微小RNA-126-3p通过调控内源性酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3信号通路对宫颈癌HeLa细胞增殖 侵袭及凋亡的影响

目的 探究微小RNA-126-3p(miR-126-3p)通过调控内源性酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法 将宫颈癌细胞株HeLa培养至对数期,并将其随机分为对照组、下调miR-126-3p组及上调miR-126-3p组。对照组对HeLa细胞进行正常培养,下调miR-126-3p组、上调miR-126-3p组通过miR-126-3p模拟物进行转染。用MTT法测定细胞增殖,通过流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期,应用Transwell小室测定细胞侵袭,通过划痕实验测定细胞迁移,使用Western Blot法测定JAK2/STAT3信号通路蛋白表达量。结果 3组HeLa细胞M周期表达水平[对照组(16.28±4.18),下调miR-126-3p组(19.33±6.60),上调miR-126-3p组(17.54±5.37)]比较,差异无统计学意义(F=1.235,P>0.05)。与对照组比较,下调miR-126-3p组的miR-126-3p、JAK2、STAT3、存活率、24 h细胞增殖率、48 h细胞增殖率、72 h细胞增殖率、细胞侵袭数、细胞迁移率、细胞迁移数上升,凋亡率降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),而S周期水平表达升高,G1周期水平表达降低,但差异无统计学意义(均P>0.05);与下调miR-126-3p组比较,上调miR-126-3p组的miR-126-3p、24 h细胞增殖率、48 h细胞增殖率、72 h细胞增殖率、存活率、细胞侵袭数、JAK2、STAT3水平表达下降,凋亡率水平表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),而细胞迁移数、细胞迁移率、S周期水平下降,G1周期水平表达升高,但差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 调节miR-126-3p水平表达可有效改善HeLa细胞侵袭、增殖及凋亡状况,降低宫颈癌的严重程度,其作用机制可能与JAK2/STAT3信号通路相关。

补阳还五汤通过调控PI3K/Akt、JAK2/STAT3信号促进BMSC趋化迁移对外伤性脊髓损伤大鼠神经元活性及认知功能的影响

目的研究补阳还五汤通过调控磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、内源性酪氨酸激酶(JAK)2/信号传导和转录启动因子(STAT)3信号促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)趋化迁移对外伤性脊髓损伤大鼠的神经元活性及认知功能的影响。方法选取健康大鼠53只,随机分为健康组(健康大鼠常规饲养)、损伤组(建立脊髓损伤模型)、干预组(补阳还五汤治疗)、对照组(甲泼尼龙治疗),每组12只,剩余5只大鼠用于补阳还五汤含药血清制备。流式细胞术鉴定BMSCs细胞。Transwell小室法测大鼠BMSCs迁移。高架十字迷宫和Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能。苏木素-伊红(HE)染色检测脊髓组织病理形态。TUNEL测脊髓组织神经细胞凋亡。免疫组化检测p-JAK2、p-STAT3。Western印迹测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt。结果传代后的培养细胞呈旋窝状或放射状贴壁生长,细胞多呈星形、梭形或三角状,培养3代后,细胞贴壁加快、形态均一,呈旋窝状或单层放射状生长。培养细胞表面抗原CD29、CD90为阳性,CD31、CD45为阴性,提示其为BMSCs细胞。与健康组相比,损伤组总路程、进入开臂次数、穿越平台次数显著降低,不同时间的潜伏期显著升高(P<0.05)。与损伤组相比,干预组与对照组总路程、进入开臂次数、穿越平台次数显著升高,不同时间的潜伏期显著降低(P<0.05)。干预组与对照组各指标对比无统计学差异(P>0.05)。健康组脊髓组织结构完整。损伤组脊髓组织疏松水肿,有细胞空泡变性产生。相较于损伤组,干预组与对照组大鼠脊髓组织病理形态有所改善。与健康组相比,损伤组BMSCs、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt显著降低,神经细胞凋亡率、p-JAK2、p-STAT3显著升高(P<0.05)。与损伤组相比,干预组BMSCs、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt显著升高,神经细胞凋亡率、p-JAK2、p-STAT3显著降低(P<0.05)。干预组与对照组各指标水平无统计学差异(P>0.05)。结论补阳还五汤通过激活PI3K/Akt通路抑制JAK2/STAT3信号通路的激活,促进BMSCs的迁移,减轻神经细胞的凋亡,起到神经保护的作用,从而改善脊髓损伤大鼠的认知功能。

基于JAK2/STAT3信号通路调节miR-29对感染性盆腔炎大鼠的干预效果

目的探究基于内源性酪氨酸激酶2(JAK2)/转录激活子3(STAT3)信号通路调节微小RNA-29(miR-29)对感染性盆腔炎大鼠的干预效果。方法选取SPF级65只SD大鼠,15只为空白组,其余50只建立感染性盆腔炎模型,之后将建模成功45只大鼠随机分为模型组、下调组、上调组各15只。做miR-29转染,将10μl miR-29过表达慢病毒悬液、miR-29沉默慢病毒悬液分别注射于上调组、下调组大鼠胃组织中,空白组、模型组注入同剂量的蒸馏水灌胃,注射1 d后观察大鼠变化。结果与空白组相比,模型组、上调组、下调组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、JAK2、STAT3水平升高,miR-29、超氧化物歧化酶(SOD)水平下降(P<0.05);与模型组相比,上调组miR-29、TNF-α、IL-6、MDA、JAK2、STAT3水平升高,SOD表达水平下降,下调组SOD水平升高,miR-29、TNF-α、IL-6、MDA、JAK2、STAT3表达水平下降(P<0.05);与上调组相比,下调组miR-29、TNF-α、IL-6、MDA、JAK2、STAT3水平下降,SOD水平升高(P<0.05)。结论下调miR-29可抑制感染性盆腔炎大鼠炎性反应,保护组织内膜的完整性,其作用机制可能与JAK2/STAT3信号通路相关。