HSH联合PTX复苏液对失血性休克大鼠肺内皮多糖包被的保护作用

目的 探讨高渗盐/羟乙基淀粉溶液联合己酮可可碱复苏对重度失血性休克大鼠肺内皮多糖包被的保护效果及作用机制.方法 将48只SD大鼠按直接抽样法分为对照组(C组)、单纯休克组(NR组)、高渗盐/羟乙基淀粉溶液复苏组(HSH组)及高渗盐/羟乙基淀粉溶液联合己酮可可碱复苏组(HSH联合PTX组),每组12只.C组大鼠给予麻醉处理后,于右股动、静脉进行置管操作;另3组均制作重度失血性休克模型,其中NR组休克后不予复苏,于休克1 h后即行致死处理;HSH组于模型制作完成后应用高渗盐/羟乙基淀粉溶液进行复苏操作;HSH联合PTX组在HSH组基础上加入己酮可可碱进行复苏操作.于休克前、复苏前及复苏后1 h、2h、4 h检测各组大鼠呼吸指数,复苏4 h后行致死操作,对每组大鼠的肺组织予以观察,对比分析其病理学变化、肺组织损伤评分、通透指数与湿干质量比;对各组大鼠的肺组织中细胞间黏附分子-1、乙酰肝素酶以及基质金属蛋白酶-9的浓度进行测定分析.结果 HSH组与HSH联合PTX组复苏后呼吸指数逐渐升高,HSH联合PTX组复苏后各时间点呼吸指数均显著低于HSH组;与C组比较,其余3组肺组织病理学变化明显,肺组织损伤评分、通透指数和湿干质量比均有显著升高(P<0.05),肺组织ICAM-1、HPA、MMP-9浓度显著升高(P<0.05),尤以HSH组和HSHPTX组最为显著(P<0.05);与HSH组比较,HSHPTX组肺组织病理学变化明显,肺组织损伤评分、湿干质量比、通透指数均显著降低(P<0.05),且细胞间黏附分子-1、乙酰肝素酶以及基质金属蛋白酶-9水平显著降低(P<0.05).结论 对重度失血性休克大鼠予以高渗盐/羟乙基淀粉溶液联合己酮可可碱进行复苏操作,能有效降低肺组织的损伤程度;其作用机制可能与稳定肺血管内皮细胞多糖包被,降低肺血管通透性有关.

电刺激迷走神经对内毒素血症大鼠内皮多糖蛋白包被的保护作用

目的 观察电刺激迷走神经对内毒素血症大鼠内皮多糖蛋白包被（EG）的影响.方法 成年雄性SD大鼠30只,体质量250 - 300 g,随机分为3组：生理盐水组（S组）、内毒素血症组（LPS组）和迷走神经电刺激组（VNS组）,每组10只.各组大鼠建模成功4h后均做以下检查：动脉血肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度;动脉血EG脱落标志物蛋白聚糖-1（Syn-1）、透明质酸（HA）和硫酸化素（HS）浓度;电镜观察小肠肠系膜小静脉EG的变化.结果 S组血浆TNF-α、Syn-1、HA和HS浓度分别为：（34.14 ±4.94） ng/L、（53.8±17.09）、（52.22±15.15）、（0.61 ±0.14） μg/L;LPS组上述4种物质浓度分别为：（222.82±13.44） ng/L、（95.10±33.54）、（108.43 ±23.66）、（2.40±1.15） μg/L,较S组显著升高（P＜ 0.01）;VNS组上述4种物质浓度分别为：（103.04±7.18） ng/L、（59.32±18.65）、（58.8 ±15.67）、（1.00±0.15） μg/L,显著低于LPS组（P＜0.01）.电镜下可观察到S组大鼠肠系膜小静脉具有完整连续的EG,而LPS组EG脱落明显,VNS组则未见明显EG脱落.结论 电刺激迷走神经对内毒素血症大鼠的内皮多糖蛋白包被可产生保护作用,其机制可能与胆碱能抗炎通路拮抗全身性炎性反应有关.

内皮多糖蛋白包被在液体过负荷治疗中的意义

目的观察内皮多糖蛋白包被在液体过负荷治疗中的变化,探讨其变化产生的意义。方法57例液体过负荷的患者被纳入,入组后在0、12、24、48、72 h留取血、尿液,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测清除液体负荷的过程中内皮多糖蛋白包被脱落成分,即透明质酸(HA)、黏结合蛋白多糖-1(Syn-1)、硫酸乙酰胺肝素(HS)、硫酸软骨素(CS)的变化。结果液体负荷过重的患者在达到液体清除目标后,血中Syn-1和HA水平较治疗前明显下降:(1.6±0.5)μg/ml比(4.6±0.8)μg/ml、(169.1±44.4)μg/ml比(369.8±79.2)μg/ml,P<0.05;HS、CS与治疗前比较差异无统计学意义[(436.9±106.2) pg/ml比(437.1±105.7) pg/ml、(7.8±4.2)μg/ml比(8.3±5.3)μg/ml,P>0.05]。在48 h达到清除目标的患者,容量清除最多,并且HA、Syn-1下降最明显,与其他时间比较P<0.05。胸心外科术后患者比非胸心外科术后患者血浆HA浓度明显下降[(3.0±1.0)μg/ml比(2.1±0.3)μg/ml,P<0.01;连续性肾替代治疗(CRRT)和NCRRT两组之间无论血浆、尿液还是CRRT废液差异均无统计学意义(P>0.05)。结论液体过负荷可使血浆中内皮多糖蛋白包被成分增加,液体清除后可降低血浆中内皮多糖蛋白包被成分,改善微循环。

高迁移率族蛋白B1在脂多糖诱导的ALI/ARDS中的作用机制研究

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)中的作用及可能的发病机制。方法①体内实验:将24只SPF级野生C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组、ALI/ARDS模型组、丙酮酸乙酯(EP)治疗组和EP对照组,每组6只。采用腹腔注射20 mg/kg LPS制备ALI/ARDS模型,正常对照组和EP对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水;之后EP治疗组和EP对照组小鼠分别腹腔注射40 mg/kg HMGB1抑制剂EP。6 h后处死小鼠取肺组织,采用免疫荧光技术检测小鼠肺组织硫酸乙酰肝素(HS)、多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)、乙酰肝素酶(HPA)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达。取小鼠眼眶血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HMGB1含量。②体外实验:将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为正常对照组、HUVECs损伤组(1 mg/L LPS处理6 h)、HMGB1组(1μmol/L重组HMGB1处理6 h)、HMGB1+EP组(重组HMGB1处理1 h后加入1μmol/L EP处理6 h)、LPS+EP组(LPS处理1 h后加入1μmol/L EP处理6 h)和EP组(1μmol/L EP处理6 h)。采用免疫荧光技术检测内皮细胞HS、SDC-1、HPA和MMP-9的表达。结果①体内实验:光镜下显示,LPS制模后肺泡间隔增厚,肺泡间隙有大量炎症细胞浸润。与ALI/ARDS模型组相比,EP治疗组小鼠肺组织HS和SDC-1表达量均明显升高〔HS(荧光强度):0.80±0.20比0.53±0.02,SDC-1(荧光强度):0.72±0.02比0.51±0.01,均P<0.05〕,HPA和MMP-9表达量均明显降低〔HPA(荧光强度):2.36±0.05比3.00±0.04,MMP-9(荧光强度):2.55±0.13比3.26±0.05,均P<0.05〕;EP对照组上述指标表达量均无明显变化。与ALI/ARDS模型组相比,EP治疗组血清HMGB1含量明显降低(μg/L:131.88±16.67比341.13±22.47,P<0.05);EP对照组无明显变化。②体外实验:与HMGB1组相比,HMGB1+EP组内皮细胞HS和SDC-1表达量均明显升高〔HS(荧光强度):0.83±0.07比0.56±0.03,SDC-1(荧光强度):0.80±0.01比0.61±0.01,均P<0.05〕,HPA和MMP-9表达量均明显降低〔HPA(荧光强度):1.30±0.02比2.29±0.05,MMP-9(荧光强度):1.55±0.04比2.50±0.06,均P<0.05〕;EP组HS、SDC-1、HPA和MMP-9表达量均无明显变化。结论HMGB1参与LPS所致内皮细胞多糖包被的损伤,导致肺通透性增加,抑制HMGB1可减轻肺损伤。