养正散结汤治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变55例临床观察

目的:观察养正散结汤治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变(PLGC)的疗效。方法:将108例CAG伴肠上皮化生(IM)和/或异型增生(Dys)的患者,随机分为治疗组55例和对照组53例,分别予养正散结汤和胃复春片治疗。结果:治疗组和对照组总有效率分别为94.5%、79.2%,Hp转阴率分别为68.97%、34.78%,两组差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后粘膜萎缩、IM、Dys均改善(P<0.05),但治疗组明显优于对照组(P<0.05)。结论:养正散结汤慢性萎缩性胃炎癌前病变有良好的治疗作用。

养正散结汤对慢性萎缩性胃炎癌前病变胃黏膜EGF、EGFR的影响

目的:观察养正散结汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)伴肠上皮化生(IM)和/或异型增生(Dys)胃黏膜EGF、EGFR的影响。方法:将108例CAG伴肠上皮化生(IM)和/或异型增生(Dys)的患者,随机分为治疗组55例和对照组53例,分别给予养正散结汤和胃复春片治疗。采用免疫组化法检测治疗前后胃黏膜EGF、EGFR的表达。结果:总有效率治疗组为94.5%,对照组为79.3%,两组总体疗效比较,治疗组优于对照组(P<0.05);两组治疗后黏膜萎缩、IM、Dys均改善(P<0.05),但治疗组明显优于对照组(P<0.05);两组治疗后黏膜EGF、EGFR蛋白表达均较治疗前下降(P<0.05),治疗组治疗后胃黏膜EGF、EGFR蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。结论:养正散结汤对慢性萎缩性胃炎癌前病变有较好的治疗作用,并且能降低胃黏膜EGF、EGFR的蛋白表达,这可能是其发挥作用的机制之一。

养正散结汤调控miR-7/EGFR表达抑制胃癌细胞增殖

目的探讨养正散结汤(YZSJD)对胃癌细胞微小RNA(miRNA)表达谱的影响及YZSJD通过调控miRNA发挥抑制胃癌细胞增殖作用可能的分子机制。方法 SD大鼠灌胃YZSJD(16.4 g·kg^(-1)),每日1次,连续7 d,制备大鼠含药血清。AGS、SGC-7901、HS-746T、MKN-45胃癌细胞给予10%YZSJD大鼠含药血清干预;miRNA芯片检测胃癌细胞的miRNA表达情况;qRT-PCR法检测胃癌细胞miR-7表达。MKN-45细胞转染miR-7 mimic、miR-7 inhibitor后,采用CCK-8法检测细胞增殖;Western Blot法检测MKN-45细胞表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达。结果 YZSJD干预后,胃癌细胞miRNA表达谱发生显著改变,促癌性miRNA发生下调,抑癌性miRNA显著上调。与对照组比较,AGS、SGC-7901、HS-746T和MKN-45胃癌细胞中药组的miR-7相对表达量显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,miR-7 mimic能够显著上调MKN-45细胞的miR-7表达,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌细胞MKN-45在转染miR-7 mimic 48,72,96 h后,细胞增殖抑制率显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05);在转染miR-7 inhibitor 72,96 h后,细胞增殖促进率显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,中药组的MKN-45细胞EGFR蛋白相对表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药复方YZSJD能影响胃癌细胞miRNA表达谱,其可能通过调节miR-7/EGFR表达发挥抑制胃癌细胞增殖的作用。

养正散结汤对人胃癌癌前病变细胞增殖、凋亡及抑癌性miRNA表达的影响

目的探讨养正散结汤对人胃癌癌前病变(PLGC)细胞增殖、凋亡及抑癌性miRNA表达的影响。方法采用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)转化的人胃黏膜上皮细胞GES-1(MC细胞)作为PLGC细胞模型,以10%浓度的养正散结汤含药血清处理MC细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR检测let-7a和miR-7的表达。结果养正散结汤组48、72 h的OD值均低于阴性对照组(P<0.01),细胞凋亡率高于阴性对照组(P<0.01);MC细胞let-7a、miR-7的表达均低于GES-1细胞(P<0.05);经养正散结汤大鼠含药血清干预后,let-7a、miR-7的表达显著上调(P<0.01)。结论养正散结汤可能通过上调抑癌性miRNA let-7a、miR-7的表达而抑制MC细胞增殖、诱导其凋亡。

养正散结汤联合放化疗治疗胃癌根治术后腹腔淋巴结转移癌临床研究

目的:探讨养正散结汤联合放化疗对胃癌根治术后腹腔淋巴结转移癌的疗效及血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:选择114例胃癌根治术后腹腔淋巴结转移癌患者,依照随机数字表法分为两组,各57例。对照组采用放化疗,观察组在对照组的基础上采用养正散结汤治疗,两组均治疗2个月。观察两组治疗前后中医临床症状评分、血清HIF-1α、VEGF水平、T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+))及NK细胞水平,比较两组临床疗效及治疗期间不良反应发生情况,随访1年,对比两组患者的总生存期(OS)与无进展生存期(PFS)。结果:两组治疗前血清HIF-1α、VEGF水平、NK、CD8^(+)、CD4^(+)水平、中医临床症状评分比较均无统计学差异(P>0.05);两组治疗后的中医临床症状评分均低于治疗前(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组血清HIF-1α水平均升高(P<0.05),且观察组更高(P<0.05);治疗后,两组的血清VEGF水平均比治疗前降低(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);治疗后,对照组NK、CD4^(+)、CD8^(+)水平均降低(P<0.05),观察组CD8^(+)水平降低(P<0.05),观察组NK、CD4^(+)水平均升高(P<0.05),且观察组NK、CD4^(+)、CD8^(+)水平均高于对照组(P<0.05);治疗4周后,观察组临床控制率比对照组高(P<0.05);两组治疗期间白细胞减少、心脏毒性、神经毒性、血小板减少、脱发等Ⅲ和Ⅳ级不良反应发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组和对照组中位PFS分别为7.12个月和5.64个月,两组PFS曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组和对照组中位OS分别为8.79个月和6.24个月,两组OS曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:养正散结汤联合放化疗治疗胃癌根治术后腹腔淋巴结转移癌患者,疗效显著,可改善机体免疫功能及血清HIF-1α、VEGF水平,延长生存时间。

养正散结汤对胃癌干细胞自我更新与分化的调控作用及机制研究

目的探讨中药复方养正散结汤(Yangzheng Sanjie decoction,YZSJD)对胃癌干细胞(Gastric cancer stem cells,GCSCs)自我更新与分化的调控作用及其作用机制。方法通过无血清悬浮培养法分离GCSCs,采用Western Blot法检测"干性"标志CD44、Oct-4、Nanog、Sox-2及相关靶基因c-Myc、Ras的蛋白表达;以细胞球连续传代实验检测GCSCs自我更新能力;采用免疫荧光法及流式细胞术检测GCSCs分化情况;采用实时荧光定量PCR法检测let-7a表达。结果分离出的球囊细胞能在无血清培养基中连续传代,与亲本细胞比较,球囊细胞"干性"标志CD44、Oct-4、Nanog和Sox-2的表达均明显升高(P<0.01);与GCSCs比较,GCSCs贴壁分化24、48、72 h后其分化标志CK18表达逐渐升高(P<0.01)。与空白对照组比较,养正散结汤组中CD44、Oct-4、Nanog、Sox-2及c-Myc、Ras蛋白表达均显著降低(P<0.01),CK18、let-7a表达均显著升高(P<0.01)。空白对照组细胞球形成率为(16.46±0.32)%,养正散结汤1.0、2.0 mg·mL^-1浓度组细胞球形成率分别为(2.83±0.85)%、(0.17±0.15)%,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论养正散结汤能上调let-7a抑制其靶基因c-Myc、Ras表达,抑制GCSCs自我更新、促进其分化,这可能是养正散结汤发挥抗癌作用的机制之一。

养正散结汤治疗胃癌术后腹腔淋巴结转移癌临床观察

目的探讨放射治疗联合中药养正散结汤治疗术后腹腔淋巴结转移癌的临床价值。方法选取2019年1月—2021年1月德州市中医院81例胃癌根治术后腹腔淋巴结转移癌患者,采用随机数字表法分为研究组(41例,接受放疗联合养正散结汤治疗)与对照组(40例,接受常规放疗),疗程均为6周;比较2组治疗前后的血管内皮生长因子(VEGF)、血清胃动素(MTL)、癌胚抗原(CEA)、D-乳酸(D-LA)、白细胞分化抗原44变异型6(CD44V6),临床疗效及治疗期间不良反应。结果治疗前,2组的VEGF、MTL、CEA、D-LA、CD44V6水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组的VEGF、CEA、D-LA、CD44V6水平低于对照组,MTL水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);研究组的客观缓解率与疾病控制率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);研究组与对照组的总不良反应率差异无统计学意义(P>0.05)。结论养正散结汤可有效降低胃癌根治术后腹腔淋巴结转移癌患者血清肿瘤标志物表达水平,促进患者胃肠功能恢复。

养正散结汤对裸鼠胃癌移植瘤生长及let-7a/c-Myc表达的影响

[目的]探讨养正散结汤抑制裸鼠胃癌移植瘤生长的作用机制。[方法]建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为阴性对照组、阳性对照组(卡莫氟组)、养正散结汤高、中、低剂量组。连续治疗3周,实验结束后处死荷瘤鼠,剥取肿瘤,称重,计算抑瘤率;免疫组化法检测肿瘤组织Ki-67蛋白表达,计算肿瘤细胞增殖指数;采用原位杂交技术检测肿瘤组织let-7a表达,免疫组化法检测c-Myc蛋白表达。[结果]养正散结汤高、中、低剂量组肿瘤重量明显小于阴性对照组,增殖指数显著低于阴性对照组;各组肿瘤组织let-7a表达显著高于阴性对照组,c-Myc蛋白表达显著低于阴性对照组。[结论]养正散结汤具有显著的抑制胃癌生长的作用,其机制可能是上调抑癌性miRNA let-7a、抑制其靶基因c-Myc蛋白表达,从而抑制胃癌细胞增殖。

养正散结汤对人胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡及ERK通路的影响

目的:探讨养正散结汤对人胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡及细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路的影响。方法:将养正散结汤组(0. 5,1,1. 5,2,2. 5,3,3. 5 g·L^-1)作用于胃癌MKN-45细胞,设置空白组,分别孵育24,48,72 h后采用细胞增殖活性检测方法(CCK-8)检测细胞增殖情况;用养正散结汤组(0. 4,0. 8 g·L^-1)处理细胞,运用平板克隆形成实验观察细胞的克隆形成能力;用4,8 g·L^-1养正散结汤干预细胞,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;用2,4,8 g·L^-1养正散结汤处理细胞,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK表达及其磷酸化水平。结果:与空白组比较,养正散结汤组能明显抑制MKN-45细胞的增殖,处理24,48 h后,养正散结汤从2 g·L^-1开始,处理72 h后,从1. 5 g·L^-1开始,细胞存活率逐渐降低,呈明显浓度依赖性(P<0. 05,P<0. 01)。经不同质量浓度的养正散结汤干预48 h后,养正散结汤组细胞克隆形成率显著低于空白组(P<0. 01),呈一定的量效关系,0. 8 g·L^-1养正散结汤干预后,MKN-45细胞集落基本无法形成;养正散结汤组细胞凋亡率明显高于空白组(P<0. 05,P<0. 01);干预12 h后,与空白组比较,养正散结汤从4 g·L^-1开始下调MKN-45细胞中ERK蛋白的磷酸化水平(P<0. 01)。结论:养正散结汤能抑制人胃癌细胞MKN-45的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与抑制ERK的磷酸化有关。