腺相关病毒介导shRNA敲减小鼠海马兴奋性氨基酸转运体3动物模型的构建

目的构建敲减小鼠海马神经元兴奋性氨基酸转运体3(excitatory amino acid transporter 3,EAAT3)重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体,建立一种小鼠海马EAAT3敲减动物模型。方法基于SLC1A1(solute carrierfamily 1 member 1)基因mRNA 序列设计4条shRNA(short hairpin RNA),将其模板DNA与酶切后的AAV-GP-1(pAAV-U6-EGFP)载体质粒连接、转化并测序鉴定得到重组质粒,将重组质粒、pHelper包装质粒和pAAV-DJ辅助质粒共同转染至AAV-293细胞包装得到rAAV;用所得rAAV侵染HT-22细胞,72h后RT-qPCR检测SLC1A1mRNA表达水平;36只成年C57小鼠随机分为6组,每组6只,予海马注射rAAV-shRNA-SLC1A1-2-EGFP病毒液1μL/侧,分别于注射后即刻、24h、7d、14d、21d、28d取双侧海马组织,Westernblot检测EAAT3表达水平。结果经测序重组质粒核苷酸序列正确,包装所得病毒浓缩滴度为1×1013TU/ml;rAAV感染HT-22细胞72h后SLC1A1表达量明显降低且显著低于阴性对照(P<0.01,n=3);小鼠海马注射rAAV-shRNA-SLC1A1-2-EGFP7d后EAAT3相对表达量下降(P<0.01),注射后21d、28d表达进一步降低(P<0.01)。结论成功构建介导shRNA表达的重组腺相关病毒系统,建立了一种有效的小鼠海马EAAT3敲减动物模型。

兴奋性氨基酸转运体家族及其在眼科疾病中的研究进展

谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中的主要兴奋性神经递质,谷氨酸酶系统的持续激活会导致神经元的兴奋性毒性,进而引起神经元损伤和细胞死亡。兴奋性氨基酸转运体家族成员是一种多次跨膜蛋白,位于突触前膜、突触囊泡和神经胶质细胞膜上,也是一种高亲和力的钠钾依赖性载体,能够不断清除细胞外残留的谷氨酸,维持正常的突触内外谷氨酸水平和细胞内氧化还原稳态,对于保护细胞免受兴奋性毒性以及氧化应激损伤至关重要,兴奋性氨基酸转运体家族成员表水平达的失调与多种中枢神经系统疾病神经退行性变的发生和发展密切相关。在视网膜组织中,兴奋性氨基酸转运体家族成员广泛表达。目前大量研究表明,兴奋性氨基酸转运体家族成员广泛参与了青光眼、视网膜缺血再灌注损伤、年龄相关性黄斑变性等眼部疾病的发病,但具体机制有待进一步阐明。为此,文章综述了兴奋性氨基酸转运体家族成员的生理功能及其在相关眼科疾病发生和发展中作用的研究进展,为进一步阐明相关眼病发病的分子机制及新的防治靶点的发现提供新的视角。

慢性吗啡耐受大鼠脊髓神经元兴奋性氨基酸转运体3表达的变化

目的观察慢性吗啡耐受大鼠脊髓神经元兴奋性氨基酸转运体3（EAAT3）表达的变化。方法成年雄性SD大鼠45只，随机分为5组（n=9），除假手术组（S组）外，生理盐水组（NS组）、吗啡组（M组）、氯胺酮组（K组）和吗啡＋氯胺酮组（M＋K组）均进行鞘内置管，鞘内置管后3d进行鞘内给药，NS组鞘内注射生理盐水40阻，M组给予吗啡20烬，K组给予氯胺酮30μg，M＋K组给予吗啡20μg＋氯胺酮30μg，2次/d，连续7d。分别在给药前、给药1、3、5、7d及停药后1d时测定50％缩爪阈值（PWT）与辐射热缩爪潜伏期（PwL），最后一次测定痛阈后处死大鼠，分别采用免疫印迹分析和免疫组化法检测脊髓EAAT3的表达水平。结果与S组比较，M组给药1、3d时PWT升高，给药7d及停药后1d时PWT降低，给药1、3、5d时PWL延长，停药后1d时PWL缩短；M＋K组给药1、3、5、7d及停药后1d时PWT升高，PWL延长，M组和M＋K组脊髓EAAT3表达下调（P〈0．05）；与M组比较，M＋K组给药3、5、7d及停药后1d时PWT升高，给药5、7d时及停药后1d时PWL延长，脊髓EAAT3表达上调（P〈0．05）。EAAT3主要分布于脊髓背角Ⅰ-Ⅱ层的感觉神经元。结论脊髓背角神经元EAAT3表达下调参与了大鼠慢性吗啡耐受的形成，吗啡下调EAAT3表达的部分机制与激活N-甲基-D天冬氨酸受体有关。

兴奋性氨基酸转运体研究进展

兴奋性氨基酸转运体 (EAAT)位于突触前膜、突触囊泡和神经胶质细胞膜上。它们对于兴奋性氨基酸的再循环 ,兴奋性信号的终止以及保护神经细胞免受兴奋性毒性损害具有特别重要的意义。

脑摄取平衡时丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2mRNA的影响

目的:探讨丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)mRNA表达的影响。方法:18只健康杂种犬,雌雄不限,12～18个月,体重10～12kg,随机分为对照组(C组)、低剂量组(L组)和高剂量组(H组),每组6只。L组15s内静脉注入丙泊酚5.5mg/kg诱导,55mg/(kg.h)恒速静注维持;H组15s内注入丙泊酚7.0mg/kg诱导,70mg/(kg.h)恒速静注维持。静注50min时取颈内动、静脉血各2mL后静注10%KCl注射液2mg/kg处死L组和H组动物。采用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)检测动、静脉血浆丙泊酚浓度。C组不给予任何干预措施,快速静注10%KCl2mg/kg处死。3组均于无菌条件下解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶以及额叶组织,qRT-PCR方法检测脑组织EAAT2 mRNA的表达水平。结果:丙泊酚静注50min时,L组和H组丙泊酚血浆浓度(动脉-动脉,静脉-静脉比较)差异显著(P<0.01),而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的相对表达量,在L组和H组均较C组明显升高,差异显著(P<0.05);L组和H组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。背侧丘脑等其他脑区EAAT2 mRNA的相对表达量3组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:丙泊酚恒速静注50min,犬脑摄取达到平衡状态;此时丙泊酚可显著上调下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的表达,但不同剂量对其表达的影响差异无显著性。

兴奋性氨基酸转运体2在神经退行性变中的作用

谷氨酸是脑内必需的兴奋性神经递质之一,兴奋性氨基酸转运体(Excitatory amino acid transporterEAAT)2是最主要的谷氨酸转运体,负责脑内90%以上的谷氨酸再摄取,调节突触间隙的谷氨酸浓度。EAAT2功能紊乱导致胞外谷氨酸过量积聚,在多种神经退行性疾病的发病过程中起重要作用,如阿尔茨海默病、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩侧索硬化等。对于人EAAT2启动子的研究发现,NF-kB在星形胶质细胞中对EAAT2表达起关键作用。通过筛选1 040种FDA批准的化合物,发现多种β-内酰胺类抗生素如头孢曲松钠等是EAAT2的转录激活剂,可以增加EAAT2的蛋白表达水平,产生神经保护作用。

慢性关节炎吗啡耐受大鼠脊髓兴奋性氨基酸转运体的变化

目的:以慢性关节炎大鼠模型为基础,通过鞘内给与吗啡时间的不同,观察脊髓背角兴奋性氨基酸转运体(EAAT)水平变化,以阐述阿片耐受的机制。方法:30只SD大鼠随机分为5组(n=6)。盐水组(S组)鞘内注入20ul生理盐水1d;吗啡1d组(M1组),鞘内注入20ug吗啡1d;吗啡3d组(M3组),鞘内注入20ug吗啡3d;吗啡5d组(M5组),鞘内注入20ug吗啡35;吗啡7d组(M7组),鞘内注入20ug吗啡7d。各组于注药后完毕后观察大鼠的行为学并取脊髓腰4-5节段,应用免疫组化法和计算机图象分析技术观察大鼠脊髓背角兴奋性氨基酸转运体。结果:随着吗啡应用时间的延长,大鼠脊髓背角兴奋性氨基酸转运体表达逐渐下降(P【0.05);缩脚潜伏期减少(P【0.05)。结论:形成关节炎吗啡耐受的大鼠脊髓背角兴奋性氨基酸转运体表达变化随着吗啡应用时间增加而减少。

氨基酸转运体组分SLC3A2在肿瘤发生发展中的作用

SLC3A2(solute carrier family 3 member 2)是来自SLC3家族的一种Ⅱ型跨膜糖蛋白,是氨基酸转运体(heteromericamino acid transports,HATs)的重链组成部分。HATs在细胞中广泛表达并介导了几乎所有必需氨基酸的跨膜转运,保证细胞内氨基酸水平的稳定,对维持细胞正常的生物学功能具有重要作用。越来越多的研究报道,SLC3A2在多种肿瘤中高表达并参与细胞的恶性转化,然而其具体作用机制仅有初步报道尚未阐明。现就SLC3A2的结构、功能及其在肿瘤发生发展过程中的作用机制等综述如下。

人参皂苷Rb_3对脑缺血-再灌注后大鼠脑组织中兴奋性氨基酸的作用研究

目的:探讨人参皂苷Rb3对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠脑组织中兴奋性氨基酸(EAA)含量的影响。方法:将大鼠随机分成6组:假手术组、模型组、血栓通注射液(XST)组及人参皂苷Rb320、40、80 mg/kg组;采用线栓法使大脑中动脉闭塞(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血模型,于造模24 h后进行行为学评分以及检测脑组织中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)含量。结果:人参皂苷Rb340、80 mg/kg能明显减轻脑缺血再灌注损伤大鼠的行为学评分,显著降低脑组织中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)的含量(与模型组比较P<0.05或P<0.01)。结论:人参皂苷Rb3对抗缺血性脑损伤,防止缺血时EAA的升高,从而发挥对脑损伤的保护作用。

姜黄素在体外对氨基酸递质转运体EAAC1及GAT1功能的影响

目的:探讨体外条件下姜黄素对兴奋性氨基酸递质转运体EAAC1及抑制性递质转运体GAT1功能活性的影响。方法:利用爪蟾卵母细胞内源性Na/K-ATPase及外源表达的大鼠Na/K-ATPase、EAAC1及GAT1蛋白,借助双电极电压钳技术,应用姜黄素干预,实时记录并观察姜黄素干预对不同离子转运体介导稳态电流的影响。结果:(1)不同浓度梯度姜黄素(7.5μmol.L-1、15μmol.L-1、30μmol.L-1、75μmol.L-1)灌流对内源性及外源性Na/K-ATPase介导稳态电流,无显著影响;不同浓度姜黄素(15μmol.L-1和30μmol.L-1,)预处理卵母细胞24h,亦未观察到明显效应;借助微量注射方法,将姜黄素(30μmol.L-1)直接注射到卵母细胞内,对Na/K-ATPase介导稳态电流无显著影响。(2)30μmol.L-1姜黄素灌流对外源性EAAC1介导稳态电流无明显影响。(3)30μmol.L-1姜黄素灌流可以轻度抑制外源性GAT1介导稳态电流。结论:姜黄素对细胞膜Na/K-ATPase和EAAC1介导稳态电流无显著影响,对GAT1介导稳态电流有轻度抑制作用。

鞘内注射吗啡联合氯胺酮对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸的含量及谷氨酸转运-体1 mRNA表达水平的影响

目的探讨鞘内注射吗啡联合氯胺酮对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸（EAAs）的含量及谷氨酸转运体-1（GLT-1）mRNA表达水平的影响。方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠125只,体重为250~300 g,随机分为5组,每组各设5个时间点,每个时间点5只大鼠。按Brennan法制备大鼠急性切口痛模型。假手术组（Ⅰ组）,0.9%氯化钠溶液组（Ⅱ组）于术后鞘内注射0.9%氯化钠溶液25μL,吗啡组（Ⅲ组）于术后鞘内注射吗啡10μg,氯胺酮组（Ⅳ组）于术后鞘内注射氯胺酮100μg,吗啡联合氯胺酮组（Ⅴ组）于术后鞘内注射吗啡5μg＋氯胺酮50μg;Ⅲ~Ⅴ组鞘内给药时均以0.9%氯化钠溶液稀释至20μL,注射药物后再以0.9%氯化钠溶液5μL冲洗导管。分别于术后1、2、6、12、24 h（T1-T5）5个时间点,应用von Frey丝线测定大鼠后爪机械缩足阈值（PWT）,随后取大鼠腰段脊髓,测定EAAs[谷氨酸（GLU）、天冬氨酸（ASP）]的含量;应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测T5时间点的大鼠腰段脊髓GLT-1 mRNA的表达水平。结果与Ⅰ组相比,除Ⅲ组在T1时间点外,Ⅱ~Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著降低（P值均〈0.05）;Ⅲ和Ⅴ组T1、T2时间点以及Ⅱ和Ⅳ组术后各时间点的脊髓GLU、ASP含量均显著升高（P值均〈0.05）。与Ⅱ组相比,Ⅲ-Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著升高（P值均〈0.05）,Ⅳ组在T1、T2时间点以及Ⅲ和Ⅴ组在术后各时间点的脊髓GLU、ASP含量均显著降低（P值均〈0.05）。与Ⅲ组相比,除T1时间点外,Ⅴ组在术后各时间点的PWT均升高;Ⅳ组在T3-T5时间点的脊髓GLU、ASP含量显著升高（P值均〈0.05）,Ⅴ组在T1、T2时间点的脊髓GLU、ASP含量显著降低（P值均〈0.05）。与Ⅳ组相比,Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著升高（P值均〈0.05）,脊髓GLU、ASP含量均显著降低（P值均〈0.05）。Ⅱ-Ⅴ组在T5时间点的GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅰ组显著减少（P值均〈0.05）,Ⅲ-Ⅴ组的GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅱ组显著增加（P值均〈0.05）,Ⅴ组的脊髓GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅲ、Ⅳ组显著增加（P值均〈0.05）。结论在大鼠切口痛模型中,鞘内注射吗啡联合氯胺酮可减轻大鼠急性切口痛,可能与其降低大鼠脊髓EAAs含量和改变GLT-1 mRNA表达水平有关。

谷氨酸转运体3在神经功能调节中的作用研究进展

谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统内一种主要的兴奋性神经递质,当神经元突触间隙出现大量兴奋性氨基酸堆积时,就可造成神经毒性作用甚至细胞死亡,进而出现认知功能改变及其他的精神神经疾病。引起兴奋性氨基酸堆积的原因很多,其中兴奋性氨基酸转运体(EAAT)的改变与其密切相关,而EAAT3是谷氨酸转运体之一,它对突触间谷氨酸浓度的调控、谷胱甘肽(中枢神经系统的抗氧化剂)的合成具有重要意义。另外,EAAT3本身与神经保护以及认知功能也密切相关。

铝螯合剂对铝染毒大鼠学习记忆及兴奋性氨基酸类神经递质的影响

目的探讨铝螯合剂1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮(DFP)对铝染毒大鼠学习和记忆能力以及脑组织中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(G1u)两种兴奋性氨基酸类神经递质含量的影响。方法将SPF级健康雄性Wistar大鼠35只按体重随机分为5个组,分别为阴性对照组(给予1 ml/d生理盐水,连续10周),铝染毒组[前8周给予AlCl_3 354.7 mg/(kg·d),后2周给予生理盐水1 ml/d],铝+DFP低、中、高剂量组[前8周给予AlCl_3 354.7 mg/(kg·d),后2周分别给予DFP 13.82、27.44、54.88 mg/(kg·d)],每组7只,均以灌胃方式染毒。采用Y型迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的改变,采用高效液相色谱法测定各组大鼠脑组织中Asp、Glu的含量。结果各组大鼠体重间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Y型迷宫实验结果显示,铝+DFP高剂量组潜伏期短于铝染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05);且各铝+DFP剂量组潜伏期与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。铝染毒组大鼠错误次数多于阴性对照组,各铝+DFP剂量组错误次数均少于铝染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05);各铝+DFP剂量组错误次数与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。铝+DFP低、中、高剂量组天门冬氨酸和谷氨酸含量均高于铝染毒组,低于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论DFP能够升高染铝大鼠脑组织中兴奋性氨基酸类神经递质含量,有效地改善染铝大鼠学习记忆能力,对中枢神经系统有明显的保护作用。

突发寒潮对糖尿病大鼠卒中前状态脑内兴奋性氨基酸代谢通路的影响

目的：探讨突发寒潮对糖尿病大鼠脑卒中发病前脑组织 N-甲基-天（门）冬氨酸受体 NR1亚基（N-Methyl-D-Aspartate receptor 1，NMDAR1）和兴奋性氨基酸转运体2（excitatory amino acid transporter 2，EAAT2）表达的影响。方法选取18月龄老年雄性 SD 大鼠（糖尿病组24只，对照组14只）。糖尿病组腹腔注射链尿佐菌素联合高糖高脂饮食建立大鼠2型糖尿病模型。将对照组及糖尿病组分别均分为寒潮组和非寒潮组，寒潮组置于人工气候箱中，一次寒潮（22℃×12 h、4℃×12 h）为1 d 循环，相对湿度控制在60％～90％，共3 d。在研究终点将大鼠灌注后断头取脑，并用免疫组织化学方法检测脑组织 NMDAR1和 EAAT2表达水平。结果糖尿病组大鼠血糖及血清胰岛素水平均显著高于对照组（P ＜0．05），寒潮后大鼠普遍出现活动、饮食减少、体质量减轻（P ＜0．05）。对照寒潮组脑神经细胞 NMDAR1和 EAAT2的表达水平增加（P ＜0．05）；糖尿病组大鼠无论是否经寒潮干预，脑神经细胞 NMDAR1和 EAAT2的表达水平均明显增加，尤以糖尿病寒潮组更为显著（P ＜0．05）。结论血糖升高导致大鼠脑内 NMDAR1和 EAAT2的 表 达 增 加。在寒潮的外应激作用下，糖尿病大鼠脑组织 NMDAR1和EAAT2的表达进一步增加，促进卒中易感性的环境形成。

异氟醚对新生大鼠脑胶质纤维酸性蛋白和兴奋性氨基酸转运体2表达的影响

目的研究长时间亚麻醉浓度异氟醚暴露对新生大鼠脑星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和兴奋性氨基酸转运体2(excitatory amino acid transporter2,EAAT2)表达的影响。方法出生后7 d的Wistar大鼠40只,采用随机数字表法随机分为两组(n=20),异氟醚组(Iso)和对照组(Con),分别暴露于1.1%异氟醚(0.5 MAC)和30%氧气与氮气混合气体中维持6 h。在处理后12、24 h、3和7 d时,两组均分别取乳鼠新鲜脑组织(n=5),冰冻组织切片后,用GFAP抗体和EAAT2抗体进行免疫荧光双标染色,测得额叶皮质区和海马区的星形胶质细胞GFAP、GFAP和EAAT2共染区的荧光强度。结果相比Con组额叶皮质区,Iso组GFAP的荧光强度在处理后12、24 h显著降低(P<0.01),而处理后3、7 d两组差异无统计学意义;海马区比较,Iso组GFAP的荧光强度在处理后12、24 h、3 d相比Con组显著下降(P<0.01),处理后7 d差异无统计学意义。Iso组额叶皮质区和海马区GFAP和EAAT2共染区域的荧光强度在处理后12、24 h、3和7 d均显著降低,与Con组差异有统计学意义(P<0.01)。结论 1.1%异氟醚暴露会暂时性减少新生大鼠额叶皮质区和海马区GFAP表达,延迟星形胶质细胞的骨架发育;而对星形胶质细胞EAAT2表达抑制是持续性的,这可能是异氟醚对新生大鼠产生脑毒性的机制之一。

谷氨酸转运体基因多态性与犬行为性状的关联性分析

兴奋性氨基酸是广泛存在于哺乳类动物中枢神经系统的正常兴奋性神经递质，参与突触兴奋传递，学习记忆形成以及与多种神经变性疾病有关。EAA包括谷氨酸（Glu）、天冬氦酸（Asp）、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）、亮氨酸等等。其中谷氨酸是中枢神经系统内含量最高的氨基酸。目前有学者认为在中枢神经系统（CNS）损伤中，兴奋性氦基酸与抑制性氨基酸的失衡，对激发兴奋毒性起一定作用，故是造成脑损伤的因素之一。

兴奋性氨基酸转运体2与缺血性脑损伤

背景缺血性脑损伤的机制与防治一直为人们所关注，但迄今仍无突破性进展。目的选取兴奋性氨基酸转运体2（excitatory amino acid transporter 2，EAAT2）为切入点，以期为缺血性脑损伤的研究提供一新思路。内容综述EAAT2转运谷氨酸的机制、EAAT2在缺血性脑损伤形成中的地位以及EAAT2调节剂减轻缺血性脑损伤的实验研究进展。趋向谷氨酸转运体EAAT2可能成为治疗缺血性脑损伤的有效靶点。

兴奋性氨基酸载体1和谷氨酸胱氨酸转运体在锰干扰谷胱甘肽合成中的作用

目的探讨兴奋性氨基酸载体1(EAAC1)和谷氨酸胱氨酸转运体(Xc-)在锰干扰谷胱甘肽(GSH)合成过程中的作用,为阐明锰中毒的发病机制和预防提供依据。方法清洁级昆明小鼠56只,雌雄各半,按体重随机分成4组(对照组及低、中、高剂量染锰组),每组14只。对照组腹腔注射0.9%氯化钠,低、中、高剂量染锰组的MnCl2染毒剂量分别为12.5、25、50 mg/kg,注射剂量均为5 ml/kg。每天染毒1次,持续2周。观察小鼠的一般形态及体重变化,HE染色观察脑纹状体的组织形态改变,FJC荧光染色观察纹状体内神经元退行性病变,试剂盒检测GSH含量,免疫组化法检测EAAC1和xCT的阳性表达,Western blotting法检测纹状体内EAAC1和xCT蛋白水平的变化。结果随着染锰剂量的增加,与对照组相比,小鼠精神状态先兴奋后逐渐倦怠,皮毛光泽逐渐减退且不整齐;同一时间的各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。25、50 mg/kg MnCl2组小鼠脑纹状体的组织形态损伤逐渐加重,神经元退行性病变进行性加重,细胞数目逐渐减少。与对照组相比,25、50 mg/kg MnCl2组小鼠脑纹状体内GSH含量降低,EAAC1和xCT的阳性表达和蛋白水平均下降,且50 mg/kg MnCl2组下降最明显,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论过量的锰暴露可致小鼠脑纹状体内GSH合成障碍,其机制可能与EAAC1和xCT的调控障碍有关,从而对机体造成氧化损伤。

兴奋性氨基酸及其受体与转运体在抗癫痫药理学研究中的意义

目的:综述兴奋性氨基酸(EAA)、兴奋性氨基酸受体(EAARs)及兴奋性氨基酸转运体(EAATs)在抗癫痫药理研究中的意义。方法:以"Excitatory amino acids""Receptor""Transporter""Epilepsy"等为关键词,在Pub Med数据库中检索2004-2014年的相关文献,归纳总结后,从EAA、EAARs、EAATs与癫痫发生发展的关系以及在抗癫痫药理研究中的意义进行综述。结果与结论:检索到相关文献150余条,其中有效文献40条。中枢神经系统EAA水平异常升高、EAATs低表达都可导致谷氨酸(Glu)含量增加,从而诱发癫痫;EAARs因受到不适当刺激而产生兴奋毒性,导致神经元细胞损伤或缺失也是癫痫发作原因之一。EAA和代谢型Glu受体(m Glu Rs)可能对癫痫的治疗提供新的思路并为研制理想治疗药物提供了有益的靶标。作用于m Glu Rs和EAATs的药物、调节第二类m Glu Rs和EAATs的基因或影响相应蛋白表达的药物应用于临床,将对癫痫的防治发挥积极作用。

HBV相关肝细胞癌组织GLAST、GS蛋白表达及其与切除术后早期复发转移的关系

目的:检测乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌组织兴奋性氨基酸转运体1(GLAST)、谷氨酰胺合成酶(GS)蛋白表达,并分析其与切除术后早期复发转移的关系。方法:选取本院2020年3月至2022年5月收治的125例实施切除术的HBV相关肝细胞癌患者,采用免疫组化法检测癌组织和切缘正常组织GLAST、GS蛋白表达。比较癌组织与切缘正常组织GLAST、GS蛋白阳性率;比较不同临床病理特征患者癌组织GLAST、GS蛋白阳性率;随访1年,Cox回归分析复发转移的影响因素。结果:癌组织GLAST、GS蛋白阳性率分别为28.57%、73.95%,前者低于切缘正常组织的57.98%,后者高于切缘正常组织的33.61%(P<0.05);HBV感染病程>22年患者癌组织GLAST蛋白阳性率均低于<10年、10~22年患者(P<0.05);肿瘤淋巴结转移(TNM)Ⅲ~Ⅳ期、有门静脉癌栓、未/低分化患者癌组织GLAST蛋白阳性率低于TNMⅠ~Ⅱ期、无门静脉癌栓、中/高分化患者(P<0.05),GS蛋白阳性率趋势相反;术后早期复发转移发生率为21.01%;年龄(HR=1.471,95%CI 1.086~1.993)、伴肝硬化(HR=1.728,95%CI 1.110~2.691)、GLAST蛋白阳性表达(HR=0.451,95%CI 0.224~0.910)、GS蛋白阳性表达(HR=2.255,95%CI 1.027~4.948)均是患者术后早期复发转移的影响因素(P<0.05)。结论:HBV相关肝细胞癌组织GLAST蛋白阳性率降低、GS蛋白阳性率升高,且二者均与切除术后早期复发转移有关。