷水应激后小鼠脑内兴奋性或抑制性神经递质的变化;同时分析兴奋性氨基酸受体和L-型钙通道拮抗剂预处理后冷水应激小鼠脑内磷酸化tau蛋白的水平.冷水应激后1h,海马内磷酸化tau蛋白的水平显著升高,同时伴c-fos的染色增加.HPLC检测显示,兴奋性和抑制性神经递质呈现急剧上升而后又下降的趋势.冷水应激后15min,天冬氨酸和甘氨酸水平显著升高,1h后天冬氨酸、谷氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸显著下降.NMDA受体拮抗剂MK-801(5mg/kg)和AMPA受体拮抗剂DNQX(0.5,5mg/kg)可显著抑制冷水应激引起的磷酸化tau蛋白水平的升高,代谢性谷氨酸受体拮抗剂MAP-4不影响tau蛋白的磷酸化,另外,L-型钙通道阻断剂尼莫地平可抑制冷水应激引起的磷酸化tau蛋白水平的升高.这些结果表明,冷水应激可影响兴奋性神经传递系统,通过离子型兴奋性氨基酸受体和异常神经激活来调节tau蛋白的磷酸化.兴奋性神经传递系统的激活在冷水应激诱导的海马tau蛋白的磷酸化中发挥作用.