内皮型一氧化氮合酶在运动预适应改善心肌缺血-再灌注损伤中的作用

背景:运动是防治各种心血管疾病并保护心脏免受缺血-再灌注损伤的有效策略,其作用机制有待深入研究。目的:观察有氧运动预适应对心肌缺血-再灌注损伤的影响,并探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)激活(包括偶联和磷酸化)在其间的作用。方法:取80只成年Wistar大鼠,采用随机数字表法分为安静组(n=40)和运动组(n=40),运动组进行8周有氧运动,安静组在鼠笼内安静饲养。8周后进行3项实验:①实验1:末次训练后,检测大鼠心功能、心脏NO代谢物含量及心脏eNOS、磷酸化eNOS-S1177、eNOS二聚体、eNOS单体的蛋白表达量;②实验2:将大鼠分为安静对照组、运动对照组、安静+eNOS抑制剂组、运动+eNOS抑制剂组,均进行体外心肌缺血-再灌注损伤实验,安静+eNOS抑制剂组、运动+eNOS抑制剂组再灌注前10 min持续灌注eNOS抑制剂,再灌注3 h后检测心功能与心肌梗死面积;③实验3:将大鼠分为安静对照组、运动对照组、安静+eNOS偶联剂组和运动+eNOS偶联剂组,均进行体外心肌缺血-再灌注损伤实验,安静+eNOS偶联剂组和运动+eNOS偶联剂组再灌注前10 min持续灌注eNOS偶联剂,再灌注3 h后检测心肌梗死面积、心脏NO代谢物含量及心脏eNOS、磷酸化eNOS-S1177、eNOS二聚体、eNOS单体和3-硝基酪氨酸的蛋白表达量(其中,磷酸化eNOS-S1177/eNOS比值反映eNOS磷酸化/去磷酸化水平,eNOS二聚体/单体比值反映eNOS偶联/解偶联水平)。结果与结论:①实验1:与安静组比较,运动组大鼠心输出量、左心室射血分数升高(P<0.05),亚硝酸盐和S-亚硝基硫醇含量升高(P<0.05),磷酸化eNOS-S1177、eNOS蛋白表达和磷酸化eNOS-S1177/eNOS比值上调(P<0.05),eNOS二聚体蛋白表达和eNOS二聚体/单体比值升高(P<0.05);②实验2:与安静对照组比较,运动对照组左心室发展压升高(P<0.05),心肌梗死面积下降(P<0.05);与运动对照组比较,运动+eNOS抑制剂组左心室发展压降低(P<0.05),心肌梗死面积增加(P<0.05);③实验3:与安静对照组比较,运动对照组左心室发展压升高(P<0.05),心肌梗死面积下降(P<0.05),磷酸化eNOS-S1177/eNOS比值下降(P<0.05),eNOS二聚体/单体比值下降(P<0.05),S-亚硝基硫醇含量增加(P<0.05),3-硝基酪氨酸蛋白表达量下调(P<0.05);与运动对照组比较,运动+eNOS偶联剂组左心室发展压降低(P<0.05),心肌梗死面积增加(P<0.05),磷酸化eNOS-S1177/eNOS比值升高(P<0.05),eNOS二聚体/单体比值升高(P<0.05),3-硝基酪氨酸蛋白表达升高(P<0.05);④结果表明:有氧运动预适应可诱导心脏保护效应,其机制与心脏缺血-再灌注期间eNOS解偶联以及去磷酸化进而抑制NO过度产生并降低硝基-氧化应激有关。

2型糖尿病患者血清内皮型一氧化氮合酶、网膜素1水平预测糖尿病肾脏疾病发生的价值研究

目的 分析2型糖尿病患者血清内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)、网膜素1(Omentin-1)水平对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)发生的预测价值。方法 选取2020年5月至2023年2月石家庄市第二医院收治的2型DKD患者124例作为DKD组、单纯2型糖尿病患者125例作为对照组。收集所有患者的临床指标;酶联免疫吸附法检测患者血清eNOS、Omentin-1水平;Pearson法分析DKD患者血清eNOS、Omentin-1和临床指标的相关性;多因素Logistic回归模型分析影响2型糖尿病患者发生DKD的危险因素;受试者工作特征曲线分析2型糖尿病患者血清eNOS、Omentin-1水平对DKD发生的预测价值。结果 与对照组比较,DKD组患者血清总胆固醇[(4.75±0.91)mmol/L比(4.48±0.96)mmol/L]、糖化血红蛋白[(9.32±1.25)%比(8.56±1.23)%]、24 h尿蛋白定量[(2.78±0.31)g比(0.15±0.02)g]、尿微量白蛋白(urinary microalbumin,mAlb)[(273.12±20.41)mg/L比(23.08±3.35)mg/L]、血肌酐(serum creatinine,Scr)[(209.53±22.59)μmol/L比(73.52±9.21)μmol/L]水平显著升高,估算肾小球滤过率(estimatedglomerularfiltrationrate, eGFR)[(72.52±13.51)mL·min^(-1)·(1.73m^(2))^(-1)比(107.34±10.27)m L·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)]、血清e NOS[(24.48±3.37)U/L比(33.82±4.52)U/L]、Omentin-1[(28.75±4.42)μg/L比(43.63±6.78)μg/L]水平显著降低(P<0.05);DKD患者血清eNOS与Omentin-1水平呈正相关(r=0.674,P<0.05);血清eNOS、Omentin-1与24 h尿蛋白定量、m Alb、Scr呈负相关(r=-0.456、-0.551、-0.503、-0.527、-0.497、-0.495, P<0.05),与eGFR呈正相关(r=0.523、 0.602,P<0.05);24 h尿蛋白定量、mAlb、Scr是影响2型糖尿病患者发生DKD的危险因素(P<0.05),eGFR、e NOS、Omentin-1是影响2型糖尿病患者发生DKD的保护因素(P<0.05);血清eNOS、Omentin-1两者联合预测2型糖尿病患者发生DKD的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.942,分别高于血清e NOS(AUC=0.882)、Omentin-1(AUC=0.862)各自单独预测2型糖尿病患者发生DKD的AUC(P<0.05)。结论 DKD患者血清eNOS与Omentin-1水平均呈低表达,二者联合检测对2型糖尿病患者发生DKD有一定预测价值。

艾司氯胺酮与舒芬太尼静吸复合麻醉对腹腔镜手术患者血流动力学血浆一氧化氮和内皮素-1的影响

目的比较艾司氯胺酮与舒芬太尼应用于腹腔镜手术对血流动力学、血浆一氧化氮(NO)/内皮素-1(ET-1)的影响。方法选择2022年6月至2023年5月浙江省苍南县中医院择期开展腹腔镜胆囊切除术的美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅱ级患者60例为研究对象,依据随机数字表法,分艾司氯胺酮组与舒芬太尼组,各30例。艾司氯胺酮组使用艾司氯胺酮静吸复合麻醉,舒芬太尼组使用舒芬太尼静吸复合麻醉。比较2组麻醉前(T_(1))、气腹前(T_(2))、气腹后20 min(T_(3))、解除气腹后20 min(T_(4))舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、心率、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、血浆NO与ET-1水平及不良反应发生状况。结果T_(1)、T_(4)时间点,2组DBP、SBP、PaCO_(2)、心率差异无统计学意义(P>0.05);T_(2)、T_(3)时间点,2组DBP、心率水平均低/慢于T_(1),艾司氯胺酮组心率快于舒芬太尼组、PaCO_(2)低于舒芬太尼组(P<0.05);T_(1)2组在T_(1)时间点血浆NO、ET-1水平差异无统计学意义(P>0.05);T_(2)、T_(3)、T_(4)时间点艾司氯胺酮组血浆NO水平低于舒芬太尼组,ET-1水平高于舒芬太尼组(P<0.05);2组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论相较于舒芬太尼静吸复合麻醉,艾司氯胺酮能够较好地维持腹腔镜胆囊切除术患者血流动力学稳定与血浆NO/ET-1的平衡,同时不增加不良反应发生率,值得推广应用。

Caveolin-1与内皮型一氧化氮合成酶在门静脉高压症性血管病变中的表达

目的检测肝硬化门静脉高压症病人的脾血管中小凹蛋白caveolin-1、内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的mRNA及蛋白表达水平的变化,探讨caveolin-1的表达对eNOS的影响。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测27例肝硬化门静脉高压症病人脾静脉组织和20例脾外伤病人正常脾静脉血管中caveolin-1和eNOS的mRNA;Western Blot检测caveolin-1和eNOS的蛋白表达水平变化。结果肝硬化门静脉高压症组脾静脉Caveolin-1 mRNA与对照组脾静脉组织表达分别为(0.73±0.18)、(0.38±0.12),两组比较差异有显著性(p<0.05);肝硬化门静脉高压症组脾静脉eNOS mRNA为(0.23±0.11),显著低于对照组内脾静脉组织eNOS mRNA的表达(0.47±0.15)(p<0.05)。Western Blot检测caveolin-1在肝硬化门静脉高压症组脾静脉中较正常脾静脉中表达明显增强;eNOS在肝硬化门静脉高压症组脾静脉中呈低水平表达,较正常脾静脉中表达明显减少。结论肝硬化门静脉高压症组脾静脉中caveolin-1的过量表达及eNOS表达降低,导致NO合成减少,脾静脉血管阻力持续增加,及caveolin-1致静脉血管病理改变作用,共同作用致脾静脉出现对门静脉高压失代偿改变。

脂蛋白相关磷脂酶A2、一氧化氮与内皮素-1比值对急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入术后冠状动脉无复流的预测价值

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、一氧化氮与内皮素-1比值(NO/ET-1)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后冠状动脉无复流(CNR)的预测价值。方法选取2019年1月至2022年10月廊坊市第四人民医院行急诊PCI的ACS患者289例,根据PCI术后心肌梗死溶栓(TIMI)分级分为无复流组(TIMI分级≤2级)50例和正常血流组(TIMI分级3级)239例。收集患者临床资料,采用多因素Logistic回归分析ACS患者PCI术后CNR的影响因素,采用ROC曲线分析Lp-PLA2、NO/ET-1对ACS患者PCI术后CNR的预测价值。结果两组患者年龄、糖尿病史、吸烟史、舒张压、心功能Killip分级2~3级、术前TIMI分级、肌酸激酶同工酶峰值、心肌肌钙蛋白I峰值、氨基末端脑钠肽前体、D-二聚体、血糖、Lp-PLA2、NO、ET-1、NO/ET-1、发病至再灌注时间,差异有统计学意义(χ2/t=4.168、9.790、7.062、3.337、16.780、6.571、5.904、8.123、9.230、6.409、5.364、9.728、4.135、5.609、6.220、6.504,P<0.05)。年龄、吸烟史、血糖、发病至再灌注时间、Lp-PLA2为ACS患者PCI术后CNR的危险因素(P<0.05),NO/ET-1为ACS患者PCI术后CNR的保护因素(P<0.05)。Lp-PLA2、NO/ET-1预测ACS患者PCI术后发生CNR的曲线下面积分别为0.803、0.782,两者联合预测的曲线下面积为0.896,高于单独预测的曲线下面积(Z=4.193、4.815,P<0.05)。结论Lp-PLA2、NO/ET-1对ACS患者PCI术后发生CNR有预测价值,两者联合预测价值更佳。

基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶信号通路,浅谈中医药治疗慢传输型便秘的研究进展

慢传输型便秘(Slow Transit Constipation,STC)是一种慢性功能性肠病,其主要特征为结肠传导动力不足,结肠传输速度缓慢,致肠内容物排出时间延长,淤积于肠道,不能顺畅排出体外。STC的病因及发病的机制复杂,目前尚无统一定论,大多数观点认为STC的病因及发病机制与Cajal间质细胞功能异常、水通道蛋白异常表达、肠神经功能病变、胃肠神经递质的异常分泌、肠道微生态紊乱及精神心理障碍等有关。近年来,细胞信号转导通路的异常改变,导致细胞信号转导通路下游的相关分子及蛋白的异常表达导致STC的发病,逐渐引起广大临床学者的关注。基于细胞信号转导通路,探讨STC的研究逐渐增多。大量研究表明,中医药治疗STC具有层次多、靶点丰富且通路广泛的优势,并且临床疗效显著。其中的机制也引起广大临床研究者的好奇。磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(Endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS)细胞信号转导通路是近年来中医药治疗STC研究的热点通路之一。故文章基于PI3K/Akt/eNOS细胞信号转导通路,探讨中医药治疗STC的研究进展,以期为厘清STC的病因及发病机制提供些许理论支撑,为中医药治疗STC提供现代理论支持,为后期开展更深层次的STC的研究作铺垫。

一氧化氮和内皮型一氧化氮合成酶与血管迷走性晕厥发病的关系

目的探讨一氧化氮和内皮型一氧化氮合成酶与儿童血管迷走性晕厥发病的关系。方法血管迷走性晕厥患儿14例(A组),其他原因引起晕厥患儿10例(B组),健康志愿者20例(C组)。于倾斜试验(HUT)前和倾斜不同时间测定A组与B组患儿的血浆一氧化氮(NO)水平,同时对3组儿童进行内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因G894T多态性检测。结果①A组患儿出现阳性反应时血浆NO水平较平卧时显著升高(76.7±9.6vs 90.0±11.4μmol/L,P<0.05);②A组患儿在症状好转后血浆NO水平较试验前显著降低(82.7±9.2 vs61.5±6.9μmol/L,P<0.01);③B组患儿倾斜时血浆NO水平较平卧时差异无显著性;④A,B两组患儿的血压、心率变化与NO水平无显著相关性;⑤A组患儿eNOS基因G894T突变型基因频率显著高于B组与C组(42.9%vs10%,P<0.05)。结论倾斜体位时血浆NO水平异常升高可能参与了血浆血管迷走性晕厥的发病机制,而其升高水平可能与eNOS基因G894T多态性表达有关。[中国当代儿科杂志,2008,10(4):478-480]

回转模拟失重对静脉内皮细胞血管生成能力的影响及内皮型一氧化氮合成酶的作用

目的 观察回转器模拟失重对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC-C)血管生成能力的影响,并分析探讨可能涉及的关键信号分子内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitricoxide synthetase,eNOS)的作用。方法体外培养HUVEC-C,随机分为回转模拟失重组、1 G静止对照组及回转+抑制剂组,选用内皮型一氧化氮合成酶的特异性抑制剂L-NAME(N-nitro-L-arginine methyl es-ter hydrochloride)。Matrigel胶小管形成实验观察不同处理组HUVEC-C血管生成能力的变化情况。RT-PCR和Western blot分别检测模拟失重前、后HUVEC-C中eNOS mRNA和蛋白的表达变化。结果24 h模拟失重使HUVEC-C的血管生成能力较对照组明显增强(P<0.01),且这种增强效应可以被L-NAME所抑制。模拟失重24 h后,HUVEC-C中eNOS mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P<0.05)。结论回转模拟失重可以诱导HUVEC-C血管生成能力增强,其发生机制与eNOS表达上调有关。

利伐沙班对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的探讨利伐沙班(RIV)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能损伤的影响。方法根据干预措施,将实验分为空白对照组(A组,常规培养液),Ox-LDL组(B组,100μg/mL Ox-LDL的培养液),Ox-LDL+RIV125组(C1组,100μg/mL Ox-LDL和125 ng/mL RIV的培养液),Ox-LDL+RIV250组(C2组,100μg/mL Ox-LDL和250 ng/mL RIV的培养液)和Ox-LDL+RIV500组(C3组,100μg/mL Ox-LDL和500 ng/mLRIV的培养液),各组细胞均处理48 h。采用CCK-8法检测各组细胞存活率的变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用免疫印迹(Western blot)法检测细胞核因子-κB(NF-κB)和尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)蛋白表达水平。结果与B组比较,C1组、C2组、C3组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和uPAR表达水平均显著降低(P<0.05);C3组IL-1β,TNF-α,IL-6水平和p-NF-κB p65表达水平显著降低(P<0.05)。结论RIV能显著恢复细胞活力、减少细胞凋亡和由Ox-LDL引起的炎性反应,可能通过NF-κB和uPAR的调节而发挥作用。

基因治疗原发性高血压的新途径:内皮型一氧化氮合成酶CDNA腺病毒载体在人胎肾293细胞的表达

研究内皮型一氧化氮合成酶（endothelialnitric oxide synthase,eNOS)CDNA 腺病毒载体 PadRSVeNOSCDNA 导入在人胎肾 293细胞 ( )中的表达。方法:大量制备及纯化质粒 eNOSCDNA ,将纯化eNOSCDNA 载体通过脂质体转染 293细胞48h 后,应用化学比色法测定293细胞提取物NOS 活性。结果:被转染 293细胞 NOS活性显著提高于未转染293细胞 NOS 活性犤( 0.62±0.03),(0.093±0.01)kU /L,P <0.001犦。结论:PA dRSVeNOSCDNA 导入人胎肾 293细胞是一种能使 NOS 活性显著升高的方法,为基因治疗原发性高血压及肾脏血管性疾病研究提供一条新的途径。

高糖对内皮型一氧化氮合成酶的表达及功能的影响

目的 :研究高糖对内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达及其功能的影响。方法 :将分离的小牛主动脉内皮细胞在含有不同浓度右旋葡萄糖的DMEM中培养 2 4小时。内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达分别以RT -PCR和WesternBlotting方法进行分析 ,其产物一氧化氮以高效液相层析法 (HPLC)测定。结果 :与低糖(5 6mM)相比高糖 (12 5mM ,2 5mM)可以刺激内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达 ,并伴有一氧化氮的浓度降低。结论 :高糖可致内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达增加 ,并可能导致其功能障碍。

内皮细胞型一氧化氮合成酶Glu298Asp基因多态性与牙周炎伴Ⅱ型糖尿病的相关性研究

目的研究内皮细胞型一氧化氮合成酶(eNOS)Glu298Asp基因多态性与牙周炎伴Ⅱ型糖尿病易感性的关系。方法收集慢性牙周炎患者、慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病患者、Ⅱ型糖尿病患者和牙周健康者的颊黏膜拭子,提取DNA后应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测eNOS Glu298Asp的基因型分布。结果慢性牙周炎组、Ⅱ型糖尿病组、慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病组、正常组eNOS Glu298Asp基因型的分布差异有统计学意义(掊2=18.503,P=0.005),等位基因频率分布差异也有统计学意义(掊2=8.243,P=0.041)。慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病组与正常组相比,T基因型的OR值为0.962,95%可信区间为0.737～1.256,说明T基因型可能为糖尿病和牙周炎的保护因素;G基因型的OR值为1.043,95%可信区间为0.781～1.391,说明G基因型可能为二者的危险因素,但差异无统计学意义。结论慢性牙周炎、慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病、糖尿病的易感性可能与eNOS Glu298Asp多态性有关。

冷应激溃疡大鼠下丘脑和肾上腺一氧化氮合成酶2与内皮素-1表达及针刺保护机制的研究

目的观察针刺足三里穴对急性胃溃疡的保护效应 ,并探讨其作用机理。方法将SD雄性大鼠随机分为正常对照组、单纯应激组、针刺预防应激组 ,应用胃粘膜溃疡指数的计算和RT PCR的方法研究针刺足三里对大鼠的冷应激性溃疡的保护和下丘脑及肾上腺一氧化氮合成酶 (NOS) 2和内皮素 (ET) 1的表达情况 ,经图像分析系统照相并进行半定量。结果针刺足三里穴可以明显减少冷应激造成的溃疡指数。下丘脑NOS2和ET 1均参与了冷应激溃疡病理过程 ,针刺足三里穴可以下调其表达。在应激过程中 ,肾上腺中并无NOS2和ET 1的病理性表达。结论针刺对冷应激溃疡具有保护作用 ,该种保护作用是通过对抑制下丘脑NOS2和ET 1的病理性表达来实现的 ,NOS2和ET 1在肾上腺中不参与应激过程。

蛋白激酶C-ε在丙泊酚诱导内皮源性一氧化氮合成酶激活中的作用

目的在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)模型中观察丙泊酚对内皮源性一氧化氮合成酶(eNOS)的激活效应,探讨蛋白激酶C-ε(PKC-ε)对药物引起eNOS激活的调节作用。方法以体外培养的人HUVECs 3～5代作为实验对象。用丙泊酚(0、1、5、10、50、100μmol/L)分别处理细胞1和24 h,分析药物激活eNOS的量效关系;用丙泊酚5μmol/L和50μmol/L分别处理细胞0 min、5 min、1 h、6 h和24 h,分析药物激活eNOS的时效关系。细胞随机分为:①正常对照组;②PKC-ε假底物+丙泊酚5μmol/L组;③PKC-ε假底物+丙泊酚50μmol/L组;④单独PKC-ε假底物组;⑤单独丙泊酚50μmol/L组;⑥10%长链脂肪乳组。各组分别处理细胞1和24 h。Western blotting分析PKC-ε、eNOS、P-Ser1177-eNOS蛋白的表达。结果丙泊酚呈剂量、时间依赖性上调P-Ser1177-eNOS蛋白的表达。处理细胞24 h时,与单独丙泊酚50μmol/L组相比,PKC-ε假底物+丙泊酚50μmol/L组P-Ser1177-eNOS蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论丙泊酚呈剂量、时间依赖性诱导eNOS的激活,PKC-ε参与介导药物对eNOS的激活效应。

胎龄≤34周的汉族早产儿脐带血内皮型一氧化氮合成酶基因多态性及其与早产儿主要并发症的关系研究

目的探讨新乡市汉族早产儿脐带血内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因的多态性,并研究这种多态性与早产儿主要并发症的关系。方法选择2014年2月—2016年12月于新乡市中心医院出生的≤34周的早产儿231例为研究对象,母亲分娩时取脐带血,测定eNOS基因3个位点rs2070744、rs1799983和rs61722009的基因型和等位基因。记录早产儿的临床资料,分析eNOS基因多态性与早产儿主要并发症的关系。结果 rs2070744 C、rs1799983 T和rs61722009 a的等位基因频率分别是0.145、0.188和0.159。与Ensembl数据库中已知研究比较,差异无统计学意义(χ~2=0.875,P=0.646;χ~2=3.541,P=0.173)。单因素分析结果示rs2070744 TC+CC基因型和rs1799983GT+TT基因型与支气管肺发育不良有关(crude OR=0.370、0.484,P=0.003、0.030)。多因素Logistic回归分析结果示rs2070744 TC+CC基因型是支气管肺发育不良的独立危险因素(OR=1.875,P=0.020);rs61722009 aa+ab基因型和rs1799983 GT+TT基因型同时存在是早产儿视网膜病变Ⅲ~Ⅴ期的独立危险因素(OR=2.961,P=0.041)。结论 eNOS基因多态性与早产儿主要并发症的发生有关,脐带血测定早产儿eNOS基因多态性有助于评估患儿预后。

小凹蛋白与内皮型一氧化氮合成酶在大鼠肝硬化组织中的表达

目的探讨小凹蛋白Caveolin-1、内皮型一氧化氮合成酶eNOS在大鼠肝硬化组织中的异常表达及其意义。方法构建二甲基亚硝胺(DMN)致肝纤维化大鼠模型,在造模4周后观察肝纤维化程度。免疫组织化学染色检测30例大鼠肝硬化肝组织和30例正常大鼠肝组织中Caveolin-1和eNOS的细胞定位;Western Blot检测Caveolin-1和eNOS的蛋白表达水平变化。结果Caveolin-1和eNOS均主要分布于肝窦内皮细胞中,Caveolin-1在肝硬化组表达阳性率为90%,对照组为37%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);eNOS在肝硬化组表达阳性率为30%,对照组为66%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot检测Caveolin-1在肝硬化组织中较正常肝组织中表达明显增强;eNOS在肝硬化组织中呈低水平表达,较正常肝组织中表达明显减少。结论肝硬化肝窦内皮细胞中Caveolin-1的异常表达促进eNOS-Caveolin-1复合物的生成,结合形式的eNOS活性降低,导致NO合成减少,肝内血管阻力持续增加,从而导致了门静脉高压症的形成。

缺氧诱导因子-1α、诱导型一氧化氮合成酶及环氧合酶-2在慢性高眼压大鼠视网膜中的表达

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)的表达与高眼压视网膜损伤的关系,为青光眼视网膜缺氧提供证据。方法用巩膜静脉烧烙法在50只SPF级Wistar大鼠的双眼制作慢性高眼压模型,眼压高于造模前40%以上者为造模成功。按照视网膜取材时间的不同将动物模型眼随机分为高眼压3、7、14、21、28 d组,每组10只大鼠20只眼。另选取10只匹配大鼠作为假手术对照组,仅作球结膜切开。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及Western blot法检测各组视网膜组织中HIF-1α、iNOS、COX-2 mRNA及其蛋白在大鼠视网膜中的表达。结果 HIF-1α、iNOS、COX-2 mRNA及蛋白在假手术组大鼠视网膜中呈微弱表达,造模眼HIF-1α、iNOS、COX-2 mRNA及其蛋白在视网膜中的表达水平明显升高,于7 d时达到高峰,随后有所下降,但仍明显高于正常组的表达水平。造模后3、7、14、21、28 d组大鼠视网膜中HIF-1α、iNOS、COX-2 mRNA及其蛋白的表达与假手术组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α、iNOS、COX-2的低氧信号途径是青光眼神经变性发生发展中重要的病理生理机制。

低氧对大脑皮层微血管内皮细胞诱导型一氧化氮合成酶表达的影响

未研究采用反转录多聚酶链反应技术观察了低氧对培养的大鼠大脑皮层微血管内皮细胞中诱导型一氧化氮合成酶基因表达的影响。发现经３％Ｏ２（培养液中氧分压为６．７ｋＰａ）作用２４小时后，能够明显诱导内皮细胞中该型合成酶基因的表达，且在复氧１２小时后，仍不能消除上述作用；而１１％Ｏ２（培养液中氧分压为１０．７ｋＰａ）作用相同时间，则不能诱导该酶的表达。结果表明，较严重的低氧条件可以直接诱导一氧化氮合成酶的表达，提示ＮＯ在低氧下大脑皮层微循环的调节中可能起重要作用。

内皮型一氧化氮合成酶基因Glu298Asp多态性与糖尿病肾脏病的关系

目的探讨内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）基因Glu298Asp多态性与糖尿病肾脏病（DIcD）的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）后限制性内切酶消化技术，对在我院就诊的326例中国汉族2型糖尿病（T2DM）患者和215名健康体检者进行Glu298Asp基因型分析。根据尿白蛋白排泄率（UAER）水平将T2DM患者分为3组：UAER正常组（DM组）102例，微量白蛋白尿组（MAU组）81例，临床肾病组（DKD组）143例。选择同时期本院健康体检者215名为对照组。用多因素Logistic回归分析法判定DKD的独立危险因素。结果DKD组与对照组Glu298Asp基因型频率分布存在显著性差异（GG72．72％、GT26．57％、TT0．70％比GG83．41％、GT16．10％、TT0．49％，P=0．019），而DM组和MAU组则与对照组无差异（P〉0．05）。Logistic回归分析显示，年龄、平均动脉压、GT基因型是DKD发生的独立危险因素。结论eNOS Glu298Asp基因与中国汉族T2DM患者DKD具有相关性。