热休克蛋白A12A对内毒素血症肝损伤的作用及机制研究

目的:研究热休克蛋白A12A(heat shock protein A12A,HSPA12A)对内毒素血症肝损伤的影响及机制。方法:(1)采用脓毒症小鼠肝组织RNA测序的公共数据库,以生物信息学手段分析Hspa12a和多种载脂蛋白的mRNA表达变化。(2)采用6~8周龄Hspa12a基因敲除(Hspa12a knockout,Hspa12a-/-)鼠和野生型(wild type,WT)鼠,腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)5 mg/kg诱导内毒素血症,以生理盐水(normal saline,NS)注射小鼠为对照组,分为NS-WT组、NS-Hspa12a-/-组、LPS-WT组和LPS-Hspa12a-/-组;LPS作用6 h后,收集肝组织,HE染色观察肝脏组织病理变化;免疫印迹和RT-PCR分析其中HSPA12A、ApoA1、ApoB、ApoM表达水平;分离血清,测定肝功能标志物丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平以及高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平。(3)WT鼠原代肝细胞过表达Hspa12a后,使用LPS(500 ng/mL)作用于肝细胞模拟内毒素血症肝损伤模型,6 h后检测肝细胞培养上清的ALT和AST水平。(4)根据是否发生脓毒症肝损伤将患者分为脓毒症肝损伤组和对照组,比较两组患者ALT、AST、HDL-C和LDL-C的差异。结果:(1)生物信息学分析显示,脓毒症小鼠肝脏Hspa12a、Apoa1、Apob和Apom的m RNA表达下降。(2)与NS-WT组相比,LPS-WT组肝组织出现明显损伤(P<0.001)、炎症病灶数量增多(P<0.01)、血清ALT(P<0.05)和AST(P<0.01)升高,同时肝组织中HSPA12A表达显著下降(P<0.05);而与LPS-WT组相比,LPS-Hspa12a-/-组肝脏病理变化更严重(P<0.05)且血清ALT(P<0.01)和AST(P<0.05)水平升高,HDL-C和LDL-C水平下降(P<0.01),肝组织载脂蛋白(ApoA1、ApoB、ApoM)表达降低(P<0.05,P<0.01)。(3)体外实验中LPS作用使肝细胞培养上清中ALT和AST水平升高(P<0.001),而过表达Hspa12a能够减轻LPS作用引起的ALT和AST水平升高(P<0.01)。(4)临床数据显示,出现脓毒症肝损伤的患者血浆中ALT和AST水平相比对照组显著升高(P<0.001),HDL-C和LDL-C水平显著下降(P<0.001)。结论:内毒素血症导致肝脏HSPA12A表达下调,其介导了内毒素血症肝损伤的发生,过表达Hspa12a能够保护内毒素血症引起的肝损伤,该作用可能与维持肝脏载脂蛋白及脂蛋白稳态有关。

大承气汤对急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症生物学效应的阻断作用

目的:观察大承气汤对急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症生物学效应的阻断机制及作用。方法:取W istar大鼠30只随机分为3组,正常对照组(A组),大承气汤治疗组(B组),急性肝损伤模型组(C组),每组各10只。B、C两组大鼠均以皮下注射硫代乙酰胺(TAA)600mg/kg造模。A组大鼠给予生理盐水灌胃。B组大鼠于造模前2天开始以大承气汤灌胃,直至造模成功后3天。处死大鼠取肝脏行病理学检测及免疫组化检测,并测定血浆内毒素和肿瘤坏死因子(TNF-α)、血清ALT、TB il水平。结果:与A组相比,C组大鼠血浆内毒素、TNF-α、血清ATL、TB il明显升高(P<0.05)。经大承气汤治疗后,其血浆内毒素、TNFα-、血清ALT、TB il明显降低(P<0.05)。肝脏病理检测结果显示,C组大鼠肝细胞呈弥漫性大片状坏死,肝窦结构被破坏,汇管区可见大量炎症细胞浸润,B组大鼠肝脏病理改变明显减轻。免疫组化结果显示,C组大鼠肝组织可见核因子-κB及CD14明显活化。与C组相比,B组核因子-κB及CD14活化明显减弱。结论:急性肝损伤大鼠肝组织中核因子-κB及CD14活化明显,大承气汤对急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症生物学效应具有阻断作用。

真菌血症50例微生物学及临床分析

近年来由于机会致病菌的医院感染包括真菌感染有增加的趋势，因而真菌血症也有增加的趋势。鉴于此，我们对50例真菌血症，从微生物学及临床进行分析，现报道如下。

清肠祛浊汤治疗肝硬化肠源性内毒素血症的临床效果及机制探讨

目的探讨清肠祛浊汤治疗肝硬化肠源性内毒素血症的效果及潜在机制。方法102例肝硬化肠源性内毒素血症患者,根据随机数字表法分为观察组、对照组1和对照组2,每组34例。三组患者均接受21 d常规临床治疗,对照组2患者加用乳果糖治疗,观察组加用清肠祛浊汤结肠滴注治疗。比较三组患者治疗效果及治疗前后血浆内毒素(ET)、血清炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果观察组患者的治疗总有效率为94.12%,显著高于对照组1的61.76%、对照组2的73.53%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,三组患者血浆内毒素水平均较本组治疗前显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者血浆内毒素(0.18±0.06)EU/ml低于对照组1的(0.37±0.09)EU/ml、对照组2的(0.29±0.08)EU/ml,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,三组患者血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平均较本组治疗前下降,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者血清IL-1β、IL-6和TNF-α分别为(50.08±15.31)、(79.22±24.76)、(9.89±3.26)pg/ml,显著低于对照组1的(77.80±29.84)、(180.89±50.25)、(24.56±8.76)pg/ml和对照组2的(78.41±25.31)、(147.85±13.80)、(18.79±7.09)pg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论清肠祛浊汤治疗肝硬化肠源性内毒素血症具有明显的临床效果,可以显著降低患者血浆内毒素和血清炎症因子水平,为疾病的治疗提供参考和理论依据。

泛细菌成分血症与多脏器危像、机体损伤反应综合症——“广义生命时空场论”学说下对“内毒素血症”生物学机制重新探索

目的 旨在重新评价“内毒素血症”基础之上 ,引入“泛细菌成分血症”等概念。方法 通过例举孔蛋白“porins”、多肽糖“peptidoglycan”、脂蛋白、磷脂壁酸“lipoteichoic”、DNA等细菌其它成分在感染性疾病、败血症休克等发病作用的分析 ,以及对内毒素血症 (脂多糖 )的概念本质之评价 ,提出了使用“泛细菌成分血症”之理由。结果 “内毒素血症”的概念显然过时 ,应推荐使用“泛细菌成分血症”的概念。结论 “泛细菌成分血症”是取代“内毒素血症”的一个最佳名词。按照“广义生命时空场”学说 ,本文认为“泛细菌成分血症”与“多脏器危像综合征”均是“机体损伤反应综合症”之临床不同的过程表现。本文还简述了“广义生命时空场”学说 ,并首次提出了“泛细菌成分血症”(含内毒素 )在多脏器危像。

微生态调节剂治疗重型肝炎内毒素血症的研究进展

肠源性内毒素血症是慢性重型肝炎发生和发展的重要机制之一。各种微生态制剂可调整肠道失调菌群,从而降低血清内毒素水平,减少并发症和降低病死率,对慢性重型肝炎有明显的治疗作用。

微生态制剂治疗肝衰竭内毒素血症的研究进展

肠源性内毒素血症(intestinal endotoxemia,IETM)是肝衰竭发生和发展的重要机制之一,而肝衰竭时肠道菌群失调,肠屏障功能不全造成了IETM.各种微生态制剂可调节肠道菌群失调,抑制G-杆菌过度繁殖,从而降低血清内毒素水平,减少并发症和降低病死率,对肝衰竭有明显的治疗作用,已成为改善肝衰竭内毒素血症的研究热点.但各种微生态制剂的联用疗效及与抗生素的配伍问题均值得临床医生的关注.本文就微生态制剂的种类、作用机制、联合应用以及与抗生素的配伍问题作一综述.

肥胖相关代谢性内毒素血症对精子畸形率的影响因素分析

目的探讨肥胖人群的代谢性内毒素血症对精子畸形率影响的高危因素分析。方法选取2021年1~12月就诊的畸形精子症患者453例作为观察组,选取同期精子畸形率正常人员231例作为对照组。检测身高、体重、血清人连蛋白(Zonulin)、血清脂多糖结合蛋白(LBP)、人精液弹性蛋白酶(Elastase)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)、精子畸形率。采用多因素Logistic回归分析法、Pearson相关分析法探究肥胖人群相关的代谢性内毒素血症对精子畸形率影响的高危因素。结果观察组肥胖率显著高于对照组(72.4%∶25.1%,χ^(2)=8.231,P=0.009);观察组8OHdG异常率高于对照组(73.5%∶19.9%,χ^(2)=5.964,P=0.018);观察组Zonulin异常率显著高于对照组(79.7%∶8.2%,χ^(2)=9.635,P=0.002);观察组LBP异常率高于对照组(69.3%∶29.4%,χ^(2)=7.524,P=0.013);观察组雌二醇(E2)异常率高于对照组(43.5%∶10%,χ^(2)=6.954,P=0.019);在年龄、Elastase、FSH、LH、TT等观察指标方面,2组差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示,BMI(OR=5.984,P=0.004)、8OhdG(OR=3.521,P=0.001)、Zonulin(OR=3.241,P=0.017)、LBP(OR=5.511,P=0.001)、E2(OR=4.671,P=0.026)是影响精子畸形率的高危因素。BMI与Zonulin、LBP、8OhdG、E2存在相关关系(P<0.05)。结论肥胖可诱发代谢性内毒素血症,肠道通透性的增加以及内毒素水平的升高可造成全身炎性反应,诱导氧化应激的出现。由氧化应激造成白细胞释放的活性氧将会造成精子畸形率升高。因此,肥胖诱导的代谢性内毒素血症可引起Zonulin、LBP、8OHdG、E2升高,它们是影响精子畸形率的高危因素。

微生态制剂联合莫沙必利治疗肝硬化患者内毒素血症的临床研究

目的研究微生态制剂联合莫沙必利治疗肝硬化患者内毒素血症的疗效及肝功能变化。方法 76例肝硬化患者行葡萄糖-氢呼气试验(GHBT)检测小肠细菌过度生长情况,选择GHBT阳性的肝硬化患者予微生态制剂联合莫沙必利治疗12周,治疗前后检测血浆内毒素水平、白细胞介素2(IL-2)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;分析经治疗前后血浆内毒素与IL-2、IL-6、TNF-α的关系,观察肝功能变化。结果 76例肝硬化患者中,22例患者GHBT为阳性(28.9%)。肝硬化伴小肠细菌过度生长者治疗前后血浆内毒素分别为(0.735±0.214)EU/L、(0.384±0.227)EU/L(P<0.05);IL-2分别为(19.57±4.40)ng/L、(9.61±6.28)ng/L;IL-6分别为(94.37±26.12)ng/L、(52.83±27.95)ng/L;TNF-α分别为(43.15±16.27)ng/L、(26.41±17.67)ng/L(均P<0.05);肝硬化GHBT阳性患者血浆内毒素与IL-2、IL-6、TNF-α呈直线正相关,相关系数分别为0.875、0.846、0.827,均P<0.001。应用微生态制剂联合莫沙必利治疗后,血浆内毒素与IL-2、IL-6、TNF-α水平降低,肝功能明显改善。结论肝硬化伴小肠细菌过度生长患者血浆内毒素、IL-2、IL-6、TNF-α水平均升高,血浆内毒素水平升高与IL-2、IL-6、TNF-α水平升高呈直线正相关。微生态制剂联合莫沙必利治疗肝硬化患者内毒素血症、纠正肠道菌群失调及改善肝功能有显著疗效,并延缓肝功能衰竭及并发症的发生和发展,为应用于肝硬化临床治疗提供依据。

多囊卵巢综合征与内毒素血症血清标志物的相关性研究

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)与内毒素血症血清标志物的关系,并明确其相关机制。方法将2021年3月至12月于唐山市妇幼保健院妇科及生殖遗传科就诊的50例PCOS患者纳入实验组,同时将同期就诊的50例健康体检女性纳入对照组。比较两组基线资料、内毒素血症血清标志物及其他内分泌指标,分析PCOS与内毒素血症血清标志物的关系。结果实验组腰臀比(WHR)、双侧卵巢体积、窦卵泡计数、血清内毒素(LPS)、LPS结合蛋白(LBP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)、白介素(IL)-6、IL-12、IL-1Ra、IL-17a、胰岛素(FINS)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、总睾酮(TT)均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组(P<0.05);相关性分析显示,LPS、LBP、hs-CRP、TNF-α、NF-κB、IL-6、IL-12、IL-1Ra、IL-17a与WHR、双侧卵巢体积、窦卵泡计数、FINS、FSH、LH、TT呈正相关(r>0,P<0.05),HDL-C与WHR、双侧卵巢体积、窦卵泡计数、FINS、FSH、LH、TT呈负相关(r<0,P<0.05)。结论内毒素血症血清标志物与PCOS间存在显著相关性。

肥胖相关的内毒素血症对男性性腺功能影响的研究进展

肥胖是影响人口健康的重大公共卫生问题,其可造成包括性腺功能低下等的男性生殖健康疾病。通过收集近期的一些研究资料,我们发现造成男性性腺功能受损的发生机制除了雌激素代谢异常、瘦素抵抗及炎症细胞因子对下丘脑-垂体轴的直接抑制作用,还包括肠道因素对性腺功能及生育力造成的损害。究其成因,主要是肠黏膜通透性增加而出现肠内细菌易位侵入循环系统,诱发代谢性内毒素血症,并引起氧化应激,损害睾丸Leydig细胞与生殖细胞功能。益生菌可减少肠道细菌易位,从而减轻或消除代谢性内毒素血症对睾丸组织的损害,提升性腺功能。但益生菌的疗效尚未被广泛认可,针对肥胖男性这一群体,开展更为具体的临床用药研究将是未来研究的新方向。

基于文献研究的肝衰竭肠源性内毒素血症中医治法及用药规律分析

目的:总结分析肝衰竭肠源性内毒素血症(Intestinal Endotoxemia,IETM)的中医治法及用药规律,为临床治疗提供参考。方法:在中国知网、万方数据库、维普数据库中检索中医或中西医结合治疗肝衰竭IETM的临床研究,文献发表时间范围为2000年-2021年。提取中医治法和用药信息并建立数据库,进行中医治法、用药频次及频率、主药剂量的统计和聚类分析。结果:共纳入文献154篇,其中中药口服91篇、中药灌肠69篇。在口服中药方剂中,中医治法频次在前5位的依次是活血化瘀、清热解毒、益气健脾、通腑泻下、利湿退黄;在灌肠中药方剂中,中医治法频次在前5位的依次是活血化瘀、通腑泻下、清热解毒、益气健脾、利湿退黄。口服中药方剂共91首,涉及中药148味,频次在前10位的中药依次是大黄、丹参、赤芍、茵陈、白术、茯苓、栀子、黄芪、郁金、枳实;灌肠中药方剂共69首,涉及中药77味,频次在前10位的中药依次是大黄、赤芍、枳实、厚朴、茯苓、乌梅、薏苡仁、蒲公英、黄芩、丹参。对高频药物进行聚类分析,得到口服中药方剂10组药对聚类组合、4组3味药聚类组合、2组多味药聚类组合。灌肠中药方剂得到7组药对聚类组合、3组3味药聚类组合、2组多味药聚类组合。口服中药方剂主药大黄、丹参、赤芍常用剂量依次为1~10 g、11~20 g、11~20 g;灌肠中药方剂主药大黄、赤芍、枳实常用剂量依次为11~20 g、21~30 g、11~20 g。结论:治疗肝衰竭IETM的口服和灌肠中药方剂均以活血化瘀、清热解毒、通腑泻下、益气健脾为主要治法,口服中药侧重于益气健脾,灌肠中药侧重于通腑泻下;常重用赤芍、大黄以加强凉血化瘀之力。

微生态调节剂－乳果糖对肝损伤和内毒素血症防护效果的研究

本文研究了乳果糖口服对急性肝损害的防治效果。发现：（１）乳果糖灌服可迅速减少正常大白鼠门脉血中的内毒素。（２）给用Ｄ－氨基半乳糖破坏肝脏，乳果糖做预防性及治疗性口服，可明显地保护肝细胞及减轻内毒素血症并减轻肝组织损害。（３）首创了一种暴发性肝衰竭模型，即用内毒素叠加Ｄ－氨基半乳糖致小鼠肝衰竭模型。其肝脏损害速度与程度及２４小时死亡率远大于单用上述二种中毒成分之一。用乳果糖口服可明显预防此种暴发性肝坏死之发生，但用乳果糖腹腔注射则毫无保护作用。乳果糖只经口服通过对肠道菌群的调整才有降低内毒素血症效果。（４）用ｓｈｗａｒｔｚｍａｎ反应证明乳果糖对内毒素的生物活性没有阻断或抑制作用。本文证明乳果糖对Ｇａｌ－Ｎ致肝坏死的保护作用，并经临床观察证明对肝脏病人内毒素血症的治疗效果。

粪菌移植抗小鼠肠道菌群紊乱所致内毒素血症损伤研究

背景:肠道菌群在动物的新陈代谢、生长发育和维持健康过程中发挥了重要作用,调节机体免疫功能,使之处于平衡状态,从而避免或减少免疫相关疾病的发生。一旦肠道菌群紊乱将会导致机体出现内毒素血症,此时可以通过粪菌移植来调节小鼠的肠道菌群紊乱并且抑制由于肠道菌群紊产生的内毒素血症等相关炎症。方法:将30只健康小鼠随机分为3组,每组10只。在相同情况下置于普通动物饲养室饲养一周后,空白组10只小鼠饲喂普通日粮,对照组10只小鼠添加抗生素,实验组10只小鼠在饲喂抗生素后进行粪菌移植;上述小鼠血清采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10以及LPS;对其中部分小鼠肠道进行基于16S rDNA基因的微生物多样性检测。结果:对照组小鼠体内的炎性因子LPS、TNF-α、IL-6较空白组组显著升高(P<0.05),而IL-10、IL-1β的数值显著低于空白组(p<0.05);进行粪菌移植后,实验组小鼠体内的促炎因子浓度明显下降,实验组小鼠血清中LPS、TNF-α、IL-6的水平显著低于治疗前(p<0.05);IL-10、IL-1β的水平高于治疗前(p<0.05);16S rRNA检测结果显示,在对小鼠进行粪菌移植后,通过Alpha多样性和Beta多样性分析,粪菌移植后的小鼠肠道内物种多样性增加。意义:抗生素能够导致正常小鼠的肠道菌群紊乱,通过粪菌移植可以调节肠道菌群结构,从而改善内毒素血症。

内毒素血症与革兰阴性菌感染的关系

目的:探讨内毒素血症与革兰阴性菌败血症的相互关系。方法:选取临床疑似革兰阴性菌败血症患者30例。以动态浊度法连续检测内毒素,以全自动培养仪及鉴定仪进行血培养及鉴定。结果:30例血标本11例有革兰阴性菌生长。26例内毒素测定阳性,2例死于感染性休克,死亡病例血培养结果1例阳性,1例阴性;但内毒素检测均呈进行性增高。结论:革兰阴性菌感染患者的病情变化除细菌本身的作用以外还与内毒素血症密切相关。

肠源性内毒素血症与代谢相关脂肪性肝病研究进展

代谢相关脂肪性肝病(metabolic-associated fatty liver disease, MAFLD)也称为非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD),是代谢综合征在肝脏的表现。MAFLD常与肥胖、糖尿病和高血压等疾病合并发生,按病理严重程度可分为脂肪肝、肝炎和肝硬化等阶段。