硫酸乙酰肝素酶基因表达及其内切酶活性调控对肿瘤细胞浸润、转移作用的影响

硫酸乙酰肝素酶是迄今为止在哺乳动物细胞中发现的唯一可以剪切胞外和细胞表面硫酸乙酰肝素多糖侧链的葡糖苷酸内切酶.在恶性肿瘤、炎症细胞以及胚胎组织等具有侵袭性组织中有较高的表达,肿瘤病人病灶部位的肝素酶mRNA表达量越高,病人存活期越短.在正常生理条件下,肝素酶基因及其表达蛋白的活性受到启动子甲基化、变化转录剪切、转录因子、蛋白质加工、pH环境以及免疫因子释放等多种内源因素的精确调控,以防止机体非正常恶性变化的发生.目前就有关乙酰肝素酶基因表达调控、酶活性的调控机制作详尽的专述.

猪圆环病毒3型Rep蛋白的原核表达及酶活性分析

Rep蛋白对猪圆环病毒(porcine circovirus, PCV)的复制具有重要作用。为分析PCV3 Rep蛋白的核酸内切酶活性、ATPase活性和解旋酶活性,作者使用镍亲和层析法纯化相应的重组蛋白,通过优化反应条件,建立Rep蛋白酶活性的测定方法,并探究Rep蛋白关键活性位点。结果表明,Rep蛋白在体外具有核酸内切酶活性、ATPase活性和解旋酶活性。当蛋白浓度为1.6μmol·L^(-1),Mg^(2+)浓度为1.0 mmol·L^(-1),37℃反应75 min时其ATPase活性达到最佳。当蛋白浓度为7μmol·L^(-1),Mg^(2+)浓度为12.5 mmol·L^(-1),37℃反应60 min时其解旋酶活性达到最佳。Y89为Rep蛋白核酸内切酶活性的关键位点,K173、D210、N250为ATPase活性和解旋酶活性的关键位点。本研究建立了PCV3 Rep蛋白酶活性分析的方法,初步揭示了该蛋白的主要功能位点,为Rep蛋白的功能研究以及基于Rep蛋白活性的抗病毒药物研究奠定了基础。

Argonaute家族与肿瘤的研究进展

Argonaute家族是一类序列高度保守的蛋白质。分子量约为100kda，与非编码小RNA（如miRNA，siRNA，piRNA等）紧密相关。该蛋白家族均具有特征性的位于序列中间呈月牙形的PAZ（取名于3个主要的Ago蛋白质。即Piwi、Ago和Zwille）结构域和位于C末端的具有潜在RNaseH核酸内切酶活性、作为RNA诱导沉默复合体（RNA-induced silencing complex。RISC）酶切割活性中心的PIWI结构域。

TSA可能通过抑制APE1BER功能增强顺铂的肺腺癌细胞毒性

目的探讨曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对顺铂诱导的细胞毒性的影响。方法给予0、250、500 nmol/L TSA预处理A549细胞24 h后,分别联合0、5、10、15μmol/L顺铂处理A549细胞24 h后,通过0、0.5、1、2μmol/L APE1 InhibitorⅢ调控APE1 BER功能,应用CCK-8方法检测细胞增殖率,AP内切酶活性实验检测APE1 BER功能,通过流式细胞仪检测细胞凋亡水平,immunoblot检测γ-H2AX表达水平。结果 TSA联合顺铂处理A549细胞明显增强顺铂的细胞增殖抑制,并促进顺铂诱导的细胞凋亡;随着TSA浓度的升高APE1内切酶活性逐渐减弱,TSA联合顺铂促进顺铂诱导的γ-H2AX表达;利用inhibitorⅢ抑制APE1内切酶活性,促进顺铂诱导细胞增殖抑制和凋亡水平。结论TSA可能通过抑制APE1BER功能增强顺铂诱导的细胞毒性反应。

Rrp44和SMG6在mRNA降解中的研究进展

介绍了有关Rrp44和SMG6核酸内切酶活性在mRNA中的最新研究进展,包括Rrp44与SMG6的内切酶活性在mRNA降解中的作用,以及它们的PIN结构域与核酸内切酶活性。

奥马曲拉对慢性心绞痛有效

据2005年6月号The American Journal of Cardiology报道，具有中性肽链内切酶抑制活性的在研ACE抑制剂奥马曲拉（omapatrilat）能安全且有效改善慢性心绞痛患者的运动持续时间。