陕产具柄重楼的生药学研究

目的:研究陕产具柄重楼根茎的生药学特征。方法:采用形态组织学鉴别方法,研究原植物形态、生药性状和显微特征,用HPLC法测定重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总含量。结果:陕产具柄重楼原植物来源清楚。根茎显微特征:横切面有栓化表皮、皮层和显著内皮层、薄壁组织中散布周木式维管束的中柱等结构;生药粉末中含极多单粒淀粉,常见草酸钙针晶,环纹和网纹导管,较少栓化表皮细胞。HPLC法测定4种重楼皂苷的总含量达0.9%以上。结论:陕产具柄重楼来源确定、生药性状稳定,具有特定显微结构,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ总含量均达到2015版《中国药典》标准。该研究阐释了民间将具柄重楼根茎与《药典》所载中药重楼同名等效使用的合理性,为制订具柄重楼质量标准,寻求中药重楼替代资源、有效指导重楼中药材种植奠定了基础。

具柄重楼的甾体皂苷类成分研究

目的首次研究具柄重楼根茎的甾体皂苷类成分。方法采用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱等方法,从具柄重楼根茎70%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离化合物,通过波谱分析和化学手段鉴定化学结构。结果分离得到7个甾体皂苷类成分,分别鉴定为protogracillin(1)、dichotomin(2)、parisyunnanoside A(3)、saponin Th(4)、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3β,26-二羟基-(25R)-胆甾-5,17(20)-二烯-16,22-二酮-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、parispseudoside C(6)和ypsiyunnoside A(7)。结论化合物1~7均为首次从具柄重楼中分离得到,化合物5~7为重楼属植物中少见的胆甾烷醇型甾体皂苷,且化合物7的苷元具有罕见的骨架结构,为首次在重楼属植物中发现。

球药隔重楼的种下分类

为探讨球药隔重楼(Paris fargesii Franch.)种下分类构成,综合形态特征、物候期、植物化学、分子生物学和地理分布的证据,对球药隔重楼各类群进行对比分析。结果表明:球药隔重楼种下存在5个分类群,分别为球药隔重楼原变种(P.fargesii var.fargesii)、宽瓣球药隔重楼(P.fargesii var.latipetala)、短瓣球药隔重楼(P.fargesii var.brevipetalata)、大萼球药隔重楼(P.fargesii var.macrosepala)和球药隔黑斑种群,它们皆在植物形态、物候期、甾体皂苷构成和ITS序列上有一定差异,并且具有各自的地理分布范围。具柄重楼(P.fargesii var.petiolata)的物候期和甾体皂苷成分更接近于金线重楼(P.delavayi),在ITS系统发育树中聚为一支,并且二者之间存在过渡类群,故具柄重楼应移出球药隔重楼种下,作为金线重楼变种,拉丁学名为Paris delavayi var.petiolata。推测球药隔重楼种内演化顺序为短瓣球药隔重楼→宽瓣球药隔重楼→球药隔重楼原变种→大萼球药隔重楼、球药隔黑斑种群。

球药隔重楼品种整理及其混用种的真伪鉴别研究

目的:整理球药隔重楼的基原及主要混用种,研究其真伪鉴别依据。方法:根据资源调查和分类学鉴定,确定球药隔重楼的主要混用种;通过原植物形态观察、显微特征对比、甾体皂苷化学特征分析、ITS序列聚类分析等4种手段确定物种真实性鉴别特征。结果:亮叶重楼和具柄重楼为球药隔重楼的主要混用种。在形态学特征中,亮叶重楼因叶片光亮,革质,根茎细小而与正品区别,具柄重楼因药隔凸出部分棒状而与正品区别。在粉末显微特征中,球药隔重楼原变种无草酸钙针晶,草酸钙柱晶少见,仅亮叶重楼和具柄重楼淀粉粒脐点明显,且亮叶重楼脐点偏向一端而具柄重楼脐点居中,仅宽瓣球药隔重楼含环纹导管和网纹导管。甾体皂苷成分比较时发现,球药隔组均含重楼皂苷Ⅶ、Ⅵ、H,具柄重楼仅含Ⅶ、H,亮叶重楼均不含。球药隔重楼均符合2015年版中国药典含量标准,具柄重楼和亮叶重楼均不符合。ITS序列的NJ聚类树显示,亮叶重楼和球药隔重楼聚为一支,均与具柄重楼分歧明显。结论:综合原植物形态学特征、粉末显微特征、甾体皂苷化学特征、ITS序列聚类分析等4个层面的证据,可有效区分球药隔重楼及其混用种亮叶重楼和具柄重楼,该鉴别方法可应用于球药隔重楼的规范化种植、药材真伪鉴别和质量控制。