视网膜内源性多肽CKASKGKL调节p53/cyclinD1信号通路拮抗多氯联苯暴露致子代视网膜损伤

目的:探讨视网膜内源性多肽CKASKGKL对多氯联苯(PCBs)暴露致子代视网膜发育异常的拮抗作用及可能的作用机制。方法:以斑马鱼为模式动物,收集斑马鱼胚胎予以PCBs处理,同时给予多肽CKASKGKL进行挽救实验,收集受精后48h幼鱼制备石蜡切片,显微镜下观察各组子代斑马鱼视网膜发育情况。以大鼠视网膜神经节细胞(RGC)为工具细胞,予以PCBs处理,同时给予多肽CKASKGKL进行挽救实验,CCK-8检测各组细胞增殖活性;采用基因富集分析(GSEA)了解多肽CKASKGKL可能作用的信号通路,Western blotting初步验证多肽CKASKGKL对视网膜神经节细胞p53/cyclinD1信号通路的影响。结果:多肽CKASKGKL可以拮抗PCBs暴露致子代斑马鱼视网膜发育异常,可以拮抗PCBs暴露致视网膜神经节细胞增殖活性降低;GSEA结果显示,多肽CKASKGKL可能通过参与p53信号通路发挥作用;Western blotting检测显示,多肽CKASKGKL干预后,视网膜神经节细胞中p53表达降低,其下游负调控基因cyclinD1表达增高。结论:多肽CKASKGKL可以拮抗PCBs暴露导致的子代视网膜损伤,可能与其通过调节p53/cyclinD1信号通路而促进细胞增殖有关。

内源性多肽ECDP4对子宫内膜癌肿瘤微环境中淋巴细胞分群影响的实验研究

目的探讨内源性多肽ECDP4在人外周血单核细胞(PBMCs)和子宫内膜癌Ishikawa细胞共培养体系下对PBMCs中T淋巴细胞亚群比例的影响。方法收集2020年9月至2020年11月手术切除的3例子宫内膜癌和3例配对正常子宫内膜组织标本。使用在线数据库UniProt、ProteomicsDB、MaxQB、UniProt和The Human Protein Atlas分析多肽ECDP4的前体蛋白及其生物学功能。建立人子宫内膜癌Ishikawa细胞株和新鲜人PBMCs共培养模型,分为对照组(含5%胎牛血清培养基)和实验组(含5%胎牛血清培养基中加100 ng/L内源性多肽ECDP4),共培养96 h,收集PBMCs。用流式细胞术分析PBMCs中淋巴细胞亚群比例变化。结果在正常子宫内膜组织中,ECDP4表达量为7.33×10-4±1.13×10-4,而在子宫内膜癌组织中表达量为7.30×10^(-5)±8.47×10^(-6)(P=0.0016)。生物信息学分析显示,NOVA2是ECDP4的前体蛋白,但其并不是子宫内膜癌的预后因素。流式细胞术检测显示,相较于单纯培养PBMCs,共培养体系中CD4^(+)T淋巴细胞比例下调(51.31±11.05)%(P<0.001),CD8^(+)T淋巴细胞比例下调(52.98±5.86)%(P<0.001)。相较于对照组,在共培养体系中加入ECDP4后,CD4^(+)T淋巴细胞比例上调(15.58±2.34)%(P<0.001),Ki-67的比例上调(54.60±24.5)%(P=0.0043),干扰素γ(INF-γ)的比例上调(27.92±17.25)%(P=0.0486);CD8^(+)T淋巴细胞比例上调(20.04±6.70)%(P<0.001),Ki-67的比例上调(26.57±6.42)%(P<0.001),INF-γ比例上调(87.48±40.70)%(P=0.01)。结论多肽ECDP4作为NOVA2的降解产物在子宫内膜癌中显著低表达,其能够增加PBMCs中CD4^(+)T淋巴细胞及CD8^(+)T淋巴细胞的比例,促进CD4^(+)及CD8^(+)T淋巴细胞的增殖作用,同时增加INF-γ的分泌量。内源性多肽ECDP4具有进一步应用于临床研究的价值。

斑马鱼胚胎发育过程中内源性多肽的表达及与眼发育的相关研究

目的:研究斑马鱼发育过程中内源性多肽的表达规律以及与眼发育的相关性。方法:分别收集0、48 h斑马鱼胚胎进行多肽质谱分析,筛选发育过程中的差异多肽,利用生物信息学方法分析差异多肽对应的前体蛋白及前体基因,从中筛选与眼发育相关的内源性多肽。结果:研究共筛选得到差异多肽232条。理化特性分析发现分子量均分布在2 000 Da以下,等电点主要以弱酸和弱碱性为主,中性极少。生物信息学发现Vitellogenin(VTG)、Titin(TTN)基因编码的前体蛋白富集较多与胚胎发育和眼发育相关的差异多肽。信号通路分析(ingenuity pathway analysis,IPA)发现差异多肽的分子功能和生理系统功能与胚胎发育相关,差异多肽富集信号通路包括轴突介导的信号通路、FAK信号通路和MAPK信号通路,这些信号通路与眼发育密切相关。结论:斑马鱼胚胎期发育过程中内源性差异多肽理化特性稳定,与胚胎发育密切相关,并可能通过相关信号通路来影响眼发育,将为眼发育提供新的研究思路,为机制研究奠基基础。

针刺对消化性溃疡患者内源性多肽的影响

目的 探讨针刺调整胃肠道功能的机制。方法 检测 2 6例胃溃疡 (GU )、2 2例十二指肠溃疡 (DU )患者针刺足三里、公孙、胃俞等穴前后血浆β-内啡肽 (β- EP)、神经降压素 (NT)及血清胃动素 (MO)的含量 ,并与健康组 (2 5例 )进行比较。结果 GU组与 DU组血浆 NT含量低于对照组 ,而 MO、β- EP较之为高 (P<0 .0 1) ;针刺后 GU组与 DU组血浆 NT含量较针前为高 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,而 MO、β- EP则较针前为低 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,针刺后 GU组与 DU组症状总积分均较针前有明显下降 (P<0 .0 1)。结论 NT、β- EP、MO的分泌失调是消化性溃疡 (PU )形成与复发重要原因之一。针刺治疗 PU与改善其NT、β- EP、MO的分泌失调状态 。

子宫内膜癌内源性多肽PDAEP-1体外抗肿瘤活性分析

目的通过多肽组学分析,从子宫内膜癌组织中筛选获得具有潜在生物学活性的内源性多肽。方法收集3例子宫内膜样腺癌组织标本(以3例年龄匹配的健康女性子宫内膜样本为对照),通过液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)获得子宫内膜癌特异性内源性多肽,借助生物信息学方法筛选具有潜在活性的功能多肽,使用CCK-8实验、Transwell及划痕实验验证多肽对子宫内膜癌细胞株HEC-1-A增殖、侵袭、迁移的影响,并以PCR、Western Blot方法选择性观察多肽对Wnt/β-catenin/EMT通路相关分子表达的影响。结果鉴定获得序列为TAGNVLMH的多肽(PDAEP-1)对应前体为SLC38A10,其表达水平与子宫内膜癌患者5年生存率相关;该多肽对子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭、迁移有明显的抑制作用,且作用后Vimentin、β-catenin两者的mRNA及蛋白水平均显著降低,而E-cadherin则上调。结论通过调变Wnt/β-catenin/EMT通路相关分子,内源性多肽PDAEP-1在体外有抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的抗肿瘤活性,具有潜在的诊疗应用价值。

2型糖尿病临床血清样本的内源性多肽定量组学分析

糖尿病是一种全身性代谢紊乱综合征,患者高血糖的形成与肝脏、胰脏、肠道、脂肪肌肉组织、肾脏、脑等多脏器的功能失调相关。在分子水平上呈现糖尿病的生物分子疾病谱图对糖尿病的临床早期诊断、分子分型及其病理过程的理解可提供更加全面的数据支持。本工作应用多肽组学分析技术,针对健康组、糖尿病前期组和2型糖尿病患者组临床血清样品进行内源性多肽定性、定量分析,共鉴定到690条可靠血清内源性肽段,其中163条为统计学差异血清内源性多肽,为2型糖尿病早期筛查、早期诊断及分子分型等提供了定量多肽组支持。

不同剂量微波辐射对大鼠血清代谢酶和内源性多肽的影响

目的研究不同平均功率密度微波辐射后大鼠血清代谢酶和内源性多肽的改变。方法采用0、5、10、20、30和50 m W/cm^2微波辐射120只二级雄性Wistar大鼠,于辐射后6 h、1 d、3 d和7 d取血清,检测代谢酶AST、LDH、CK、CKMB及内源性多肽BNP、LEK和NPY的改变。结果血清代谢酶AST浓度在20 m W/cm^2组辐射后1 d和3 d降低,50 m W/cm^2组7 d降低(P<0.05); LDH浓度在10～30 m W/cm^2组辐射后3 d降低,50 m W/cm^2组辐射后6 h和7 d降低(P<0.05,P<0.01); CK浓度在30 m W/cm^2组辐射后6 h和1 d升高,50 m W/cm^2组辐射后7 d降低(P<0.05); CKMB浓度在20和30 m W/cm^2组辐射后6 h和1 d升高,50 m W/cm^2组辐射后7 d降低(P<0.05,P<0.01)。血清内源性多肽BNP浓度在5 m W/cm^2组呈先升高(6 h)后减少(7 d)的改变,10～30 m W/cm^2组辐射后3 d和7 d减少; LEK浓度在5 m W/cm^2组升高(3 d),10和30 m W/cm^2组减少(6 h/7 d); NPY浓度在5和50 m W/cm^2组辐射后3 d升高,10、30和50 m W/cm^2组辐射后7 d减少(P<0.05,P<0.01)。结论 10～50 m W/cm^2微波辐射可导致大鼠心脑功能一过性异常,血清代谢酶和内源性多肽浓度的改变并不呈现剂量依赖性。

内源性多肽的潜在作用方式与功能预测

内源性多肽是一类常见的生物活性物质,在生命活动中发挥着重要作用。近年来内源性多肽的功能受到越来越多的关注,研究内源性多肽对于深入了解疾病机制、开发新的治疗药物有着十分重要的价值。因此,对于内源性多肽潜在作用方式的分析和生物功能的初步预测,在了解多肽性质特征,提升研究效率具有重要意义。

动物内源性多肽CGA-N46抗菌谱及对动物细胞的作用

目的研究抗真菌肽CGA-N46的抗菌谱及对不同动物细胞的作用效果。方法采用微量稀释法测定CGAN46对14种常见病原真菌的抗菌活性;采用分光光度法检测CGA-N46对红细胞的溶解作用,采用MTT法测定CGAN46对鸡胚成纤维细胞的毒性作用及对癌细胞的抑制作用。结果 CGA-N46对光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、白念珠菌具有抑菌活性,其MIC分别为4.0、4.0、0.5、1.0、1.0mg/ml;最小抑菌浓度的CGA-N46无溶血作用,对鸡胚成纤维细胞无毒性,但对肺癌A549细胞有抑制作用,72h最大抑制率为60.53%。结论 CGA-N46多肽具有抗念珠菌作用,且具有抗癌潜力,而对正常细胞安全、无毒性。

内源性多肽与同种异型反应

内源性多肽的发现、MHC分子结构和T细胞抗原识别受体(TcR)结构的阐明,已认识到同种异型反应机制涉及内源性多肽、MHC、TcR三维复合体的关系。同种异型MHC限制性的问题可以认为是MHC对内源性多肽的选择结合作用。同种异型排斥反应与内源性多肽的免疫原性关系密切。

卵巢癌组织内源性肽P1DA促进卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用研究

目的:探讨卵巢组织中来源于AHNK2蛋白的多肽(peptide 1 derived from AHNK2 protein,P1DA)对卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法:P1DA处理对数生长期的SKOV3和OVCAR3细胞后,CCK-8法检测细胞活性变化,以探索P1DA对卵巢癌SKOV3和OVCAR3细胞增殖的影响;Transwell实验检测P1DA处理后细胞迁移、侵袭能力变化;流式细胞术检测P1DA处理后细胞凋亡率变化,分析P1DA对两种卵巢癌细胞凋亡率的影响。结果:P1DA处理后,卵巢癌细胞SKOV3及OVCAR3的细胞活性明显增加,迁移、侵袭能力明显增加,细胞凋亡率则无明显变化。结论:卵巢组织内源性肽P1DA可促进卵巢癌SKOV3及OVCAR3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,对其凋亡无显著影响。

新发现的内源性缩血管多肽—偶联因子6

偶联因子 6 (Couplingfactor 6 ,CF6 )是线粒体ATP合酶的一个亚单位 ,它由 76个氨基酸组成。在线粒体内CF6 是一个重要的能量转运物质。近年发现CF6 亦存在于血管内皮细胞膜上并且由其释放进入血液循环。循环血液中的CF6 是一个强烈的血管收缩肽 ,能抑制胞浆磷脂酶A2 的活性 ,减少质膜花生四烯酸释放 ,从而影响前列环素I2 (PGI2 )合成 ,是迄今已知的体内唯一的内源性PGI2 合成抑制因子。CF6 在高血压发病中可能具有重要意义。

利尿钠肽和其受体在内耳的研究进展

内耳是听觉、位置觉感受器官，含有内外淋巴系统，其液体容量、离子分布、局部血流调节及声音传导的机制尚未阐释清楚，推测内耳中存在的多种激素与上述机制有一定的关系。利尿钠肽（natriureticpeptides，NPs）即是其中一种激素。NPs是与液体稳态、血压等的调节有关的内源性多肽，是分子结构相似、基因来源不同的激素家族。它们与其特异的受体结合后发挥生物学作用。目前已发现三种利尿钠肽受体（NPRs）。NPs和NPRs在内耳分布广泛．它们对内耳环境的生理病理影响一直在探求中。本文就近年来的研究现状作一综述。

子痫前期胎盘样本的多肽组学分析及差异多肽功能的初步探究

目的:通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)探索子痫前期胎盘样本中的多肽表达,并对其中差异多肽的体外功能进行初步探究。方法:收集2019年5—9月在南京医科大学第一附属医院产科行计划性剖宫产手术的4例正常足月孕妇胎盘和4例子痫前期孕妇胎盘组织。利用超滤法、LC-MS/MS检测样本中多肽的表达水平差异。通过CCK-8法,克隆形成实验以及Transwell实验初步研究差异多肽405SPLFMGKVVNPTQK418对滋养细胞(HTR-8/SVneo)增殖、迁移能力的影响。脐静脉内皮细胞(HUVECs)成管实验初步研究该多肽对HUVECs细胞血管形成能力的影响。使用qPCR和Western blot检测多肽处理组与对照组中的金属蛋白质酶MMP2以及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP1)的表达。结果:共鉴定到3 582条多肽片段,48条差异表达多肽。体外功能实验表明,差异多肽405SPLFMGKVVNPTQK418能够促进滋养细胞增殖迁移以及内皮细胞的管状形成能力。多肽处理后MMP2表达明显上调,TIMP1的表达明显下调。结论:子痫前期胎盘与正常胎盘间存在差异多肽,且差异多肽405SPLFMGKVVNPTQK418能够促进滋养细胞以及内皮细胞的功能,为子痫前期发病机制研究以及治疗提供了多肽组学的支持。

多肽^(301)LARSLKT^(307)抑制心肌分化的细胞实验研究

目的前期发现多肽^(301)LARSLKT^(307)可在动物水平显著抑制胚胎期心脏发育。该研究拟进一步在P19细胞系水平探究^(301)LARSLKT^(307)抑制心肌分化的作用和机制。方法利用PepDraw Tool、Uniprot和ProtParam在线生物信息学分析网站,对多肽301LARSLKT307的结构、保守性和理化性质进行生物信息学分析。在荧光显微镜下观察FITC标记的多肽^(301)LARSLKT^(307)进入P19细胞的情况。通过倒置显微镜观察多肽^(301)LARSLKT^(307)对P19细胞分化的影响。实时定量PCR及蛋白质免疫印迹法检测多肽对心肌分化标志基因肌钙蛋白cTnT和转录因子GATA4表达的影响。实时定量PCR检测多肽对Notch1信号通路关键分子Notch1和下游Hey1及Hey2的影响。结果生物信息学分析结果显示多肽位于其前体蛋白Talin的301~307氨基酸位点,其分子量小、结构稳定、亲脂性高,且前体蛋白保守性高。荧光显微镜下可见FITC标记的多肽301LARSLKT307可以穿过细胞膜进入P19细胞内。与对照组比较,多肽组细胞部分坏死,生长形态紊乱,细胞厚薄不一。实时定量PCR与蛋白质免疫印迹法检测显示,与对照组比较,多肽组的分化相关基因GATA4及cTnT的mRNA及蛋白表达量均有不同程度下降。实时定量PCR检测显示,与对照组比较,多肽组Notch1通路的相关基因Notch1、Hey1及Hey2的mRNA表达均有不同程度下降。结论多肽^(301)LARSLKT^(307)可能是通过抑制Notch1通路关键因子的表达发挥抑制心肌分化的生物功能。

重组人脑利钠肽治疗重症充血性心力衰竭临床观察

脑利钠肽（BNP）是利钠肽家族中的一员,主要由心室分泌,具有扩张血管、降压、利尿的作用。重组人脑利钠肽（rhBNP）是通过基因重组方法人工合成的脑钠肽,与心室肌产生的内源性多肽具有相同的作用机制,主要用于急性心力衰竭的治疗。本文旨在观察冻干rhBNP（商品名：新活素,成都诺迪康生产,国药准字S20050033）对重症充血性心力衰竭的治疗作用。

脓毒症肠道功能障碍小鼠肠道组织多肽组学分析

目的观察脓毒症肠道功能障碍小鼠肠组织多肽谱差异表达,探索脓毒症肠道功能障碍机制。方法采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症肠道功能障碍小鼠模型,分假手术组(n=3)和脓毒症组(n=3),取回肠组织,运用液相色谱串联质谱法检测肠组织多肽谱,差异表达内源性多肽进行生物信息学分析,推断其在脓毒症肠功能障碍中的作用。结果共鉴定到458条多肽序列,涉及129个前体蛋白,得出差异上调的多肽有101个,下调的多肽有9个,差异内源性多肽可能通过调控代谢途径、抗原处理和呈递、氧化磷酸化、MAPK信号通路、细胞凋亡等参与脓毒症肠道功能障碍的发生发展,并预测出脓毒症肠道功能障碍相关的15条内源性多肽。结论发现了15条差异表达内源性多肽,可能是参与脓毒症肠道功能障碍的关键生物活性多肽,为脓毒症肠道功能障碍的防治提供了新的方向。

新活素

【通用名称】冻干重组人脑利钠肽，rhBNP。 【理化性状】白色粉末，相对分子质量3464。 【药理作用】人脑利钠肽（rhBNP）是B型利钠肽，为人体分泌的一种内源性多肽，在病因诱导下发生心力衰竭后人体应激大量产生的一种代偿机制。人脑利钠肽与特异的利钠肽受体（该受体与鸟苷酸环化酶相偶联）相结合，引起了细胞内环单磷酸鸟苷（cGMP）的浓度升高和平滑肌的舒张。作为第二信使，cGMP能扩张动脉和静脉，迅速降低全身动脉压、右房压和肺毛细管楔压，从而降低心脏的前后负荷，并迅速减轻心力衰竭患者的呼吸困难程度和全身症状。脑利钠肽是肾素一血管紧张素一醛固酮系统（RAAS）的天然阻滞剂，它可以拮抗心肌细胞、心纤维原细胞和m管平滑肌细胞内的内皮索、去甲肾上腺素和醛固酮等过度激活产生的心脏毒性。

儿茶酚抑素在心血管系统的作用

儿茶酚抑素（catestatin，CST）是一种新的内源性多肽，具有抑制烟碱诱导的儿茶酚胺释放、刺激肥大细胞释放组胺、趋化单核细胞、促进血管新生等活性，能发挥扩张血管、降低血压、降低心肌收缩力的作用，是一种新的心血管活性肽，在心血管疾病中的作用日益受到关注。

糖尿病并发胆囊结石病人CCK受体表达意义的探讨

缩胆囊素（CCK）是一类广泛分布于消化系统和中枢神经系统的内源性多肽,在消化系统中可调控胃酸和胰酶分泌、胃排空等生理过程。依据介导的生理功能不同,CCK受体被分为CCK-1（主要分布在消化系统）和CCK-2（主要分布在CNS）两种亚型。CCk受体的作用是受FGF19拮抗的,FGF19是在餐后1-2h引起胆囊舒张,FGF19和CCK的交替作用引起胆囊的舒张和收缩。