藏猪兴奋性氨基酸转运载体EAAC1基因的克隆与原核表达

兴奋性氨基酸转运载体EAAC1是肠道内谷氨酸的主要载体。本研究根据人的基因编码区设计一对特异性引物,以藏猪空肠总RNA为模板,通过RT-PCR获得一长约1600 bp的cDNA片段,T/A克隆后测序,并进行序列分析;将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中构建融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。测序结果显示,获得的cDNA全长为1575 bp,编码524个氨基酸;EAAC1分子量为57 kD,等电点为5.34,GenBank登录号为GQ375513;该蛋白质具有3个N-糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位点和1个cAMP/cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点,含有7个跨膜结构域和一个信号肽序列;SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白质与预期蛋白质大小一致。上述结果为进一步研究EAAC1的功能及其调控奠定了基础。

氨基酸转运载体相关基因在番鸭小肠不同肠段的表达分析

试验旨在研究氨基酸转运载体相关基因在番鸭小肠不同肠段的表达规律。试验测定90和300日龄公番鸭体重与小肠形态发育,采用RT-PCR比较氨基酸转运载体相关基因SLC1A1、SLC1A4、SLC7A1、SLC7A5和SLC7A9在90和300日龄公番鸭小肠不同肠段的表达量,并进行高、低体重组300日龄公番鸭回肠氨基酸转运载体相关基因表达的验证试验。结果显示:除回肠绒毛高度外,300日龄番鸭十二指肠、空肠和回肠的肠壁厚度、隐窝深度和绒毛宽度以及十二指肠和空肠的绒毛高度均显著高于90日龄(P<0.05);300日龄番鸭空肠和回肠的肠壁厚度显著高于十二指肠(P<0.05),90、300日龄番鸭十二指肠的绒毛高度和隐窝深度显著高于空肠和回肠(P<0.05);300日龄番鸭十二指肠和空肠SLC1A1mRNA表达量、十二指肠和回肠SLC7A5 mRNA表达量以及十二指肠、空肠和回肠SLC7A9 mRNA表达量均显著高于90日龄(P<0.05);300日龄番鸭回肠SLC1A1、SLC1A4、SLC7A5和SLC7A9 mRNA表达量显著高于空肠和十二指肠(P<0.05);高体重组番鸭SLC1A1mRNA表达量显著高于低体重组(P<0.05)。研究表明,番鸭肠道转运吸收氨基酸的主要部位是小肠后半段,SLC1A1基因可作为番鸭体重选择的候选功能基因。

氨基酸转运体SLC1家族作为肿瘤治疗靶点的研究进展

目的:整理综述氨基酸转运体SLC1家族的生理特性以及目前作为肿瘤治疗靶点方面的研究进展。方法:通过查找中国知网、PubMed等文献数据库,整理国内外有关SLC1家族生理特性以及影响肿瘤代谢的研究报告,整理出SLC1家族在靶向治疗肿瘤领域的相关研究进展。结果:SLC1家族成员在肿瘤代谢过程中可通过促进细胞内外谷氨酸合成谷胱甘肽、通过谷氨酰胺摄取和mTOR信号传导实现谷氨酰胺的过度表达、通过调节R-2-羟基戊二酸癌代谢物(R-2-HG)、HIF-1α以及p13K/AKT通路等促进肿瘤细胞的发展,除此之外,很多研究中也发现SLC1家族成员与肿瘤细胞的自噬和凋亡、氧化应激反应、细胞有丝分裂以及癌基因的表达等多种因素相关,靶向SLC1家族的抗肿瘤药物已成为目前肿瘤药物研究的热点。结论:本文通过大量文献综述,系统地整理总结四种SLC1家族成员与不同肿瘤细胞之间的影响机制研究进展,但目前多种氨基酸转运体在肿瘤细胞中的作用机制仍不够明确,在今后的研究中进一步探究SLC1家族成员抗肿瘤治疗的作用机制。

人参调节海马星形胶质细胞兴奋性氨基酸转运功能拮抗小鼠应激障碍的研究

目的观察应激对小鼠海马星形胶质细胞兴奋性氨基酸转运功能的影响,并探讨人参水煎液对此功能紊乱的调节作用。方法100只雄性ICR小鼠随机分为10组,对照组和模型组各5组。应激模型采用腹腔注射皮质酮,10组动物分配至5个时间点(1、2、3、4、5周)进行实验。另取30只雄性ICR小鼠分为对照组、模型组和人参干预组,每组10只。2组实验独立开展,实验周期均为5周。实验结束后,检测体质量、行为学、神经元结构/功能指标(NF-L、SYP)、星形胶质细胞生物标志指标(GFAP)和兴奋性氨基酸转运功能指标(EAATs),进行统计学分析。结果皮质酮注射1~3周小鼠海马星形胶质细胞标志蛋白反应性高表达,第3周末表达水平下调(P<0.05),同时神经元结构功能指标表达下调提示神经元损伤,实验动物出现体质量和行为学的显著改变(P<0.05)。进一步检测星形胶质细胞兴奋性氨基酸转运蛋白,显示表达下调,并与神经元损伤呈正相关性。人参干预组对模型小鼠EAATs、GFAP、NF-L和SYP的表达下降均有显著改善作用(P<0.05)。结论腹腔注射皮质酮可使小鼠海马神经元损伤并出现行为学异常,其机制可能是应激影响星形胶质细胞兴奋性氨基酸转运功能所导致,人参水煎液可通过此机制发挥抗应激作用。

兴奋性氨基酸转运体研究进展

兴奋性氨基酸转运体 (EAAT)位于突触前膜、突触囊泡和神经胶质细胞膜上。它们对于兴奋性氨基酸的再循环 ,兴奋性信号的终止以及保护神经细胞免受兴奋性毒性损害具有特别重要的意义。

视神经挫伤对大鼠视网膜谷氨酰胺合酶和兴奋性氨基酸转运蛋白-2表达的影响

目的通过谷氨酰胺合酶(glutamine synthetase,GS)、兴奋性氨基酸转运蛋白-2(GLT-1)表达的改变,研究视神经挫伤后视网膜谷氨酸代谢变化的机制。方法建立大鼠右眼视神经挫伤模型48只。术后1d、7d、14d以高效液相色谱分析检测大鼠玻璃体谷氨酸浓度;通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GS、GLT-1的表达。结果视神经挫伤后1d、7d、14d,大鼠玻璃体谷氨酸浓度升高,与对侧眼比较差异具有统计学意义(P=0.0011、P=0.0000、P=0.0000)。视神经挫伤后1d,GS高表达(P=0.0054);挫伤后7d,GS表达与对侧眼比较差异无统计学意义(P=0.1379);挫伤后14d,GS低表达(P=0.0333)。视神经挫伤后1d、7d,GLT-1的表达与对照组的差异无统计学意义(P=0.1985、0.6537);但挫伤后14d,GLT-1低表达(P=0.0403)。结论视神经挫伤后玻璃体谷氨酸浓度升高,与视网膜GS、GLT-1的表达降低有关。

视神经损伤对大鼠视网膜兴奋性氨基酸转运蛋白-1表达的影响

目的研究视神经损伤对兴奋性氨基酸转运蛋白-1(EAAT-1)的表达以及对视网膜谷氨酸(Glu)摄取的影响。方法建立大鼠右眼视神经损伤模型48只。术后1、7、14 d以高效液相色谱分析检测大鼠玻璃体谷氨酸浓度;通过免疫组织化学检测大鼠视网膜EAAT-1的表达。结果视神经损伤后1、7、14 d,实验眼玻璃体谷氨酸浓度升高,与对照眼比较,差异均有统计学意义(t1 h=10.171,P=0.000;t7 h=3.871,P=0.006;t14 h=5.599,P=0.001);实验眼视网膜EAAT-1表达降低,与对照眼比较,差异均有统计学意义(t1 h=3.460,P=0.011;t7 h=4.182,P=0.004;t14 h=4.077,P=0.005)。结论视神经损伤后视网膜内谷氨酸积聚,与视网膜EAAT-1的表达降低有关。

脑摄取平衡时丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2mRNA的影响

目的:探讨丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)mRNA表达的影响。方法:18只健康杂种犬,雌雄不限,12～18个月,体重10～12kg,随机分为对照组(C组)、低剂量组(L组)和高剂量组(H组),每组6只。L组15s内静脉注入丙泊酚5.5mg/kg诱导,55mg/(kg.h)恒速静注维持;H组15s内注入丙泊酚7.0mg/kg诱导,70mg/(kg.h)恒速静注维持。静注50min时取颈内动、静脉血各2mL后静注10%KCl注射液2mg/kg处死L组和H组动物。采用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)检测动、静脉血浆丙泊酚浓度。C组不给予任何干预措施,快速静注10%KCl2mg/kg处死。3组均于无菌条件下解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶以及额叶组织,qRT-PCR方法检测脑组织EAAT2 mRNA的表达水平。结果:丙泊酚静注50min时,L组和H组丙泊酚血浆浓度(动脉-动脉,静脉-静脉比较)差异显著(P<0.01),而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的相对表达量,在L组和H组均较C组明显升高,差异显著(P<0.05);L组和H组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。背侧丘脑等其他脑区EAAT2 mRNA的相对表达量3组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:丙泊酚恒速静注50min,犬脑摄取达到平衡状态;此时丙泊酚可显著上调下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的表达,但不同剂量对其表达的影响差异无显著性。

兴奋性氨基酸转运体2在神经退行性变中的作用

谷氨酸是脑内必需的兴奋性神经递质之一,兴奋性氨基酸转运体(Excitatory amino acid transporterEAAT)2是最主要的谷氨酸转运体,负责脑内90%以上的谷氨酸再摄取,调节突触间隙的谷氨酸浓度。EAAT2功能紊乱导致胞外谷氨酸过量积聚,在多种神经退行性疾病的发病过程中起重要作用,如阿尔茨海默病、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩侧索硬化等。对于人EAAT2启动子的研究发现,NF-kB在星形胶质细胞中对EAAT2表达起关键作用。通过筛选1 040种FDA批准的化合物,发现多种β-内酰胺类抗生素如头孢曲松钠等是EAAT2的转录激活剂,可以增加EAAT2的蛋白表达水平,产生神经保护作用。

鞘内注射吗啡联合氯胺酮对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸的含量及谷氨酸转运-体1 mRNA表达水平的影响

目的探讨鞘内注射吗啡联合氯胺酮对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸（EAAs）的含量及谷氨酸转运体-1（GLT-1）mRNA表达水平的影响。方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠125只,体重为250~300 g,随机分为5组,每组各设5个时间点,每个时间点5只大鼠。按Brennan法制备大鼠急性切口痛模型。假手术组（Ⅰ组）,0.9%氯化钠溶液组（Ⅱ组）于术后鞘内注射0.9%氯化钠溶液25μL,吗啡组（Ⅲ组）于术后鞘内注射吗啡10μg,氯胺酮组（Ⅳ组）于术后鞘内注射氯胺酮100μg,吗啡联合氯胺酮组（Ⅴ组）于术后鞘内注射吗啡5μg＋氯胺酮50μg;Ⅲ~Ⅴ组鞘内给药时均以0.9%氯化钠溶液稀释至20μL,注射药物后再以0.9%氯化钠溶液5μL冲洗导管。分别于术后1、2、6、12、24 h（T1-T5）5个时间点,应用von Frey丝线测定大鼠后爪机械缩足阈值（PWT）,随后取大鼠腰段脊髓,测定EAAs[谷氨酸（GLU）、天冬氨酸（ASP）]的含量;应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测T5时间点的大鼠腰段脊髓GLT-1 mRNA的表达水平。结果与Ⅰ组相比,除Ⅲ组在T1时间点外,Ⅱ~Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著降低（P值均〈0.05）;Ⅲ和Ⅴ组T1、T2时间点以及Ⅱ和Ⅳ组术后各时间点的脊髓GLU、ASP含量均显著升高（P值均〈0.05）。与Ⅱ组相比,Ⅲ-Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著升高（P值均〈0.05）,Ⅳ组在T1、T2时间点以及Ⅲ和Ⅴ组在术后各时间点的脊髓GLU、ASP含量均显著降低（P值均〈0.05）。与Ⅲ组相比,除T1时间点外,Ⅴ组在术后各时间点的PWT均升高;Ⅳ组在T3-T5时间点的脊髓GLU、ASP含量显著升高（P值均〈0.05）,Ⅴ组在T1、T2时间点的脊髓GLU、ASP含量显著降低（P值均〈0.05）。与Ⅳ组相比,Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著升高（P值均〈0.05）,脊髓GLU、ASP含量均显著降低（P值均〈0.05）。Ⅱ-Ⅴ组在T5时间点的GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅰ组显著减少（P值均〈0.05）,Ⅲ-Ⅴ组的GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅱ组显著增加（P值均〈0.05）,Ⅴ组的脊髓GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅲ、Ⅳ组显著增加（P值均〈0.05）。结论在大鼠切口痛模型中,鞘内注射吗啡联合氯胺酮可减轻大鼠急性切口痛,可能与其降低大鼠脊髓EAAs含量和改变GLT-1 mRNA表达水平有关。

炎性痛-吗啡耐受大鼠背根神经节兴奋性氨基酸载体1的表达

目的探讨兴奋性氨基酸载体1（EAAC1）在吗啡耐受形成机制中的作用。方法将30只雄性SD大鼠行鞘内置管,随机均分为六组。其中的四组于左后肢制成佐剂性关节炎模型,分别经鞘内给予生理盐水（C组）、吗啡10μg（M10组）、吗啡20μg（M20组）、吗啡10μg＋纳洛酮10μg（MN组）;另外两组未致炎大鼠分别经鞘内给予生理盐水（C0组）、吗啡20μg（M0组）。各组给药均为1日2次,连续7 d。动态检测大鼠左后肢50%缩爪阈值,于给药后第8天测定痛阈后将大鼠处死,取左侧L3-4、L4-5节段背根神经节（DRG）进行免疫组织化学染色,检测DRG中EAAC1的表达。结果M10、M20两组在鞘内给予吗啡第8天形成较稳定的吗啡耐受,其DRG内EAAC1表达下调。结论DRG EAAC1参与炎性痛大鼠慢性吗啡耐受的形成机制。

慢性关节炎吗啡耐受大鼠脊髓兴奋性氨基酸转运体的变化

目的:以慢性关节炎大鼠模型为基础,通过鞘内给与吗啡时间的不同,观察脊髓背角兴奋性氨基酸转运体(EAAT)水平变化,以阐述阿片耐受的机制。方法:30只SD大鼠随机分为5组(n=6)。盐水组(S组)鞘内注入20ul生理盐水1d;吗啡1d组(M1组),鞘内注入20ug吗啡1d;吗啡3d组(M3组),鞘内注入20ug吗啡3d;吗啡5d组(M5组),鞘内注入20ug吗啡35;吗啡7d组(M7组),鞘内注入20ug吗啡7d。各组于注药后完毕后观察大鼠的行为学并取脊髓腰4-5节段,应用免疫组化法和计算机图象分析技术观察大鼠脊髓背角兴奋性氨基酸转运体。结果:随着吗啡应用时间的延长,大鼠脊髓背角兴奋性氨基酸转运体表达逐渐下降(P【0.05);缩脚潜伏期减少(P【0.05)。结论:形成关节炎吗啡耐受的大鼠脊髓背角兴奋性氨基酸转运体表达变化随着吗啡应用时间增加而减少。

腺相关病毒介导shRNA敲减小鼠海马兴奋性氨基酸转运体3动物模型的构建

目的构建敲减小鼠海马神经元兴奋性氨基酸转运体3(excitatory amino acid transporter 3,EAAT3)重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体,建立一种小鼠海马EAAT3敲减动物模型。方法基于SLC1A1(solute carrierfamily 1 member 1)基因mRNA 序列设计4条shRNA(short hairpin RNA),将其模板DNA与酶切后的AAV-GP-1(pAAV-U6-EGFP)载体质粒连接、转化并测序鉴定得到重组质粒,将重组质粒、pHelper包装质粒和pAAV-DJ辅助质粒共同转染至AAV-293细胞包装得到rAAV;用所得rAAV侵染HT-22细胞,72h后RT-qPCR检测SLC1A1mRNA表达水平;36只成年C57小鼠随机分为6组,每组6只,予海马注射rAAV-shRNA-SLC1A1-2-EGFP病毒液1μL/侧,分别于注射后即刻、24h、7d、14d、21d、28d取双侧海马组织,Westernblot检测EAAT3表达水平。结果经测序重组质粒核苷酸序列正确,包装所得病毒浓缩滴度为1×1013TU/ml;rAAV感染HT-22细胞72h后SLC1A1表达量明显降低且显著低于阴性对照(P<0.01,n=3);小鼠海马注射rAAV-shRNA-SLC1A1-2-EGFP7d后EAAT3相对表达量下降(P<0.01),注射后21d、28d表达进一步降低(P<0.01)。结论成功构建介导shRNA表达的重组腺相关病毒系统,建立了一种有效的小鼠海马EAAT3敲减动物模型。

新生小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白家族成员cDNA的克隆和分析

兴奋性氨基酸转运蛋白家族包含几种结构相似的膜蛋白,它们在终止谷氨酸的突触传递作用,维持神经系统正常的递质水平起重要作用。为了在同一物种中研究这些蛋白和基因的功能,本工作对新生小鼠脑的兴奋性氨基酸转运蛋白家族成员进行了克隆,获得了3个谷氨酸转运蛋白亚型(mGLAST-1,mGLT-1,mEAAC1)和一个中性氨基酸转运蛋白(mASCT1)的cDNA,其中在小鼠中mASCT1序列为首次发表。序列分析表明,mASCT1cDNA的长度为3787hp,编码一个532个氨基酸残基的蛋白,和人的ASCT1蛋白序列有89.3%的同源性,用非洲爪蟾卵母细胞表达系统证实了它具有转运丝氨酸的活性。同时,我们的研究表明,兴奋性氨基酸转运蛋白mRNA的5’UTR和3’UTR普遍存在组成和长度的不均一性,这种现象可能提示该家族成员的基因表达具有转录后调控机制。

兴奋性氨基酸转运蛋白2的研究进展

谷氨酸是中枢神经系统的主要兴奋性神经递质,可以启动快速的信号转导,参与学习、记忆以及突触可塑性[1]。兴奋性氨基酸转运蛋白2(excitatory amino acid transporter 2,EAAT2)是一种Na^+依赖的谷氨酸转运蛋白,主要负责清除突触谷氨酸,维持细胞外谷氨酸的稳态,以防止突触中谷氨酸的蓄积所引起的神经元兴奋性毒性[2]。本文就EAAT2的表达、结构功能及其表达调控相关机制进行综述。

鸡不同肠段碱性氨基酸转运载体mRNA表达的差异性研究

为研究肉鸡肠道不同肠段碱性氨基酸转运载体rBAT(系统b0,+)、y+LAT2(系统y+L)、CAT1(系统y+)、CAT4(系统y+)mRNA表达的差异性,以快大型黄羽肉鸡为动物模型,采集30日龄接近平均体重黄羽肉鸡的十二指肠、空肠、回肠和结直肠样品,采用相对定量RT-PCR方法研究不同肠段rBAT、y+LAT2、CAT1、CAT4mRNA表达丰度。结果显示:结直肠rBAT、y+LAT2的mRNA表达丰度极显著低于十二指肠、空肠和回肠(P<0.01),其在回肠表达丰度高于空肠、十二指肠,差异不显著(P>0.05)。结直肠CAT1 mRNA表达丰度极显著高于十二指肠、空肠和回肠(P<0.01),回肠极显著高于空肠(P<0.01),高出十二指肠27.9%(P=0.111)。结直肠CAT4 mRNA的表达丰度极显著高于其他各个肠段(P<0.01),十二指肠、空肠、回肠CAT4 mRNA的表达丰度依次降低,但相互之间无显著差异。结果表明,位于肠上皮黏膜细胞顶端的碱性氨基酸转运系统b0,+和基底部位的系统y+L转运载体mRNA的表达在肠道中的分布类似,显著区别于系统y+。

猪肠道碱性氨基酸转运载体(CAT1)mRNA表达的组织特异性和发育性变化

本研究旨在探讨不同品种猪肠道碱性氨基酸转运载体（CAT1）mRNA表达的组织特异性和发育规律。试验选取1、7、26、30、60、90和150日龄长白和蓝塘公猪各5头（同一品种同一日龄且体重接近），共70头，测体重后屠宰，采集十二指肠、空肠、回肠和结肠组织样品。以18S基因为内标，用实时荧光定量RT-PCR法（SYBR Green Ⅰ试剂盒）检测CAT mRNA在60日龄长白猪十二指肠、空肠、回肠和结肠表达的组织特异性，以及在长白和蓝塘猪不同日龄其十二指肠、空肠、回肠表达的发育性变化。结果显示：60日龄长白猪CAT1 mRNA的表达丰度从十二指肠到回肠呈逐渐升高的趋势，到结肠开始下降，回肠极显著高于其他3个肠段（P〈0．01），十二指肠最低；十二指肠和空肠CAT mRNA的表达在1～26d（即哺乳期）都呈上升的趋势，随后都开始有所下降；蓝塘猪十二指肠CAT1 mRNA的表达丰度在150d时显著低于其他各个阶段（P〈0．05），而长白猪90和150d都显著低于其他各阶段（P〈0．05）；空肠CAT1 mRNA的表达在26～150d各阶段都差异不显著，而26d显著高于1和7d（P〈0．05）；1～60d长白和蓝塘猪回肠CAT1 mRNA的表达都呈逐渐上升的趋势，60d后都显著下降（P〈0．05）。两品种猪不同日龄时十二指肠和空肠CAT1 mRNA的表达量都没有显著差异（P〉0．05）；长白猪回肠CAT mRNA表达在26d时显著高于蓝塘猪（P〈0．05）；在90和150d时，长白猪都显著低于蓝塘猪（P〈0．05），其他各阶段没有显著差异。结果说明，CAT mRNA在不同肠段及不同发育阶段的表达存在明显的差异，这可能与肠腔中氨基酸的浓度和氨基酸的需要水平及相关激素水平有关。

肠道氨基酸及氨基酸转运载体研究进展

氨基酸是肠黏膜代谢的能量来源和机体营养物质。氨基酸转运载体是将氨基酸跨膜运输的膜蛋白质。近年来的研究发现氨基酸及其转运蛋白通过调节基因表达和信号转导通路有效地调节细胞内的生理活动,而且氨基酸还是肠道炎症的新型治疗靶点等。本文将围绕近年来氨基酸代谢、氨基酸和氨基酸转运载体在信号转导中的作用、氨基酸抗炎作用及氨基酸转运载体在肠道表达等方面的研究进展进行综述。

不同蛋白质水平日粮对肥育猪肠道氨基酸转运载体CAT1mRNA表达量的影响

本试验旨在研究不同蛋白质水平日粮对肥育猪肠道氨基酸转运载体CAT1 mRNA表达量的影响。选取36头杜×长×大三元杂交阉公猪,平均体重(55.6±7.0)kg,随机分为3个处理,分别饲喂13%(低蛋白质组)、16%(对照组)和19%(高蛋白质组)的蛋白质水平日粮,每个处理12个重复(单栏饲养)。于饲喂后第45天,每组随机屠宰5头,分离肠道(十二指肠、空肠和回肠),运用Real-Time PCR技术,以β-actin为内参基因,研究CAT1 mRNA相对于β-actin的表达量。结果表明,在饲喂高蛋白质日粮时,与对照组相比,氨基酸转运载体CAT1 mRNA相对于内参β-actin mRNA的表达量,在肥育猪十二指肠、空肠和回肠中分别提高了58.4%、23.2%和24.5%,但差异不显著(P>0.05);而饲喂低蛋白质日粮时,CAT1 mRNA相对表达量在肥育猪十二指肠和空肠中则分别提高93.1%和122.6%,差异显著(P<0.05),而在回肠中降低了14.3%,差异不显著(P>0.05)。高蛋白质水平日粮对肥育猪肠道CAT1 mRNA相对表达量的影响不大,而低蛋白质水平日粮对肥育猪肠道CAT1 mRNA相对表达量的影响较大,尤其是对空肠CAT1 mRNA的相对表达量。

木聚糖酶对肉鸡肠道碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响

480只健康的1日龄父母代黄羽肉鸡随机分为A、B 2组,每组6个重复,每个重复40只鸡。A组饲喂小麦基础日粮,B组饲喂小麦基础日粮添加木聚糖酶(木聚糖酶在日粮中的含量为1.2×104U/kg)。16日龄时,各组每个重复选取2只接近平均体重的试验鸡,采集十二指肠和空肠黏膜样品,用RT-PCR的方法研究添加木聚糖酶对碱性氨基酸转运载体mRNA表达丰度的影响。结果表明,小麦基础日粮添加木聚糖酶显著增加了肉鸡空肠rBAT和CAT4 mRNA的表达丰度(P<0.05),空肠y+LAT2和CAT1 mRNA的表达丰度也有增加的趋势(P>0.05);而对回肠rBAT mRNA的表达丰度没有显著影响,回肠y+LAT2、CAT1和CAT4 mRNA的表达丰度也有增加的趋势(P>0.05)。