G蛋白耦联的内向整流型钾通道4基因多态性与新疆维吾尔族人群血脂异常的相关性

目的研究G蛋白耦联的内向整流型钾通道4(GIRK4)基因多态性与新疆维吾尔族血脂异常的相关性。方法采用TaqmanPCR方法,对GIRK4基因rs2604204、rs4937391、rs6590357、rs11221497多态性在维吾尔族自然人群中进行基因分型,按常规方法测定血脂水平并进行比较分析。结果 50岁以下人群中,三酰甘油异常组和正常组rs6590357位点的基因型分布差异有统计学意义(P=0.005),总胆固醇异常组和正常组rs11221497位点的基因型分布差异有统计学意义(P=0.011)。采用Logistic回归方法校正性别、肥胖等因素后,50岁以下人群中rs6590357位点与TG异常、rs11221497位点与TC异常仍然为阳性关联。rs6590357位点CT+TT基因型组中TG水平明显高于CC组(P=0.014),rs11221497位点CC基因型组中TC水平明显高于CG+GG组(P=0.006)。对其进行单体型分析后发现,H3单体型频率在TG异常组与正常组间差异有统计学意义(P=0.007)。结论 GIRK4基因rs11221497和rs6590357位点多态性可能与新疆维吾尔族血脂异常相关。

G蛋白激活的内向整流型钾通道4基因研究进展

G蛋白激活的内向整流型钾通道4(GIRK4)是G蛋白偶联内向整流型钾通道家族成员之一,由KCNJ5编码,广泛分布于哺乳动物心、脑等组织器官。近年研究发现,GIRK4基因异常表达与心房纤颤相关,而且可能与肥胖、代谢综合征等众多其他临床疾病的发生、发展密切相关,阐明GIRK4基因在临床疾病中的病理生理机制对探讨一些临床疾病新的诊治思路具有重要的开拓性意义。

开郁颗粒对抑郁大鼠模型海马区G蛋白偶联的内向整流型钾通道(GIRK1)mRNA表达的影响

目的:研究慢性不可预见性应激及孤养结合所致抑郁大鼠海马区G蛋白偶联的内向整流型钾通道(GIRK1)mRNA表达的影响。方法:经过21d慢性应激后,观察大鼠行为学改变,用原位杂交的方法测定抑郁大鼠海马CA1、CA3区GIRK1 mRNA表达。结果:慢性应激后,应激大鼠出现同抑郁患者相似的行为改变;开郁颗粒各组大鼠GIRK1 mRNA CA1、CA3区的表达明显与对照组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:慢性不可预见性应激同孤养结合可建立较稳定的抑郁症模型;慢性应激可以使抑郁大鼠海马区GIRK1表达下降,而开郁颗粒则可明显增加GRIK1mRNA在海马区的表达。

延边地区朝鲜族ADP-核糖基化样因子15基因和内向整流通道蛋白J亚单位11号成员基因的基因单核苷酸多态与2型糖尿病的相关性

[目的]探讨ADP-核糖基化样因子15基因(ARL15)和内向整流通道蛋白J亚单位11号成员基因(KCNJ11)的单核苷酸多态(SNP)位点rs26770、rs5219与延边地区朝鲜族2型糖尿病(T2DM)的相关性.[方法]采用病例对照设计,选择延边地区朝鲜族307例,其中T2DM患者255例、糖耐量正常(NGT)人52例.利用单碱基延伸方法检测rs26770、rs5219的基因型.[结果]在显性遗传模型中,T2DM组KCNJ11基因携带rs5219位点的TT+CT基因型频率显著高于NGT组(P=0.001,OR=2.917, 95%CI:1.531~5.558);2个SNPs联合作用结果显示,T2DM组携带AA-CC和AG-CC联合基因型明显小于NGT组(P=0.008,OR=0.320, 95%CI:0.133~0.770;P=0.012,OR=0.357,95%CI:0.156~0.817).[结论]KCNJ11基因rs5219-T可能是延边地区朝鲜族人群罹患T2DM的易感因子,而携带KCNJ11和ARL15基因SNPs rs26770、rs5219的联合基因型AA-CC和AG-CC可能具有保护健康人群罹患T2DM的作用.

基于弹性和复杂网络模型的内向整流型钾通道Kir3.2的动力学及关键位点研究

内向整流型钾通道蛋白Kir3.2能够调节钾离子的跨膜流动,具有重要的生理功能。由于其与神经和心肌系统的疾病相关,因此是一个重要的药物靶点。为研究该通道的动力学和功能性关键位点,我们首先利用高斯网络模型(GNM)对该通道进行建模,分析其结构的柔性,及各功能区域间的运动相关性;然后,构建运动相关性加权的复杂网络模型,通过依次敲除节点获得网络特征路径长度的变化来识别关键位点。结果发现,GNM重现了通道各区域的柔性;界面螺旋、跨膜螺旋和CTD区域间存在显著的运动正相关,这促进了通道与配体的结合和结构的稳定;所识别的关键残基对通道的激活、结构的稳定和变构信号交流起重要作用。本工作有助于加强对Kir3.2通道工作机制的理解,所识别的功能位点可为药物设计提供有价值的信息。

钾通道与2型糖尿病及遗传性高胰岛素血症

TP敏感的钾通道 (KATP)是将细胞膜电活动与细胞物质代谢联系在一起的重要通道 ,该通道是由磺酰脲受体 (SUR)和内向整流钾通道 (Kir6 .x)两种亚单位组成。SUR和Kir6 .2基因的突变可引起KATP通道对ATP、ADP Mg2 +敏感性的改变 ,引起KATP通道的活动性低下 ,从而导致遗传性高胰岛素血症 ;SUR1和Kir6 .2基因的突变及多态性还可能与 2型糖尿病 (T2DM)相关 ,其原因可能是SUR1基因变异导致高胰岛素血症 ;对不同人群的研究发现 ,SUR1基因的多态性与T2DM之间存在相关性 ,但各人群之间SUR1基因与T2DM相关的位点存在不一致性。

白香丹胶囊对愤怒情绪模型大鼠海马GABABR和KIR表达的影响

目的检测愤怒情绪模型大鼠海马γ-氨基丁酸B受体两个亚基GABABR1、GABABR2和内向整流型钾通道(KIR)表达的变化,初步探讨白香丹胶囊对肝气逆证的中枢干预机制。方法大鼠随机分为正常对照组、模型组、白香丹胶囊组(0.2 g·kg-1)、巴氯芬组(0.008 g·kg-1),采用"社会隔离结合居住入侵"方法制备愤怒情绪大鼠模型,药物组按相应剂量灌胃给药7 d,每日1次。通过糖水偏好实验、旷场实验和高架十字迷宫实验进行模型评价,用免疫荧光化学法检测各组大鼠海马GABABR1、GABABR2和KIR的表达。结果与正常对照组比较,模型组糖水偏好系数降低,旷场实验得分增高,高架十字迷宫实验进入开放臂次数百分数(OE%)和开放臂停留时间的百分数(OT%)降低,海马GABABR1、GABABR2和KIR表达水平降低P<0.05;与模型组比较,白香丹胶囊组和巴氯芬组旷场实验得分降低,OE%和OT%值升高,海马GABABR1、GABABR2和KIR表达水平升高(P<0.05)。结论大鼠愤怒情绪的产生可能与海马GABABR1、GABABR2和KIR表达降低有关,白香丹胶囊平肝理气的中枢机制可能与其激活海马GABABR及其G蛋白偶联的KIR有关。

4种5-HT_4受体激动剂对大鼠心肌I_(K1)通道的影响及促心律失常风险比较

目的比较4种5-羟色胺4型(5-HT4)受体激动剂西沙必利(cisapride),扎考必利(zacopride),莫沙必利(mosapride)和2[1-(4-胡椒基)哌嗪]基苯并噻唑{2-[1-(4-Piperonyl)piperazinyl]benzothiazole,BZTZ}对大鼠心室肌细胞膜内向整流钾通道(IK1)功能和蛋白表达的影响,并观察其对大鼠离体心脏心律的影响,从而评估其致心律失常的风险。方法应用全细胞膜片钳技术分别观察4种激动剂对胶原酶分解的成年SD大鼠心室肌细胞膜IK1和HEK293细胞异源表达的Kir2.1通道电流的影响。应用免疫印迹法检测4种激动剂孵育大鼠心室肌细胞24 h后IK1主要亚单位Kir2.1通道蛋白表达的变化。将麻醉大鼠的心脏取出进行Langendorff主动脉逆行灌流,分别观察4种激动剂给药30 min内离体心脏节律的变化,全程记录心电图。结果在大鼠心室肌细胞,BZTZ,西沙必利和莫沙必利0.1~10μmol·L-1可浓度依赖性地抑制IK1。在相同浓度(1μmol·L-1)时,BZTZ对IK1的抑制效应最强(P<0.01),其次为西沙必利,莫沙必利最弱。扎考必利可激动IK1(P<0.01)。在Kir2.1重组质粒转染HEK293细胞,扎考必利激动Kir2.1通道电流(P<0.01),而莫沙必利无明显影响。在大鼠离体心脏,BZTZ和西沙必利1μmol·L-1可引起严重的心律失常,期前收缩数分别达到159±28和(61±13)次(P<0.01),室速发生率分别为50%(P<0.05)和25%,室颤发生率分别为37.5%和12.5%。莫沙必利和扎考必利对心律均无明显影响,不引起心律失常的发生。扎考必利还可抑制西沙必利和BZTZ诱发的心律失常。4种激动剂的促心律失常风险等级依次为BZTZ>西沙必利>莫沙必利和扎考必利。结论 IK1可能作为5-HT4受体激动剂致心律失常副作用的独立风险因子和筛选安全5-HT4受体激动剂和促胃肠动力药的新靶点。

内向整流钾通道6．2基因E23K多态性与2型糖尿病表型及格列齐特降糖疗效的关系

研究内向整流钾通道6.2(Kir6.2)基因E23K多态性对2型糖尿病临床表型及格列齐特降糖疗效的影响。结果提示K/K纯合子患者的血肌酐水平高于其它基因型患者(P<0.01),E23K多态性不影响格列齐特的降糖疗效。

BKCa通道的舒血管机制

血管平滑肌（VSM）细胞和内皮细胞（EC）都表达K^＋通道，微血管平滑肌细胞至少表达4种不同类别的K^＋通道，内向整流性钾通道[inward rectifier K^＋（KIR）channel]；ATP敏感性钾通道[（ATP—sensitive K^＋（KATP）channel]；电压门控式钾通道[vohage—gated K^＋（Kv）channel]；大电导钙激活钾通道[the large conductance，Ca^2＋-activated K K^＋（MaxiK，BKCa）channel]。

甜菜内向整流K^+通道BvAKT1基因RNAi载体的构建

植物细胞质中维持较高的K+/Na+是植物抵御盐胁迫的有效策略之一。内向整流K+通道AKT1(Arabidopsis K+transporter)在这一过程中发挥着重要作用。本研究以嗜盐作物甜菜(Beta vulgaris L.)幼苗为材料,提取其根总RNA,采用RT-PCR方法扩增得到甜菜K+通道BvAKT1基因的RNAi靶片段,以中间载体pHANNIBAL和植物表达载体pART27为基础,采用酶切和连接的方法构建了由CaMV 35S启动子驱动、含BvAKT1基因片段反向重复序列的RNAi (RNA interference)植物表达载体pART-BvAKT1-RNAi,采用冻融法将其分别导入根癌农杆菌GV3101和发根农杆菌LBA9402,对揭示BvAKT1在甜菜K+吸收及离子稳态平衡中的作用研究具有推动作用。

饮食诱导肥胖大鼠模型下丘脑、胰、肝脏G蛋白耦联的内向整流型K离子通道蛋白4的表达

目的研究饮食诱导的肥胖大鼠模型下丘脑、肝、胰等组织器官中G蛋白耦联的内向整流型K离子通道蛋白4（GIRK4）的表达。方法30只SD大鼠按随机数字表分两组，肥胖大鼠组（20只，高脂高糖饮食构建肥胖大鼠模型）和正常对照组（10只，正常饮食）。建模成功处死两组大鼠后分离下丘脑、肝、胰等组织器官，提取蛋白，Western免疫印迹检测GIRK4表达。对肥胖大鼠组与正常对照组大鼠体质量、体长、脂肪系数等指标进行分析比较。结果肥胖大鼠组大鼠体长、体质量、脂肪系数显著高于正常对照组雌：（22．00±0．71）比（20．80±-0．45）cm,，（289．10±29．06）比（239．60±10．08）g，（3．47±1．54）比（1．14±0．56）；雄：（26．32±0．87）比（24．80±0．84）cm，（432．00±28．14）比（352．00±37．37）g，（3．20±0．56）比（1．11±0．27）；均P〈0．05]，但下丘脑、肝、胰脏的GIRK4表达却显著低于正常对照组（P〈0．05）。结论大鼠下丘脑、肝脏、胰脏较高表达的GIRK4可能与脂肪代谢、饮食诱导型肥胖的发生有关。

果蝇的内向整流型钾离子通道(英文)

内向整流型钾离子通道(Kir)是一类特殊的钾离子选择性通道,具有内向整流性,即钾离子内流较外流容易得多。这类离子通道介导许多细胞功能,包括维持静息膜电位,维持钾离子平衡稳态以及调节细胞代谢水平。由于哺乳动物中存在15个Kir基因,目前在单个离子通道突变动物中进行的遗传学研究可能因为基因冗余而未能揭示这类通道的许多重要生理功能。这一问题可通过使用简单模型动物来解决,比如整个基因组只含3个Kir基因的果蝇。在果蝇上开展的成熟的遗传学研究方法还可为发现更多的Kir通道调控机制提供有力的工具。因此在这里我们综述了果蝇Kir离子通道的研究进展。对果蝇Kir通道的了解将会引导我们发现人类Kir通道的新的功能及调控机制,并有助于相关疾病的病理学研究。

皮质激素受体在抑郁大鼠海马GIRK_(1-4) mRNA调控中的作用

目的 :侧脑室给予螺内酯和 (或 )米非司酮 ,观察大鼠海马 G蛋白偶联内向整流钾通道 1- 4 (GIRK1 - 4) m RNA的表达 ,初步探讨皮质激素受体在调控 GIRK m RNA中的作用。方法 :雄性 SD大鼠 ,随机分为 9组 (每组 5只 ) :对照组 (CON) ,生理盐水组 (NS) ,螺内酯组 (SPI) ,米非司酮组 (MIF) ,SPI+MIF组 ,抑郁 (DEP) +NS组 ,DEP+SPI组 ,DEP+MIF组 ,DEP+SPI+MIF组。用地高辛 (DIG)标记的 GIRK1 - 4c RNA探针进行原位杂交 ;切片贴于涂有铬矾明胶的载玻片上 ,37℃烘箱中过夜。常规脱水 ,透明 ,中性树胶封片。利用 L eica图像分析系统测定海马各区 GIRK1 - 4m RNA杂交阳性信号的平均灰度。使用SPSS进行统计学分析。 结果 :与 CON组相比 ,DEP+NS组海马 CA1- 3区和齿状回 GIRK1 - 4m RNA表达均明显下降 ;与DEP+NS组相比 ,DEP+SPI组和 DEP+SPI+MIF组海马各区 GIRK1 - 4m RNA表达均明显升高 ,DEP+MIF组变化不显著 ,SPI组、MIF组和 SPI+MIF组与 NS组相比 ,GIRK1 - 4m RNA表达无明显差异 ,表明 SPI和 MIF本身对正常大鼠 GIRK表达的影响不明显。 结论 :糖皮质激素受体通过与 GIRK1 中的糖皮质激素受体反应元件结合 ,使 GIRKs m RNA在海马的表达增加 ,皮质酮通过海马的 5 - HT1 A受体增加 GIRKs通道的通透性 。

严重烫伤延长大鼠心室肌细胞动作电位时程的机制

严重烫伤引起心肌细胞动作电位时程(action potential duration,APD)延长,通过加重烫伤心肌细胞钙紊乱和诱发室性心律失常,促进烫伤心功能障碍的发生,但APD延长的机制尚不清楚。通过制作约40%体表面积(total body surface area,TBSA)III度烫伤大鼠模型,在伤后12h大鼠心功能明显减弱时分离其心肌细胞,采用膜片钳技术观察心肌细胞APD以及动作电位复极化相关的重要离子通道电流,包括瞬间外向钾电流(transient outward K+ current,Ito),L-型钙电流(L-type Ca2+ current,ICa-L)和内向整流钾电流(inward rectifier K+ current,IK1)。结果显示,烫伤后12h单个心肌细胞APD明显延长,APD50和APD90在烫伤组分别为(46.02±3.78)ms、(123.24±12.48)ms(n=19),明显长于对照组的(23.28±4.85)ms、(72.12±3.57)ms(n=17)(P<0.01)。烫伤引起Ito电流密度降低,+60mV下烫伤组的电流密度(20.39±1.98)pA/pF(n=25)明显低于对照组的(34.15±3.78)pA/pF(n=20,P<0.01);烫伤组在?120至?80mV电压刺激下所产生的IK1电流密度显著低于对照组;而两组之间ICa-L电流密度、电压依赖性的激活和失活无显著性差异。结果提示,烫伤引起心肌细胞APD延长的机制与瞬间外向钾通道和内向整流钾通道功能下调有关。

微动脉平滑肌细胞K^+通道的研究进展

K+通道维持着血管平滑肌细胞的静息膜电位。目前发现血管微动脉平滑肌细胞上主要表达内向整流型K+通道、ATP敏感型K+通道、电压依赖型K+通道和大电导钙激活型K+通道等四种K+通道。本文对微动脉平滑肌细胞K+通道最新进展做一综述。

GIRK1在宫颈癌组织细胞中的表达

探求内向整流型钾离子通道1(GIRK1)与宫颈癌发生发展的关系。利用RT-PCR及免疫组织化学技术检测GIRK1mRNA及蛋白在15例正常宫颈和30例宫颈癌组织细胞中的表达。GIRK1mRNA在宫颈癌组织中的表达高于在正常宫颈组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.01);GIRK1蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率为100%,在正常宫颈组织中的阳性表达率为20%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。GIRK1mRNA及蛋白在宫颈癌组织中呈高表达,可能与宫颈癌的发生及发展有关。

猪新基因KCNJ12编码区电子克隆、RT-PCR验证和组织表达分析

通过NCBI下载猪近缘物种的KCNJ12基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列、参考基因组序列和高通量基因组序列。利用Lasergene软件电子克隆猪KCNJ12基因编码区序列及部分侧翼序列。针对编码区设计特异引物并以版纳微型猪近交系BMI为研究材料进行试验验证,同时应用半定量RT-PCR技术对BMI 31种重要组织进行了表达分析。研究获得了猪KCNJ12 1 290 bp的编码区序列(GenBank登录号:KC505155,对应的氨基酸登录号:AGK36093)。生物信息学分析表明,该基因编码429个氨基酸,预测的蛋白质分子量(Mw)为48.63 kDa,等电点(pI)为5.66。蛋白质结构分析显示,KCNJ12存在2个保守域,3个跨膜结构域,无信号肽;疏水性分析表明其N端和C端均具有亲水性;亚细胞定位显示,该蛋白位于细胞质的概率是94.1%。系统进化分析表明,猪与牛、羊的亲缘关系最近。组织表达分析表明,KCNJ12基因在31个被检组织中存在明显的表达差异,在小脑中高表达;在肌肉、结肠、盲肠、食管、皮肤、大脑、下丘脑及脊髓中中度表达;在胸腺、肝、直肠及脑干中低表达;在颌下腺、睾丸、甲状腺、附睾、肺、心、脾、肾上腺、淋巴结、肾、胰脏、十二指肠、空肠、回肠、胃、垂体、松果体及舌下腺中不表达。研究结果为该基因在猪中的功能研究提供依据。