基于网络药理学探讨养血培本健脑膏对治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的探讨养血培本健脑膏对治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法利用TCMSP数据库结合文本挖掘方式,提取养血培本健脑膏的化合物组成、化合物靶点关系,利用OMIM和GeneCards网站提取“Alzheimer′s disease”“mild cognitive impairment(MCI)”“dementia”的疾病靶点,R语言V3.6.3绘制Venn图以获得交集靶点,相关信息导入Cytoscape V3.7.2以获得化合物-靶点-疾病网络;依据交集靶点,STRING网站获得蛋白互作网络,R语言V3.6.3进行GO、KEGG富集分析,并对交集靶点数最多的10种化合物进行分子对接研究;双侧海马注射β淀粉样蛋白(Aβ)25~35建立AD动物模型,并用养血培本健脑膏灌胃治疗28 d,免疫组织化学染色观察大脑海马Aβ、Bcl-2蛋白表达。结果养血培本健脑膏含有97种化合物,与疾病的交集靶点149个,靶点间存在相互作用,部分化合物可调节β淀粉样蛋白前体(APP)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1、白细胞介素(IL)-6活性;GO、KEGG富集分析发现,神经递质受体通路、G蛋白耦联胺受体、流体剪切应力与老年性硬化、糖尿病并发症AGE-RAGE通路等可能为养血培本健脑膏治疗AD的机制;动物实验显示养血培本健脑膏可改善海马CA1区神经元Aβ、Bcl-2的表达(P<0.05)。结论养血培本健脑膏治疗AD具有多靶点、多途径和多通路的特点,其治疗机制可能与MAPK1、IL-6活性有关,且与其降低海马CA1区神经元Aβ表达、提高Bcl-2表达有关。

养血培本健脑方对AD大鼠认知功能及PP2B、GSK-3β表达的影响

目的探讨养血培本健脑方对AD大鼠认知功能及PP2B、GSK-3β表达的影响。方法采用双侧海马注射Aβ_(25-35)建立AD动物模型,60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药低剂量组(0.5 mg/kg)、中剂量组(1 mg/kg)、高剂量组(2 mg/kg)、西药组(安理申1.67 mg/kg),正常组、模型组灌胃等体积生理盐水,干预28d。采用Morris水迷宫观察模型动物学习记忆能力,尼氏染色观察神经元内尼氏体形态变化,免疫荧光化学观察海马CA1区PP2B、p-GSK-3β、p-tau表达及定位,Western blot观察海马PP2B、p-GSK-3β表达情况。结果Morris水迷宫方面,中药高剂量组、西药组逃避潜伏期较模型组明显下降(P<0.01),中、高剂量组、西药组穿越平台次数均增加(P<0.01);尼氏染色方面,中、高剂量组及西药组尼氏体数量较模型组明显增加;免疫荧光方面,中药中、高剂量组、西药组PP2B表达较模型组均下降(P<0.01),中药低剂量组p-GSK-3β表达下降(P<0.05或P<0.01),中药低、中、高剂量组、西药组p-tau表达均下降(P<0.05或P<0.01);western blot方面,中药中、高剂量组及西药组PP2B表达均较模型组下降,差异均具有统计学意义(P<0.01),中药低剂量组p-GSK-3β表达下降(P<0.05)。结论养血培本健脑膏干预可抑制海马神经元PP2B、p-GSK-3β、p-tau表达,减少尼氏体丢失,改善AD模型大鼠认知功能。