烧伤脓毒症大鼠血清培养巨噬细胞中Nrf2的表达

目的研究内毒素和烧伤脓毒症大鼠血清培养的巨噬细胞中Nrf2的表达。方法在动物模型中,将大鼠分为正常对照组、LPS组、单纯烧伤组、烧伤合并铜绿假单胞菌脓毒症组、烧伤合并金黄色葡萄球菌脓毒症组。先将后4组制备成40%面积的Ⅲ度烧伤创面,分别将金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌及LPS注入大鼠腹腔内,在验证脓毒症动物模型后,感染8 h心脏穿刺收集血液制备血清备用。然后取RAW 264.7细胞为靶细胞,以不同组血清干扰8 h后,分别运用RT-PCR和Western blotting技术检测Nrf2在靶细胞中的表达情况。结果所有组Nrf2明显高于正常对照组。RT-PCR示Nrf2 mRNA表达水平在单纯烧伤组中最高(P<0.01),其次分别是内毒素组(P<0.01)、假单胞菌组(P<0.01)和葡萄球菌组(P<0.01)。Western印记示Nrf2蛋白表达在内毒素组中最高(P<0.01),其后分别是单纯烧伤组(P<0.01)、绿脓杆菌和葡萄球菌组(P<0.05)。结论当受到细菌或内毒素及内源性抗氧化系统对抗氧化应激损害干扰后,内源性抗氧化系统出现于巨噬细胞RAW264.7中,并可能作为治疗目标应用于严重烧伤合并MODS、脓毒症休克等患者中。

木瓜总三萜对非甾体抗炎药诱导大鼠小肠损伤的保护作用及机制研究

目的:研究木瓜总三萜对非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导小肠损伤模型大鼠内源性超氧化物歧化酶/谷胱甘肽过氧化物酶1/过氧化氢酶(SOD/GPX1/CAT)抗氧化系统、细胞外信号调节激酶/核因子2相关因子2/血红素氧合酶-1(ERK/Nrf2/HO-1)和线粒体凋亡信号通路的影响。方法:实验大鼠随机分为正常组、模型组、木瓜总三萜(25、50和100mg/kg)组和雷贝拉唑肠溶片100mg/kg组,各组大鼠灌胃给予相应的药物,每天1次,连续1周,末次给药后禁食,次日再次给药1次; 1小时后,除正常组外,其余各组灌胃给予吲哚美辛45mg/kg 1次。24小时后取血,进行血液中SOD、GSH-Px、CAT和MPO、MDA水平检测;取小肠组织进行溃疡指数和组织形态学分析;实时定量PCR检测小肠组织中SOD1、SOD2、SOD3、GPX1、CAT、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9基因表达; Western blot检测小肠组织中ERK1/2、p-ERK1/2、胞浆Nrf2、胞核Nrf2、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:木瓜总三萜(25、50和100mg/kg)可显著降低吲哚美辛诱导小肠黏膜损伤大鼠小肠溃疡指数、病理学评分,改善小肠黏膜溃疡、黏膜及黏膜下层肿胀和炎性浸润,显著升高血液中内源性抗氧化酶活性,显著上调受损小肠组织中SOD1、SOD2、SOD3、GPX1、CAT和p-ERK1/2、胞核Nrf2、HO-1、Bcl-2表达,显著下调Bax和Caspase-3、Caspase-9表达,且随着剂量的增加,其作用效果更明显。结论:木瓜总三萜对NSAIDs诱导大鼠小肠损伤具有较好的保护作用,调节内源性SOD/GPX1/CAT抗氧化系统功能及ERK/Nrf2/HO-1和线粒体凋亡信号通路可能是其作用机制之一。

木瓜乙酸乙酯部位对小鼠急性胃溃疡的保护作用

目的:观察木瓜乙酸乙酯萃取部位对急性胃溃疡实验小鼠的保护作用,并探讨其可能的机制。方法:小鼠随机分为空白组、模型组、木瓜乙酸乙酯萃取部位(50,100,200mg/kg)和奥美拉唑组(20mg/kg)组,每天给药1次,连续给药5天,处理前24小时禁食不禁水,第5日给药后1小时,模型组和给药组分别灌胃给予80%乙醇10ml/kg和15mg/kg阿司匹林,4小时之后进行实验。摘眼球取血进行血液SOD、GSH-Px活性和MDA含量分析;取胃,观察胃粘膜损伤的情况,计算溃疡发生率、溃疡指数和溃疡抑制率;刮取胃粘膜,检测胃粘膜中H+/K+-ATPase活性;取胃组织,进行HE染色,进行胃粘膜组织形态学观察;用实时定量荧光PCR和蛋白质印迹法检测胃粘膜组织中H+/K+-ATPase的基因和蛋白表达。结果:木瓜乙酸乙酯萃取部位(50,100,200mg/kg)和奥美拉唑组(20mg/kg)能显著增加血液中SOD、GSH-Px活性,降低MDA水平和胃粘膜中H+/K+-ATPase活性,降低溃疡发生率和溃疡指数,提高溃疡抑制率,改善胃粘膜组织形态学,降低胃粘膜组织中H+/K+-ATPase的基因和蛋白表达,与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),其中以木瓜乙酸乙酯萃取部位200mg/kg剂量组作用效果更为显著。结论:木瓜乙酸乙酯萃取部位对急性胃溃疡实验小鼠的胃粘膜损伤有较好的保护作用,增强内源性抗氧化系统功能及抑制H+/K+-ATPase表达和活性可能是其作用机制之一。