新城疫病毒合用中药黄芪诱生内源性干扰素的研究

目的研究新城疫病毒(NDV)合用中药黄芪在小鼠体内诱生内源性干扰素-α及对小鼠的免疫调节作用。方法实验分3部分,实验1:分别以NDV、黄芪及二者合用予小鼠口腔喷洒给药,连续10日后以ELISA法测定小鼠唾液中干扰素-α和SIgA的含量;实验2:分别以NDV、黄芪及二者合用予小鼠腹腔注射给药(黄芪灌胃方式给药),ELISA法测定给药10日后血清干扰素-α的含量;实验3:分为NDV、黄芪及二者合用的高、中、低三种剂量,给药方法同第二组,6天后MTT法测定脾脏NK细胞的活性。每组分别设置阴性对照。结果NDV和黄芪口腔给药能升高小鼠唾液干扰素-α(35.54±10.20IU/ml,5.69±1.35IU/ml)和SIgA含量(68.88±15.47ng/ml,44.32±9.87ng/ml),腹腔给药能诱生血清干扰素-α(120.54±29.21IU/ml,10.69±6.35IU/ml),并能激活NK细胞活性(50.4%,32.1%)。NDV合用黄芪组的诱生效果远高于单独使用组(98.55±16.95IU/ml,101.31±27.59ng/ml,262.55±26.91IU/ml,75.6%),显示出较强的协同作用。结论NDV合用黄芪能诱生小鼠内源性干扰素,并能发挥对小鼠SIgA和NK细胞的免疫调节作用。

前列腺素E_1促进血吸虫病家兔肝脏内源性干扰素γ表达及其意义

目的 :探讨前列腺素 (PG )E1对血吸虫病家兔肝脏纤维化形成过程中内源性干扰素 (IFN)γ表达的影响及其意义。方法 :血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染 14只家兔构建肝纤维化模型。其中 7只家兔于感染后 60d开始静脉应用PGE12 5 μg·kg-1·d-1至 12 0d。观察虫卵肉芽肿数量和面积 ,原位杂交方法检测IFN γ表达 ,苦味酸天狼星红检测胶原纤维总量。结果 :血吸虫病家兔肝纤维化形成过程中胶原纤维含量增加 ( 71 66± 13 5 9) ;外源性PGE1可以明显降低肝脏胶原水平 ( 13 3 8± 4 2 4) ,与模型组比较 ,P <0 0 1。IFN γ积分光密度由模型组 0 10 5±0 0 2 4升高到治疗组 0 43 8± 0 0 76(P <0 0 1)。结论 :PGE1可以通过上调IFN γ表达 ,有效地降低血吸虫病家兔肝脏胶原纤维生成。

内源性干扰素及转移因子对兔病毒性出血症的保护作用

通过对家兔人工免疫后血清干扰素的测定及注射聚肌胞后的攻毒保护试验，结果表明：兔病毒性出血症（ＲＶＨＤ）疫苗同聚肌胞一样，是一种良好的干扰素诱生剂，疫苗诱导产生的内源性干扰素参与疫苗的免疫保护机理，提供早期保护作用，而特异性转移因子基本上不保护家兔抵御强毒攻击，故不能用之替代脏器组织灭活苗。

不同物质配合新城疫病毒刺激猪产生内源性干扰素的研究

为了研究左旋咪唑等物质刺激猪产生内源性干扰素的效果,试验将12头60日龄左右健康长白猪随机分成A、B、C 3组,在接种鸡新城疫Ⅰ系弱毒冻干苗的同时,A、B、C 3组分别注射左旋咪唑(7.5 mg/kg)、黄芪多糖(2.5 mg/kg)和生理盐水2 mL,于免疫后4,8,12,16,20,24,28小时前腔静脉采血,用ELISA法检测猪血清α-干扰素(IFN-α)及γ-干扰素(IFN-γ)水平。结果表明:A组IFN-α及IFN-γ水平在免疫后4小时即明显上升,与C组比较差异极显著(P<0.01),但持续时间较短,在免疫后16小时开始下降;B组IFN-α及IFN-γ水平在免疫后4小时明显上升,与C组比较差异极显著(P<0.01),持续到免疫后20小时开始下降;在整个试验过程中,B组试验猪外周血IFN-α及IFN-γ水平始终高于A组,但差异不显著(P>0.05)。说明左旋咪唑和黄芪多糖都有加强鸡新城疫Ⅰ系弱毒冻干苗诱导猪内源性干扰素产生的作用,黄芪多糖效果好于左旋咪唑。

外源性IFN-β对OL细胞和OL/BDV细胞中内源性Ⅰ型IFN的诱导作用

目的探讨外源性干扰素(interferon,IFN)-β对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte,OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中内源性Ⅰ型IFN表达和干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)7细胞定位的影响。方法外源性IFN-β处理OL细胞和OL/BDV细胞0、0.5、2、4、8、24 h,根据细胞是否加入外源性IFN-β,分为外源性IFN-β未刺激组和刺激组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测Ⅰ型IFN mRNA表达。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,外源性IFN-β刺激4 h,观察IRF7细胞定位情况。结果外源性IFN-β刺激OL细胞,在2、4、24 h,IFN-αmRNA表达显著增加(P值分别为0.008,0.0001,0.004);在0.5、4、8、24 h,IFN-βmRNA表达显著增加(P值分别为0.0004,0.0002,0.011,0.012),两者均在4 h增加最为显著。外源性IFN-β刺激OL/BDV细胞4 h和24 h,IFN-αmRNA表达显著增加(P值分别为0.0004,0.022),IFN-βmRNA表达仅在刺激4增加(P=0.002)。外源性IFN-β刺激OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白均转移至细胞核内。结论外源性IFN-β可诱导OL细胞和OL/BDV细胞中内源性I型IFN表达,参与解除BDV对I型IFN应答的抑制过程,并促进IRF7的活化入核。