肺动脉高压时内源性血管弹性蛋白酶的动态变化与肺血管重建关系的实验研究(英文)

目的肺动脉高压是一种以肺血管重建为主要病理改变的肺血管增生性疾病,其机制十分复杂,至今尚未完全阐明,近年来的研究表明,内源性血管弹性蛋白酶(EVE)与肺动脉高压时的肺血管病变密切相关,该研究旨在探讨肺动脉高压时EVE的动态变化及其与肺血管重建之间的关系。方法100只成年SD大鼠随机分为正常组和模型组(均n=50)。模型组大鼠皮下注射60 mg/kg野百合碱诱导肺动脉高压。于实验第2,8,14,21天,每组各处死12只大鼠,取6只荧光分光光度计检测肺动脉的弹性蛋白离解活性,并通过右心导管法测定肺动脉压力;余下6只对周围肺动脉进行组织病理学分析。结果肺动脉的弹性蛋白离解活性在注射野百合碱后的第2天即明显升高至(3.87±0.19)×10-8U/mg,第8天降为(0.18±0.2)×10-8U/mg,第14天再次升高至(1.45±0.18)×10-8U/mg,第21天维持在(1.91±0.18)×10-8U/mg。而肌性肺动脉的比例增加在注射野百合碱后第8天出现,肺动脉中膜的增厚及肺动脉压力的增高在第14天后出现。结论EVE活性的早期升高可能是肺动脉高压的一种重要触发因素;EVE活性的第2次升高可能与肺高压的进展有关。

川崎病患儿内源性血管弹性蛋白酶变化及其与冠脉损伤的关系

目的探讨内源性血管弹性蛋白酶（EVE）对川崎病（KD）患儿冠脉损害的作用机制。方法选取2012年1月至2013年4fl住院治疗的60例KD患儿为研究对象，以同期60例呼吸道感染发热患儿为对照组。采用超声心动图检测患儿冠状动脉扩张程度；采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血EVE、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和转化生长因子B1（TGF-B1），并分析其与冠状动脉直径的相关性。结果KD患儿急性期血EVE、MMP-9、TGF—B1水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；并发冠脉病变的KD患儿的EVE水平明显高于无冠脉损害患儿，且EVE、MMP-9、TGF—p1水平与冠脉扩张程度成显著正相关（r=0．64～0．79，P〈0．01）。结论EVE在KD冠脉病变中，可能是通过诱导MMP-9、TGF—B1合成而引起冠脉损伤。

内源性血管弹性蛋白酶检测对川崎病患儿冠状动脉损伤的评估价值

目的 评估川崎病患儿血清中内源性血管弹性蛋白酶（EVE）含量检测对该病冠状动脉损伤情况的诊断价值。方法选择2012年1月~2013年4月诊断明确的川崎病患儿共60例作为病例组，抽取其发病0~11d（病理Ⅰ期）、12~25d（病理Ⅱ期）时外周静脉血；将60例同期因发热就诊的非川崎病患儿作为对照组，于发热急性期抽取外周静脉血。采用酶联免疫法（ELISA）检测两组血清中EVE含量，病例组分别于发病7d和14d行超声心动图检查冠状动脉损伤情况，分析患儿血清EVE含量与其冠状动脉损伤的相关性。结果病例组Ⅰ期和Ⅱ期时的血清EVE含量均高于对照组，差异有显著性（P〈0.05），超声心动图显示Ⅰ期时有冠状动脉损伤者3例，Ⅱ期时有冠状动脉损伤者17例，病例组中有冠状动脉损伤患儿血清中EVE含量均明显高于无冠状动脉损伤的患儿，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 EVE含量测定可能对川崎病患儿冠状动脉损伤情况的评估具有重要的临床价值。

内源性血管弹性蛋白酶在川崎病冠状动脉重构中的作用研究

目的探讨内源性血管弹性蛋白酶（EVE）对川崎病患儿冠状动脉重构的影响。方法2012年1月至2013年4月诊断为川崎病的60例患儿作为病例组，分别于发病0-11d（病理I期）、发病12～25d（病理Ⅱ期）抽取外周静脉血3mL；60例同期因发热就诊的非川崎病患儿作为对照组，均于发热急性期空腹抽取外周静脉血3mL。应用酶联免疫法（ELISA）检测各组血清中EVE、IL-6及血浆中血管内皮生长因子（VEGF）水平；病例组分别于发病的第一周末、第二周末和第四周末以超声心动图检查冠状动脉受损情况；Pearson相关分析评价EVE与IL-6和VEGF的相关性。结果病例组I期和Ⅱ期血清EVE和IL-6水平均明显高于对照组，而血浆VEGF水平均低于对照组（均P〈0．05），且Ⅱ期EVE和IL-6水平均高于I期（均P〈0．05）；有冠状动脉损害的病理Ⅱ期患儿血清中EVE和IL-6的含量均显著高于无冠状动脉损害组，而血浆VEGF水平低于无冠状动脉损害组（均P〈0．05）；有冠状动脉瘤的病理Ⅱ期患儿血清中EVE和IL-6的含量均显著高于无冠状动脉瘤组，而血浆VEGF水平低于无冠状动脉瘤组（均P〈0．05）；EVE含量与IL-6水平呈正相关，而与VEGF水平呈负相关（分别r=0．915、-0．769，均P〈O．05）。结论EVE可能参与川崎病患儿冠状动脉重构，干预其活性可能缓解和阻止冠状动脉损害。

血管紧张素转换酶抑制剂对损伤后动脉弹性蛋白酶的影响

目的 :研究球囊导管损伤后早期血管紧张素转换酶抑制剂对动脉中膜弹性蛋白酶的影响。方法 :12周雄性Wistar大鼠颈动脉和主动脉用球囊导管损伤 ,分成实验组和对照组 ,分别于术前 2d投与血管紧张素转换酶抑制剂 (temocapril-HCl,10mg·kg-1·d-1)和溶剂 ,术后 2 ,3 ,5和 10d处死。用原位杂交 ,免疫组织化学和酶活性测定研究弹性蛋白酶。结果 :实验组动脉损伤后 10d时的内膜面积与对照组相比明显被抑制 (P <0 0 1) ,实验组 2、3和 5d弹性蛋白酶mRNA阳性细胞率、弹性蛋白酶阳性细胞率及其活性明显低于对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论 :ACEI(temocapril-HCl)明显抑制损伤后动脉中膜平滑肌弹性蛋白酶表达和活性 。

重症肺炎患儿中性粒细胞弹性蛋白酶、血管细胞黏附分子-1的表达及其预后价值分析

目的探讨重症肺炎患儿中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达及其预后价值。方法选取2020年1月—2022年1月聊城市第二人民医院收治的108例重症肺炎患儿作为研究组。另选取同期该院体检的96例健康儿童作为对照组。比较两组血清NE、VCAM-1水平。随访21 d后统计重症肺炎患儿生存情况,采用单因素分析影响重症肺炎患儿死亡的因素,并对影响患儿死亡的因素进行一般多因素Logistic回归分析,采用Pearson相关性分析血清NE、VCAM-1水平与重症肺炎患儿的儿童危重病例评分(PCIS)的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清NE、VCAM-1水平预测重症肺炎患儿死亡的价值。结果研究组NE、VCAM-1水平高于对照组(P<0.05)。死亡组与存活组性别、年龄、肺不张、胸腔积液、治疗药物、体温、心率、呼吸频率、空腹血糖、白细胞计数、中性粒细胞、肿瘤坏死因子α、降钙素原、乳酸脱氢酶比较,差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组休克、病变累及多个肺叶构成比及APACHEⅡ评分,C反应蛋白、NE、VCAM-1水平高于存活组(P<0.05)。一般多因素Logistic回归分析结果显示:血清NE[O^R=3.762(95%CI:1.513,9.354)]、VCAM-1[O^R=3.622(95%CI:1.457,9.006)]、APACHEⅡ评分[O^R=3.267(95%CI:1.314,8.124)]、病变累及多个肺叶[O^R=3.200(95%CI:1.287,7.955)]是影响重症肺炎患儿死亡的危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清NE、VCAM-1水平与重症肺炎患儿PCIS均呈负相关(r=-0.373和-0.544,均P<0.05)。血清NE、VCAM-1联合预测的敏感性、特异性和AUC分别为80.00%(95%CI:0.593,0.933)、97.59%(95%CI:0.916,0.998)、0.919(95%CI:0.851,0.963)。结论重症肺炎患儿血清NE、VCAM-1水平均异常升高,两者与预后密切相关,临床检测血清NE、VCAM-1水平可以作为预测患儿死亡的敏感指标。

替莫普利对大鼠血管平滑肌细胞弹性蛋白酶的影响

目的研究替莫普利对大鼠球囊损伤动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的弹性蛋白酶水平、表达和活性的影响。方法建立大鼠损伤动脉再狭窄模型,实验组给予盐酸替莫普利,对照组给予药品溶剂。动脉损伤后第2、3、5天测定两组VSMC的弹性蛋白酶ⅢB阳性细胞率;采用原位杂交的方法测定两组弹性蛋白酶ⅡmRNA阳性细胞率;测定两组弹性蛋白酶活性值。动脉损伤后第3天对两组进行原位明胶酶谱分析。动脉损伤后第10天测定两组内膜面积。结果替莫普利组与对照组比较,大鼠损伤动脉VSMC的弹性蛋白酶ⅢB、弹性蛋白酶ⅡmRNA阳性细胞率显著降低,弹性蛋白酶活性显著降低;同时明胶酶水平显著降低,内膜面积显著减小。结论替莫普利可能通过抑制大鼠损伤动脉VSMC的弹性蛋白酶水平、表达和活性及抑制明胶酶水平,抑制损伤动脉内膜肥厚。

血小板源性生长因子影响血管弹性蛋白酶表达

探讨球囊损伤后血管平滑肌细胞丝氨酸弹性蛋白酶表达增加的机理。用球囊导管损伤Wistar系雄性大鼠主动脉或颈总动脉。以血小板源性生长因子A和大鼠胰腺丝氨酸弹性蛋白酶的地高辛标记RNA探针进行原位杂交 ,并用抗 5 溴脱氧尿嘧啶抗体进行双重染色。用抗血小板源性生长因子AA、抗血小板源性生长因子BB、抗胰腺弹性蛋白酶、抗人增殖细胞核抗原等抗体进行免疫染色或免疫双重染色。电镜观察细胞的超微结构。结果发现 :①在球囊损伤后 0 .5～ 4h ,血小板源性生长因子mRNA表达细胞多于弹性蛋白酶mRNA表达细胞 ;②增殖细胞和迁移细胞既有血小板源性生长因子mRNA和其蛋白表达 ,又有弹性蛋白酶mRNA和其蛋白表达 ;③迁移细胞多为增殖细胞核抗原染色阳性 ,细胞内可见到核分裂像。提示血小板源性生长因子可能是刺激中膜平滑肌细胞增殖、迁移并使其弹性蛋白酶增加的影响因子之一。

弹性蛋白酶抑制剂对动脉损伤后血管平滑肌细胞的作用

目的探讨弹性蛋白酶抑制剂对大鼠颈动脉损伤后内膜增厚的影响。方法球囊导管损伤Wistar大鼠颈总动脉内皮,治疗组每日一次给予弹性蛋白酶抑制剂,模型组给予同等剂最的溶剂,空白对照组注射等最的生理盐水。于损伤10d时测定颈总动脉内膜细胞数及面积,用原位末段缺口标记法检测内膜细胞凋亡指数。结果球囊损伤10d后,模型组颈总动脉内膜面积增厚,平滑肌细胞数增多,凋亡指数下降。治疗组较模型组,内膜面积及平滑肌细胞数减少,凋亡指数大幅上升。结论弹性蛋白酶抑制剂能够有效抑制损伤后平滑肌细胞的增殖,诱导平滑肌细胞的凋亡,从而抑制血管损伤后内膜的增厚。

弹性蛋白酶在球囊损伤后血管中膜平滑肌细胞迁徙中的作用(英文)

目的 探讨弹性蛋白酶在球囊损伤后动脉中的表达。方法 2F球囊导管损伤Wistar大鼠主动脉。用大鼠胰腺丝氨酸弹性蛋白酶Ⅱ的RNA探针进行原位杂交和Northern印迹杂交、抗弹性蛋白酶抗体进行免疫组化、胰腺弹性蛋白酶底物测定其活性 ;电镜观察迁徙细胞与其周围弹性纤维的连接处的数量。结果 球囊损伤后 ,迁徙细胞弹性蛋白酶mRNA、蛋白表达及其活性均有明显增加 ,细胞周围弹性纤维的连接处数量显著减少。结论 弹性蛋白酶是降解细胞外基质和动脉血管内弹性板、促使平滑肌细胞向内膜迁徙的重要原因。

体外循环对血管内皮细胞及中性粒细胞弹性蛋白酶影响

目的探讨体外循环(CPB)对血管内皮细胞的急性损伤/活化及中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的影响。方法选取30例先天性心脏病患者,分别于体外循环前(T1),升主动脉阻断后15 min(T2),升主动脉开放后30 min(T3),升主动脉开放后60 min(T4)采集静脉血,测定血浆中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),细胞黏附因子(sICAM)的含量。结果NE、TNF-α、sICAM在升主动脉阻断15 min后己升高,升主动脉开放30 min后升至最高点,而后有下降趋势结论。NE与sI-CAM呈正相关(r=0.7826,P<0.05),并与TNF-α呈正相关(r=0.8256,P<0.05)。结论CPB可导致血管内皮细胞的广泛损伤/活化。血浆弹性蛋白酶的动态变化可提示血管内皮细胞的损伤程度。

基质金属蛋白酶与急性脑血管病

基质金属蛋白酶(MMP)在脑血管基底膜的降解中起着重要作用,在病理条件下可导致血脑屏障受损,促进神经炎症反应的发生和发展。组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)是调节MMP活性的内源性抑制剂。MMP与TIMP平衡关系的失调与急性脑血管病的继发性脑损伤有关。人为地调控MMP与TIMP之间的平衡,有可能成为脑血管病的一条新的治疗途径。

人巨噬细胞金属弹性蛋白酶对人胃癌细胞COX-2和VEGF体内表达的影响

目的探讨体内人巨噬细胞金属弹性蛋白酶(HME)对人胃癌细胞环氧合酶-2和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法选取BALB/cnu/nu裸鼠24只构建人胃癌细胞SCG-7901裸鼠皮下移植模型,随机分为对照组和HME干预组,其中HME干预剂量分别为0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.8mg/kg,对照组给予等体积0.9%氯化钠。干预6周后处死动物,测量鼠重、瘤重、肿瘤大小,计算抑瘤率;采用Westernblot和免疫组织化学方法检测移植瘤组织中COX-2和VEGF的表达;CD34标记血管内皮细胞计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果与对照组相比各剂量组HME均能明显抑制皮下移植瘤生长(P<0.05);且在HME各剂量组中0.8mg/kg组抑瘤作用最明显。HME能明显抑制移植瘤组织中COX-2和VEGF的表达,并明显降低肿瘤MVD值(P<0.05)。结论 HME通过抑制肿瘤微血管形成来抑制肿瘤的生长;HME抑瘤作用具有剂量依赖性。

中性粒细胞弹性蛋白酶与急性肺损伤

急性肺损伤（ALI）是机体遭受严重创伤、休克、酸中毒及严重感染等因素引起的一类继发性、弥漫性肺实质损伤性疾病，临床表现为顽固性低氧血症、弥漫性肺部浸润及肺顺应性下降，进一步恶化可导致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。ALI病死率高达40％～60％，其发病机制并未完全阐明，一般认为与肺部炎症细胞聚集并释放炎症介质，损伤肺微血管内皮细胞及上皮细胞有关。

气道内弹性蛋白酶在形成肺心病中的作用

肺心病是我国的一种难治性常见病。80%的肺心病患者有长期咳嗽、咳痰的历史。肺心病是因肺部疾患引起肺血管压力增高,使右心室压力随之增高。

对113树脂吸附弹性蛋白酶的工艺改进

弹性蛋白酶(Elastase,EC3.4.4.7简称弹性酶)是存在于哺乳动物胰脏的一种肽链内切酶,具有广泛的药理作用,影响脂质代谢,阻止胆固醇在肝脏中合成和在血管壁中沉积,降低血中胆固醇和甘油三酯,阻止主动脉和冠状动脉壁上的斑块的形成,抑制肝纤维化和肾小球病变,对粘液、脂质和蛋白质有水解的功能,并有溶解结缔组织中弹性蛋白的独特功能。能降血压、扩张血管。

弹性蛋白酶，给你健康和美丽

心脑血管疾病，是全球公共卫生领域所面临的严重挑战，是人类健康的第一杀手，全世界每年有1500万人死于心脑血管疾病，占世界死亡人数的1／4，我国约有1．4亿人患有心脑血管疾病，每9个人就有1个人患有心脑血管疾病，每年约有800万人新发心脑血管疾病，90％的现代人都会产生供血不足，而使用药物治疗者仅占24％。

西维来司对中重度急性呼吸窘迫综合征患者肺血管内皮多糖蛋白复合物层作用的临床研究

目的探讨西维来司对中重度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者肺血管内皮多糖蛋白复合物层(EGL)的作用,以及对ARDS患者的临床治疗效果。方法纳入2012年6月至2014年6月入住该院重症监护室(ICU)的需机械通气的中重度ARDS患者共80例,采用随机、双盲分为治疗组(给予西维来司0.2mg·h-1·kg-1静脉持续泵入,连续使用72h)与对照组(同时间给予等量生理盐水泵入),在入住ICU时,24、72h检测血气分析、心排指数(CI)、血管外肺水指数(EVLWI)、肺血管通透性指数(PVPI)及弹性蛋白酶(NE)、硫酸乙酰肝素(HS)、黏结蛋白聚糖-1(Syndecan-1),取肺泡灌洗液(Balf)检测Balf-NE及清蛋白(Balf-ALB)。记录患者机械通气时间,入住ICU时间,住院时间及90d病死率。结果两组患者入ICU时各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。在24h时与对照组比较,治疗组氧合指数显著增加(P<0.05),EVLWI、PVPI、血浆NE、HS、Syndecan-1及Balf-NE水平显著降低(P<0.05)。在72h与对照组比较,治疗组动脉血氧分压(PO2)、肺泡动脉氧分压差[P(A-a)DO2]、氧合指数显著增加(P<0.05),EVLWI、PVPI,血浆NE、HS、Syndecan-1及Balf-NE、Balf-ALB水平显著降低(P<0.05)。治疗组机械通气时间、住ICU时间、住院时间及90d病死率均显著低于对照组(P<0.05)。结论 NE抑制剂西维来司可以显著改善中重度ARDS患者氧合水平,降低患者机械通气时间、入住ICU时间、住院时间及90d病死率。