血管内皮释放的一种新的内源性抑制剂：内皮衍生超极化因子（EDHF）

乙酰胆碱(Ach)作用于血管内皮可导致释放内皮衍生松弛因子(endothelium-derived relaxing factor，EDRF)，最近发现Ach还可导致血管内皮释放内皮衍生超极化因子(endothelium-derived hyperpolarlzlng factor，EDHF)．

蓝圆鲹骨骼肌内源性脯氨酸内肽酶抑制剂的纯化及其抑制机理

对蓝圆鲹(Decapterus maruadsi)骨骼肌采用热处理、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose弱阴离子交换柱层析、Sephacryl S-200 HR凝胶过滤层析和HiTrap Q HP强阴离子交换柱层析相结合方法,分离、纯化出一种内源性脯氨酸内肽酶抑制剂(prolyl endopeptidase inhibitor,PEPI)。研究了PEPI对脯氨酸内肽酶(prolyl endopeptidase,PEP)活性的影响及抑制机理。Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳分析表明纯化的PEPI分子质量约为10 kDa,具有较强的热稳定性和酸碱耐受性,其为丝氨酸蛋白酶类PEP的专一性、可逆竞争型抑制剂,抑制常数Ki为0.34 μmol/L。PEPI与PEP形成复合物后,α-螺旋、无规卷曲比例增加,β-折叠比例减少,PEP活性中心构象的改变是酶活力被抑制的主要原因。

内源性NOS抑制剂——甲基精氨酸的代谢、生化与药理

甲基精氨酸包括单甲基精氨酸和二甲基精氨酸 ,后者包括非对称性与对称性二甲基精氨酸。其中 ,单甲基精氨酸和非对称性二甲基精氨酸是内源性NOS抑制剂 ,它们和血管内皮功能失调密切相关 ,因而成为人们研究的热点。本文将对其代谢。

内源性一氧化氮合酶抑制剂与糖尿病大血管病变的研究进展

一氧化氮(NO)是内皮细胞释放的一种舒血管因子,具有许多良性心血管生理效应。非对称型左旋二甲基精氨酸(ADMA)是一种内源性NO合酶抑制剂,能与NO合成底物左旋精氨酸竞争NO合酶,使NO合成减少。近年研究发现,ADMA与糖尿病大血管病变发生有关,为进一步明确这一疾病的发病机制提供了新的见解。

内源性一氧化氮合酶抑制剂与心血管疾病

非对称型左旋二甲基精氨酸是机体自身产生的一氧化氮合成底物左旋精氨酸的类似物 ,能够竞争性抑制一氧化氮合酶的活性 ,使一氧化氮合成减少 ,被称为内源性一氧化氮合酶抑制剂。非对称型左旋二甲基精氨酸与高血压、冠心病等心血管疾病的发生和发展有关。

新型内源性血管生成抑制剂Tumstatin

内源性血管生成抑制剂是抗血管生成治疗最有潜力的药物蛋白。Tumstatin是最近发现的一种新型高效的内源性血管生成抑制剂 ,可特异性地作用于内皮细胞 ,诱导内皮细胞凋亡 ,起到抗血管生成作用。

胰岛素抵抗与内源性一氧化氮合成酶抑制剂

背景：非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethy larginine，ADMA)水平与内皮功能障碍及心血管疾病危险性增加呈正比。有多种心血管疾病危险因素与胰岛素敏感性降低有关，但是血浆ADMA水平升高尚未完全与代谢综合征联系起来。目的：评价胰岛素敏感性与血浆ADMA浓度的关系，确定增加胰岛素敏感性的药物治疗能否改变ADMA水平。设计、地点与对象：64例无糖尿病健康志愿者(女性42例，男性22例；48例血压正常，16例有高血压)的横断面研究，含有非随机对照试验成分。研究于2000年10月～2001年7月在一所大学的医学中心进行。干预：7例有胰岛素抵抗及高血压的患者使用胰岛素增敏剂——罗格列酮(4mg／d，4周，然后4mg每天2次，连续8周)。受试者在治疗前及治疗12周后进行有关检杏。主要观察指标：采用胰岛素抑制试验检测胰岛素敏感性，同时测定空腹血浆低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖、胰岛素和ADMA水平。结果：在非糖尿病血压正常的受试者中，ADMA水平与胰岛素介导的葡萄糖处理受损呈正相关(r=0．73，P<0．001)。与代谢综合征一致，ADMA水平亦与空腹血浆甘油三酯水平呈正相关(r=0．52，P<O．001)，但是与低密度脂蛋白胆固醇无关(r=0．19，P=0．20)。血浆ADMA水平在胰岛素抵抗的患者升高，而且与高血压无关。药物治疗可改善胰岛素的敏感性，使血浆ADMA平均(SD)水平从1．50(0．30)降至1．05(0．33)μmol／L(P=0．001)。结论：胰岛素抵抗与血浆ADMA水平之间存在显著相关性。罗格列酮药物干预可增加胰岛素敏感性并降低血浆ADMA水平。血浆ADMA水平增高可能是导致胰岛素抵抗患者内皮功能障碍的原因之一。

载脂蛋白A-I对基质金属蛋白酶-2的抑制作用机理

为了分离纯化鲢鱼基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)的内源性抑制剂,克隆并表达了鲢鱼MMP-2的催化结构域(rHm-MMP-2c),并将其作为筛选内源性抑制剂的靶标酶。通过60℃加热、50%~90%的硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose和Phenyl-Sepharose柱层析等手段,从鲢鱼肌肉中纯化了一种MMP-2内源性抑制剂,该抑制剂相对分子质量为28 ku,能有效抑制rHm-MMP-2c在4℃冷藏过程中对I型胶原的降解。质谱鉴定结果表明,纯化的抑制剂为载脂蛋白A-I(Apo A-I)。抑制动力学显示,Apo A-I对rHm-MMP-2c呈现竞争性抑制,抑制常数K_(i)为1.31μmol/L,半抑制浓度(IC_(50))为3.33μmol/L。分子对接结果显示,酶和抑制剂结合的主要作用力为氢键相互作用,抑制原因可能是Apo A-I与MMP-2纤连蛋白结合区结合形成了空间位阻,阻碍了底物与酶的结合。

扩张型心肌病心肌组织中分离整合素金属蛋白酶及其抑制剂的表达改变

背景：分离整合素金属蛋白酶（ADAMs）可能通过改变细胞表面的基质受体（整合素）、激活生物分子而参与心脏结构的重塑。我们在不同模式的重塑心肌组织中比较了ADAMs、其内源性抑制剂TIMP-3和整合素的表达差异。方法和结果：心肌组织取材于扩张型心肌病（n=20例）、梗阻性肥厚型心肌病（n=5例）和心功能正常的供体（n=7例）。

基质金属蛋白酶及其抑制剂在风湿性二尖瓣狭窄合并心房纤颤中的作用

心房纤颤是临床上较为普遍的一种心律失常,心房纤颤时可加重风湿性二尖瓣瓣膜狭窄的程度。房颤对心脏瓣膜的破坏主要表现为细胞外基质正常结构被破坏,胶原沉积增多,各型胶原比例失调和排列紊乱。影响细胞外基质代谢的最主要的酶类是基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)和金属蛋白酶内源性组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)。心房纤颤时MMPs、TIMPs平衡失调使心脏瓣膜破坏,Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积增多,排列紊乱。MMP 9和TIMP 2是心房纤颤发生后MMPs和TIMPs中表达最具有意义的指标。本文通过对心房纤颤后心脏瓣膜组织中MMP 9和TIMP 2异常表达的研究进行综述,以了解心房纤颤对风湿性二尖瓣瓣膜影响的程度。

中药缓压乐复方制剂对应激性高血压大鼠心肌组织受磷蛋白磷酸化水平的调节作用

目的探讨中药缓压乐复方制剂对应激性高血压(stress induced hypertension,SIH)大鼠心肌组织受磷蛋白(Phospholamban,PLB)磷酸化水平的调节作用。方法用复合应激因素建立SIH大鼠模型的基础上,以中药缓压乐复方制剂进行干预。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学方法分别检测SIH模型组、正常组、药物干预组和阴性对照组大鼠心肌组织内源性抑制剂1(endogenous inhibitor 1,I-1)基因mRNA表达以及PLB蛋白的磷酸化水平。结果与正常组相比,模型组大鼠心肌组织I-1基因mRNA表达水平明显下调(P<0.05),用药物干预后明显上调(P<0.05);与正常组相比,模型组大鼠心肌组织PLB蛋白磷酸化水平明显下调(P<0.05),而用药物干预后明显上调(P<0.05)。结论中药缓压乐复方制剂可能通过PLB磷酸化水平的上调,增强SERCA2a蛋白的活性,从而增加肌质网对Ca^2+的重吸收。

内皮抑素及其对血管生成抑制作用的研究进展

目的对内皮抑素的来源、表达、结构、作用机制以及其对血管生成的抑制作用研究进展作一综述。方法对近几年的相关资料进行总结、归纳。结果与结论国内外对于内皮抑素对各种肿瘤的抑制作用已有了大量的研究,经证实内皮抑素作为一类内源性血管生成抑制剂,对于各类肿瘤有较好的治疗作用,具有良好的应用前景。

重组人血管内皮抑制素对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease，COPD）：是一种以气流受限为特征的肺部疾病，就世界平均水平，COPD居当前死亡原因的第4位，已成为一个重要的公共卫生问题。肺血管重塑在COPD进展到肺动脉高压的过程中起重要作用[2]。重组人血管内皮抑制素（商品名：恩度．endostar）是一种特异性内源性血管生成抑制剂，能特异地作用于内皮细胞，尤其是微血管的内皮细胞，控制新生血管内皮细胞的增殖，诱导其凋亡，抑制其迁移，从而抑制新生血管生成[3]。

脑泰方对局灶性脑缺血大鼠血清MMP-9、PA及TIMP-1表达的影响

目的研究脑泰方治疗对局灶性脑缺血大鼠血清中基质金属蛋白酶9(MMP-9),MMP-9前体纤溶酶原激活物(plasminogen activator,PA)及内源性抑制剂1(TIMP1)的作用。方法随机将SD大鼠分为假手术组、空白对照组、脑泰方低、中、高剂量组(3,9,27g/kg),marimastat(BB-2516)组(6.25mg/kg)ig。各组大鼠预处理ig给药连续3d,每日1次,后采用大脑中动脉栓塞法(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)行大鼠局灶性脑缺血模型制备,术后连续ig给药3d。采用ZeaLonga神经学评分标准记录动物的行为活动,采用ELISA法检测血清中MMP-9、PA及TIMP1的表达。结果脑泰方高剂量组神经学评分较空白对照组有显著降低(P<0.05);脑泰方高、中、低剂量组血清中MMP-9、PA的表达显著降低(P<0.05),脑泰方高、中、低剂量组TIMP1表达明显升高(P<0.05)。结论脑泰方对局灶性脑缺血导致的血脑屏障损伤有一定保护作用。

基质金属蛋白酶与急性脑血管病

基质金属蛋白酶(MMP)在脑血管基底膜的降解中起着重要作用,在病理条件下可导致血脑屏障受损,促进神经炎症反应的发生和发展。组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)是调节MMP活性的内源性抑制剂。MMP与TIMP平衡关系的失调与急性脑血管病的继发性脑损伤有关。人为地调控MMP与TIMP之间的平衡,有可能成为脑血管病的一条新的治疗途径。

颅脑损伤后神经细胞凋亡的分子调控

凋亡是多细胞有机体在一定的生理或病理条件下遵循自身的程序,通过内源性DNA内切酶的激活,主动结束生命的过程.近些年来,对细胞凋亡机制的研究证明,细胞凋亡参与了颅脑损伤后继发性病理生理演变的全过程[1].颅脑损伤后神经细胞发生凋亡的最有力证据是关于其分子机制的研究.大量实验证实多种基因产物的主动表达与颅脑损伤后细胞凋亡之间存在密切关系.而caspase家族蛋白酶是神经细胞凋亡途径的核心成分,细胞凋亡的信号可触发由caspases参与的级联效应,导致靶细胞解体.

弹性蛋白酶抑制剂对野百合碱诱导的肺动脉高压干预作用的研究

目的 探讨丝氨酸弹性蛋白酶抑制剂ZD 0 892对野百合碱性肺动脉高压的逆转作用。方法 利用野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型。 2 1天后 ,治疗组给予ZD 0 892管饲 ,剂量按2 4 0mg/(kg·d)分 2次给予 ,模型组按同样剂量管饲ZD 0 892的溶媒 ;而正常对照组管饲同样剂量的生理盐水。于实验第 2 1、2 8、35天 ,使用荧光分光光度计检测肺动脉弹性蛋白的离解活性 ,通过右心导管法测定肺动脉压力 ;并在上述时间点 ,采用钡明胶灌注的技术对周围肺动脉进行组织病理学分析。结果 注射野百合碱后的 2 1天 ,大鼠肺动脉高压已经形成 ,肺动脉弹性蛋白酶的活性明显升高。经ZD 0 892治疗 1周后 ,肺动脉弹性蛋白酶的活性显著下降 ,肺动脉压力、周围肺动脉的肌化数、肌性肺动脉的中膜厚度也相应减低 ;治疗 2周后 ,弹性蛋白酶的活性降低至正常水平 ,肺动脉压力及结构也随之恢复正常。结论 内源性血管弹性蛋白酶在肺动脉高压的发生及发展中起重要作用 ,ZD 0 892能有效地抑制其活性 ,进而可使野百合碱诱导的严重肺动脉高压完全逆转。