内毒素结合肽P1和P2抗内毒素活性的实验研究

目的研究基于脂多糖(lipolysachride,LPS)结合蛋白的新型内毒素结合肽P1和P2的抗内毒素活性。方法设计并合成内毒素结合肽P1和P2。体外实验取一名健康志愿者静脉血100ml分离的外周血单个核细胞(PBM),分为正常对照组、LPS组、阳性对照组LPS(1mg/L)+多黏菌素B(12.5mg/L)、P1组LPS(1mg/L)+P1(2mg/L,5mg/L,12.5mg/L)、P2组LPS(1mg/L)+P2(2mg/L,5mg/L,12.5mg/L)。ELISA方法检测各组上清液中TNF-α和IL-6的浓度。体内实验将40只昆明小鼠平均分为四组,每组10只,分别为空白对照组、LPS模型组、LPS+P1治疗组和LPS+P2治疗组。取各组小鼠肺脏和肝脏组织制作HE切片,观察组织形态学变化。结果 (1)与1mg/L LPS比较,1mg/L LPS+12.5mg/L的P1以及1mg/L LPS+3种浓度P2刺激后,PBMC培养上清液中IL-6及TNF-α的水平均明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.01),12.5mg/L的P2与阳性对照PMBC作用后上清液中TNF-α浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)组织形态学显示,模型组小鼠肝小叶中央静脉及肝窦扩张充血,肝细胞浊肿,偶见肝细胞嗜酸性变及点状坏死。肺间质充血水肿,灶性出血,肺泡腔狭小。10mg/kg P1处理组肝细胞浊肿较模型组减轻,肺间质充血水肿减轻。10mg/kg P2处理组,肝小叶中央静脉及肝窦充血程度减轻,肺间质充血水肿明显减轻。结论体内外实验表明合成内毒素结合肽P1和P2对LPS导致的机体损伤具有拮抗作用。体外实验结果还表明,12.5mg/L P2对TNF-α或IL-6的释放抑制作用较为肯定。