调心方对氧化损伤型类AD大鼠脑组织兴奋性氨基酸毒性的影响

目的 探讨调心方对氧化损伤型类 AD大鼠兴奋性氨基酸递质——谷氨酸 (Glu)含量及其受体 (NMDAR)之 NR1 a、NR2 a m RNA水平的影响。方法 采用二羟延胡索酸 (DHF)加 Fe Cl3- ADP左侧脑室注射法 ,造成氧化损伤型类 AD大鼠模型 ;HPLC荧光法测定鼠脑氨基酸类神经递质含量 ;RT- PCR法检测鼠脑 NR1 a、NR2 a m RNA水平变化 ,以及调心方对上述各项指标的作用。结果 与对照组比较 ,AD模型鼠脑组织中的Glu含量及 NR1 a、NR2 a m RNA水平显著增高 ,调心方对此有明显的下调作用。结论 调心方能够通过下调 AD鼠脑中 Glu含量及其受体之 NR1 a及 NR2 a m RNA水平 ,解除兴奋性氨基酸毒性 ,以达到防治 AD的目的。

麝香酮减轻急性脑缺血损伤兴奋性氨基酸毒性的研究

目的:探讨麝香酮减轻兴奋毒性、抗急性脑缺血损伤的作用。方法:建立脑缺损伤模型(MCAO),观察了麝香酮对缺血24小时大鼠神经功能缺损评分、缺血皮层超微结构、NMDA受体Ⅰ型亚单位(NR1)表达的影响。结果:麝香酮可改善缺血大鼠神经功能评分,减轻超微结构损伤,可下调NR1表达。结论:麝香酮抗脑缺血损伤的作用与减少NR1蛋白表达,减轻兴奋性氨基酸毒性有关。

兴奋性氨基酸毒性与缺血性脑损伤

氨基酸作为重要的神经递质 ,对正常大脑的生理活动有调节作用。脑缺血时 ,神经元释放的谷氨酸是引起神经元死亡的重要原因。研究表明 ,除谷氨酸具有损伤效应外 ,甘氨酸 (Gly)也有协同作用 ,其释放增加能扩大脑缺血损害。γ 氨基丁酸 (GABA)能抑制兴奋性氨基酸释放或对抗氨基酸毒性。因为对神经元的作用各有侧重 ,所以综合分析它们的浓度变化和相互关系对缺血性脑损伤神经元死亡的本质将会有更进一步的认识 ,并为脑保护治疗的开辟新思路。

涤痰汤对血管性痴呆大鼠兴奋性氨基酸毒性作用相关miRNAs表达的影响研究

目的:探究涤痰汤对血管性痴呆大鼠兴奋性氨基酸毒性作用相关miRNAs表达的影响。方法:72只SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、涤痰汤低、中、高剂量组及易倍申组(阳性对照组),每组12只。除对照组外,其余大鼠采用高脂饲料结合双侧颈动脉结扎法构建血管性痴呆大鼠模型,涤痰汤低、中、高剂量组分别灌胃5、10、20g/kg涤痰汤,易倍申组灌胃2mg/kg易倍申。采用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,HE染色和TUNEL染色观察海马组织病理学形态变化及细胞凋亡,化学比色法测定大鼠海马组织谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)含量,定量RT-PCR法检测海马组织miR-107、miR-132及miR-223表达水平。结果:与模型组比较,涤痰汤中、高剂量组和易倍申组大鼠逃避潜伏期、海马组织CA1区细胞凋亡率、Glu、Asp含量、miR-107及miR-132表达水平显著降低,穿越平台次数和miR-223表达水平显著升高(P<0.05),海马组织CA1区病理学变化明显改善,且涤痰汤高剂量组与易倍申组上述指标的比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:涤痰汤可提高血管性痴呆大鼠学习记忆能力,减轻海马组织病理损伤并减少神经细胞凋亡,可能通过调节miR-107、miR-132及miR-223水平降低兴奋性氨基酸毒性。

神经系统疾病中兴奋性氨基酸作用的研究进展

兴奋性氨基酸包括谷氨酸和天冬氨酸等。其中谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质，其可对神经元的结构和功能产生长期影响，且谷氨酸介导的兴奋性信号传导可以影响哺乳动物的脑功能，包括认知，记忆和学习功能。天冬氨酸与各种神经元活动密切相关，包括视觉生理学，神经形成，学习和记忆过程。在动物大脑中，天冬氨酸和谷氨酸是钙依赖性的兴奋性神经递质，且通过与谷氨酸受体结合发挥作用。

大剂量地塞米松对犬心肺复苏后脑损伤程度及血浆中兴奋性氨基酸的影响

观察大剂量地塞米松对心肺复苏后脑损伤的程度及对血浆中兴奋性氨基酸的影响 ,以探讨糖皮质激素在缺血缺氧性脑损伤中的应用价值。15只健康杂种犬随机分为两组 ,常规复苏组 (n =7) ,大剂量地塞米松组 (n =8)。采用Pittsburgh标准电击致室颤—心跳骤停 (VF—CA)模型 ,复苏成功后大剂量地塞米松组经股静脉给予地塞米松5mg kg。两组动物于复苏后 3、8小时分别经股静脉采血用于测定外周血中兴奋性毒性氨基酸 (EAA)—谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸 (Asp)的变化规律。采血完毕在麻醉状态下取右顶叶皮层组织两块 ,分别用于显微镜及透射电镜观察缺血缺氧性脑损伤后大脑皮层组织的损害程度。结果可见与常规复苏组相比大剂量地塞米松组血浆中Glu及Asp的含量 (g L)分别降低 10 6 %、14 9% (3h)和 2 1 4 %、2 4 2 % (8h) ,其差异具有统计学意义 (P <0 0 5或P <0 0 1)。显微镜和透射电镜观察的结果亦显示了大剂量地塞米松组脑水肿及各细胞器的损害程度明显减轻如渗出减少、细胞核及核膜较完整、染色质分布及胞质密度较均匀等。

谷氨酸对视神经脑膜上皮细胞的兴奋性毒性作用及其氧化应激机制

背景作为脑脊液－视神经屏障的主要细胞成分，视神经脑膜上皮细胞（MECs）直接与脑脊液相接触，脑脊液中的组分改变可影响MECs的功能，进而对视神经的功能产生不利影响。 目的探讨脑脊液中兴奋性神经递质谷氨酸对MECs功能的影响，为视神经疾病发病机制的研究提供新的线索。方法将培养的人MECs株制备成悬液并接种于96孔培养板中，密度为1×104/孔，分别在培养液中用添加100、200、400、600、800和1 000 μmol/L谷氨酸孵育12、24、36、48和72 h，未添加谷氨酸者作为正常对照组，采用MTS法测定各组MECs的增生率（吸光度A490）值。采用600 μmol/L谷氨酸分别孵育MECs 24 h和48 h，未添加谷氨酸者作为正常对照组，采用实时定量PCR法检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）mRNA和热休克蛋白90（HSP90）mRNA的相对表达量；采用ELISA法检测细胞的总抗氧化能力（T-AOC），并通过荧光探针DCFH-DA观察细胞活性氧（ROS）的荧光强度。结果培养MECs生长良好，培养后72 h约80%细胞达到融合。不同浓度谷氨酸培养组随着谷氨酸浓度的增加及作用时间的延长细胞增生率逐渐下降，总体比较差异均有统计学意义（F浓度＝52.501，P〈0.001；F时间＝8.505，P〈0.001）。实验后24 h和48 h谷氨酸处理组细胞中SOD mRNA相对表达量均明显低于同时间点正常对照组，差异均有统计学意义（t＝20.278、t＝16.724，均P〈0.001）；谷氨酸作用MECs后24 h细胞中HSP90 mRNA相对表达量明显高于正常对照组，差异有统计学意义（t＝5.065，P＝0.002）。实验后24 h谷氨酸处理组细胞中T-AOC活性为（30.835±2.094）nmol/（min·L），低于正常对照组的（32.873±2.317）nmol/（min·L），但差异无统计学意义（t＝1.599，P＝1.414）；实验后48 h谷氨酸处理组细胞中T-AOC活性为（29.561±1.831）nmol/（min·L），低于正常对照组的（33.680±2.039）nmol/（min·L），差异有统计学意义（t＝3.682，P＝0.004）。谷氨酸处理组细胞中ROS荧光强于正常对照组，谷氨酸处理组处理后24 h及48 h细胞中ROS含量分别为48.110±1.712和40.982±1.853，均明显高于正常对照组的36.608±1.009和37.153±1.424，差异均有统计学意义（t＝14.178，P〈0.001；t＝4.012，P＝0.002）。结论谷氨酸可抑制体外培养MECs的增生，其对MECs的兴奋毒性作用与氧化应激刺激作用有关。

补肾止颤方对帕金森病小鼠模型神经保护及抗兴奋性氨基酸作用

目的研究补肾止颤方对帕金森病小鼠模型神经保护及抗兴奋性氨基酸作用。方法采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导帕金森病小鼠模型,随机分为对照组、模型组、金刚烷胺(41.1 mg/kg)组和补肾止颤方低、中、高剂量(6.6、9.9、19.8 g/kg)组,每组8只。连续14 d给药干预后,通过爬杆和自主活动实验评价小鼠行为学,并选择补肾止颤方最佳作用剂量用于后续研究;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理变化;ELISA法测定外周血谷氨酸含量;Western blotting和qRT-PCR法检测小鼠黑质纹状体酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)、兴奋性氨基酸转运体1(excitatory amino acid transporter 1,EAAT1)、YY-1、β-catenin蛋白和TH、DAT、EAAT1、YY-1 m RNA表达。结果与模型组比较,补肾止颤方组小鼠行为学症状显著改善(P<0.05、0.001),纹状体区域细胞整体形态与排列情况得到改善,黑质纹状体TH、DAT表达显著升高(P<0.05、0.01、0.001),外周血谷氨酸含量显著降低(P<0.001),黑质纹状体YY1表达水平均显著降低(P<0.01、0.001),EAAT1表达水平均显著升高(P<0.05、0.001),β-catenin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论补肾止颤方对帕金森病小鼠多巴胺能神经元有一定保护作用,其机制可能与通过转录调控EAAT1表达,从而减少过量的谷氨酸有关。

三甲基锡的神经毒性和耳毒性

有机锡化合物环境污染对人类健康造成很大的危害。众多有机锡化合物中三甲基锡(TMT)对人体有较强的神经毒性和耳毒性。TMT神经毒性可选择性破坏大脑边缘结构尤其是海马神经元以及听神经系统的神经元。TMT之所以选择性损害某些敏感神经元,其原因是因为这些神经元富含一种被称为Stannin的蛋白质,而Stannin蛋白正是TMT攻击的特异性靶目标。由于这种蛋白同样存在于线粒体,因此富含线粒体的细胞比线粒体贫乏的细胞更容易遭受有机锡化合物的攻击。TMT与Stannin产生不可逆性结合之后进而破坏线粒体的结构和功能,最终导致线粒体损害,细胞色素C释放,从而启动细胞凋亡程序。TMT耳毒性主要表现在用药后迅速发生的高频听力损失,其最早期功能改变表现为听神经动作电位的反应阈升高,随后逐渐出现耳蜗微音器电位振幅的降低。因此,TMT对听觉系统的急性损伤部位很可能最早是发生在从内毛细胞到I型螺旋神经节的听神经末梢及其神经纤维,随着用药后时间的延长才会逐渐累及外毛细胞。TMT对周边听觉系统的损害作用包括兴奋性氨基酸毒性,氧化应激,细胞内钙超载,线粒体破坏,神经纤维脱髓鞘病变等多重损害机制,因此TMT模型可能有助于模拟和研究听神经病的多重损害模式。

涤痰汤加减治疗脑缺血再灌注损伤机制研究进展

涤痰汤是治疗中风的经典名方,临床实践表明,涤痰汤对脑缺血再灌注损伤具有显著的改善作用。通过梳理相关文献,发现涤痰汤加减治疗脑缺血再灌注损伤的机制包括抑制氧化应激反应、减轻炎症反应、抑制兴奋性氨基酸毒性、抑制神经细胞凋亡、调节自噬等。这些机制共同作用,能有效保护神经元,减轻脑水肿和出血转化,改善神经功能缺损症状。在单药成分方面,各种药物主要成分的作用与涤痰汤复方的作用具有一致性。参考文献77篇。

重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)抑制大鼠脑卒中后的谷氨酸毒性和IL-1β反应

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对急性脑卒中大鼠脑梗死区域内谷氨酸、IL-1β和IL-6浓度的影响。方法:采用线拴大脑中动脉阻塞(MCAO)法制备急性脑卒中模型,90 min后再灌注。线栓封堵大脑中动脉后,静脉一次性注射rhG-CSF(60 mg·kg^(-1),治疗组,n=10)或0.3mL生理氯化钠溶液(对照组,n=8)。采用微透析法,检测纹状体内谷氨酸浓度;ELISA法分别检测脑组织和血清的IL-1β和IL-6含量。结果:脑卒中发生后0.5～3 h,治疗组梗死侧纹状体内谷氨酸浓度明显低于对照组梗死侧(P<0.01);脑卒中后6 h,治疗组梗死侧脑组织内IL-1β浓度明显低于对照组[(11.38±5.54)vs(21.15±9.57)ng·g^(-1),P<0.01];治疗组血浆内的IL-1β浓度也明显低于对照组[(74.26±26.47)vs(122.88±29.10)ng·mL^(-1),P<0.01]。脑卒中6h后,两组大鼠的血浆和脑组织中均未检测到IL-6。结论:rhG-CSF能明显抑制脑卒中后的谷氨酸毒性和IL-1β反应。

脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及针灸干预机制的研究进展

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是指在梗死区缺血脑组织的血管重新恢复血流灌注后所产生的一系列级联反应而造成的损害,其症状可较前期加重,表现为脑神经细胞凋亡、坏死或者组织形态学改变等。神经细胞凋亡在CIRI病理过程中发挥关键作用。现通过国内外文献总结了脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的相关因素,主要包括兴奋性氨基酸/氧自由基、钙超载、线粒体损伤、凋亡基因、内质网应激、炎症反应。溶栓治疗是目前缺血性脑血管病(IVCD)最有效、最常用的治疗方式,但存在过程复杂化、操作不便利等缺点,而针灸疗法对于IVCD治疗具有操作方便、不良反应少等优点,能很好地弥补溶栓疗法操作复杂、易受时间地点等客观因素限制的不足,有较佳的辅助治疗效果。目前经大量基础研究发现,针灸疗法可介导包括兴奋性氨基酸毒性、钙超载、炎症反应、凋亡基因等方面对神经细胞凋亡进行治疗,但目前在内质网应激、线粒体损伤的针灸疗法研究较少,故加强对于这2个方向的研究可为针灸治疗IVCD取得新的突破。

视网膜神经节细胞的损伤机制

视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的进行性死亡是许多视网膜和视神经疾病发展到最后的必经之路.

海马缺血损伤机制的研究进展

海马是脑内对缺血敏感的部位之一。海马缺血损伤后生命体学习、记忆等功能减退,最终导致神经退行性疾病的发生。海马不同部位组织对缺血损伤易感性的显著差异是脑缺血病理变化的重要特点。本文就海马缺血性损伤涉及的兴奋性氨基酸毒性、氧化应激、免疫炎症、细胞凋亡等机制的研究近况作一简要综述。

脑缺血性损伤级联反应的研究进展

脑缺血性损伤级联反应是一复杂的病理生理过程,至少包括相互联系的4个具体机制:能量障碍和兴奋性氨基 酸毒性、梗死周围去极化、炎症和程序性细胞死亡(凋亡)。它们均由缺血引发,发生在4个不同时间点,彼此重叠并相互联系。 打破损伤的恶性循环,建立早期有效的再灌注和神经保护是临床治疗的主要目标。

氧化应激调控网络在缺血缺氧性脑损伤干预治疗中的作用

近年来缺血和缺氧等因素所导致的脑损伤对于人类健康而言依然具有很大的危害性。以往研究中所发现的由于脑缺血诱导的细胞内钙超载、兴奋性氨基酸毒性、炎症因子释放及自由基生成等一系列反应在脑缺血的发病过程中起了重要作用，针对脑缺血损伤防治药物的研究和干预措施的研发也多从这些角度人手进行实施，但是迄今为止所取得的进展仍然比较缓慢。

米诺环素治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤（spinalCOrdinjury．SCI）是一种常见的中枢神经系统损伤，可以导致脊髓神经传导功能障碍，造成损伤节段以下运动、感觉功能等丧失。脊髓受到外力作用后，损伤局部因血流异常、炎性反应、活性氧物质增加、兴奋性氨基酸毒性等引起的继发性损伤是加重脊髓损伤的重要原因…。有研究表明，通过药物等手段干预脊髓继发性损伤病变过程可以起到减轻脊髓损伤、改善神经功能的作用121。米诺环素是第二代半合成四环素类抗生素．除了具有传统抗菌作用外．还具有抗炎、免疫调节等能力．临床用于治疗类风湿性关节炎等疾病。

美金刚对急性脊髓损伤大鼠运动功能的影响

目的:探讨美金刚对急性脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响及相关作用机制。方法:80只健康成年雄性SD大鼠,采用改良的Allen打击法(10 g×2.5 cm)建立大鼠T12脊髓损伤动物模型,并随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、美金刚组(C组)及MK-801组(D组),每组20只。术前及术后24 h、72 h、5 d、7 d进行运动功能BBB评分,并采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸法检测损伤脊髓节段组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平;HE、尼氏染色观察损伤脊髓组织的病理学改变及Tunel法检测神经细胞的凋亡。结果:与模型组比较,美金刚组及MK-801组大鼠伤后各时间点的脊髓组织SOD活性显著升高、MDA含量显著下调、BBB运动功能评分增加、神经细胞凋亡率降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。HE及尼氏染色观察可见美金刚组及MK-801组大鼠较模型组灰质出血量、白质结构紊乱、炎性细胞浸润程度等都有明显改善。结论:美金刚可以通过阻断过度激活的NMDA受体功能,减轻大鼠脊髓损伤后氧化应激反应,减少脊髓损伤处神经细胞的凋亡,促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。

缝隙连接抑制剂辛醇对大鼠局灶性脑梗死后MDA和SOD的双向作用

缺血性脑血管疾病（ischemic cerebrovascular disease,ICVD）是对人体健康具有严重危害性的多发病与常见病。ICVD的损伤机制涉及到兴奋性氨基酸毒性、细胞内钙超载、细胞凋亡等。其中,位于星型胶质细胞膜上的缝隙连接（gap junction,GJ）是细胞间物质与信息传递的通路,在脑缺血中半暗带（ischemic penumbra,IP）向梗死灶的发展过程中有双向作用[1－3]，但其双向作用机制尚不明确。