豚鼠内淋巴囊上皮细胞Na^+,K^+-ATP酶不同β亚基的mRNA表达

目的 进一步研究内淋巴囊上皮细胞Na+,K+-ATP酶不同 β亚基的表达。方法 采用豚鼠内淋巴囊冰冻切片、原位杂交的方法检测Na+,K+-ATP酶不同 β亚基mRNA在内淋巴囊上皮细胞中的表达。结果 在内淋巴囊上皮细胞胞浆内可见Na+,K+-ATP酶不同 β亚基的阳性颗粒 ,β1亚基表达较弱 ,β2 亚基表达较强。结论 结合其他报道 ,内淋巴囊上皮细胞具有多种亚基异构体组成的Na+,K+-ATP酶的表达 ,而结肠上皮、肾小管上皮的Na+,K+-ATP酶几乎仅有α1β1型 ,提示其离子转运过程可能不同。

内淋巴囊上皮细胞透明质酸合成酶mRNA的表达

目的 研究内淋巴囊上皮细胞透明质酸合成酶 (hyaluronansynthase)mRNA的表达及其意义。方法 在查阅核酸序列数据库基础上 ,采用Motif程序分析各物种 (大鼠、小鼠、爪蟾、人类 )透明质酸合成酶的保守序列 ,应用原位杂交技术检测透明质酸合成酶mRNA在内淋巴囊上皮细胞的表达。结果 内淋巴囊近侧端、中间部均有部分上皮细胞胞浆显示透明质酸合成酶mRNA的阳性表达。结论 在分子生物学水平证实了内淋巴囊上皮细胞能合成透明质酸。

小鼠内淋巴囊原代上皮细胞L型钙离子通道定位表达

目的探讨C57BL/6小鼠内淋巴囊原代上皮细胞中电压门控钙离子通道定位表达。方法选取2日龄C57BL/6(P2B6)小鼠60只,P2B6小鼠8只麻醉处死取得颞骨标本,体视显微镜下定位内淋巴囊位置,提取内淋巴囊原代细胞并在低血清状态下培养。P2B6小鼠52只处理同上,颞骨标本用4%甲醛固定后脱钙包埋,采用免疫组织荧光技术和免疫细胞荧光技术定性原代内淋巴囊上皮细胞并确定L型钙离子通道表达。结果内淋巴囊上皮细胞在P2B6小鼠内淋巴囊中排列紧密,可见细胞聚集呈嵴状突起,胞体较小,细胞呈椭圆状,以扁平上皮为主,细胞培养光镜观察为不规则铺路石样,细胞形态大小不一,胞浆丰富,核椭圆形且大。免疫荧光检测显示L型Ca^(2+)通道在内淋巴囊上皮细胞膜上均呈均匀表达,细胞核上高表达。结论小鼠原代内淋巴囊上皮细胞中L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNA1C)、L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNA1S)、L-型电压依赖钙离子通道α1D亚基(Cav1.3/CACNA1D)表达为阳性,为细胞功能学实验提供依据,有利于进一步研究内淋巴囊维持稳态的机制。