血管内皮屏障功能损伤在疾病中的研究进展

许多疾病都具有血管渗漏的共同特征,内皮屏障功能损伤通常是其根本原因。内皮屏障是内皮细胞在血管腔和血管壁之间形成的独特屏障,具有选择性透过作用,对维持血管、组织和器官间的稳态至关重要。血管渗漏是由内皮细胞之间的间隙以及跨细胞转运途径的改变引起的。改善内皮屏障功能的具体机制取决于受影响的组织和引起高通透性的原因。本文综述了以内皮屏障破坏为特征的疾病,重点讨论了内皮屏障功能在急性肺损伤、缺血性脑卒中以及糖尿病并发症中的作用机制及其药物干预进展。

内皮细胞和细胞外基质的粘附对内皮屏障功能的影响

内皮细胞和细胞外基质（ＥＣＭ）的粘附对于内皮屏障的结构完整是非常重要的，构成这一结构的有细胞外粘附蛋白和细胞内骨架蛋白，参与其调控的有整合素、粘着斑激酶（ＦＡＫ）及胞浆内的多种信号转导蛋白（如ＭＡＰＫ等）。本文从内皮胞和细胞外基质的粘附以及参与其调控的信号转导蛋白等方面进行综述。

红霉素改善百草枯致损血管内皮细胞屏障功能的分子机制

目的观察红霉素对百草枯所致血管内皮细胞屏障功能损伤的保护作用,并探讨可能的分子机制。方法采用"二室弥散装置"体外培养人脐静脉内皮细胞。设立百草枯组(P)、百草枯+红霉素组(P+E)、正常对照组(N),利用免疫荧光、放射免疫法分别检测各种因素下单层血管内皮细胞屏障对大分子物质的通透性变化;内皮细胞骨架蛋白F-actin形态分布以及含量变化;内皮细胞内cAMP浓度的变化。结果P组24 h后内皮细胞通透性较其它两组高(P<0.05或P<0.01),且随时间延长逐渐升高(P<0.01),引起细胞骨架F-actin重构和含量增加(P<0.05),同时伴内皮细胞内cAMP浓度降低(P<0.05);而P+E组细胞通透性24 h内升高,但36 h后明显改善(P<0.01),胞浆内F-actin逐渐减少,细胞周边增多,48 h细胞轮廓逐渐清晰,cAMP浓度也随时间延长而升高(P<0.01)。P组和P+E组内皮细胞通透率与细胞内cAMP浓度均呈负相关(r=-0.913,-0.648,P<0.05),而与F-actin含量变化均呈正相关(r=0.921,0.817,P<0.05)。结论红霉素能降低细胞通透性,升高内皮细胞cAMP浓度,稳定细胞骨架,这可能是改善百草枯致损血管内皮细胞屏障功能的机制。

乌司他丁对炎症状态下血管内皮屏障功能的影响及机制

目的阐明乌司他丁(UTI)对炎症状态下血管内皮屏障功能的影响及具体分子机制。方法以人脐静脉内皮细胞系EA.hy926为研究对象,建立炎症细胞模型及RhoA过表达细胞模型,分别用UTI和TNF-α处理细胞,采用Transwell法、TEER法检测细胞通透性;Western Blot法及RT-PCR法检测Rho/ROCK信号通路相关关键分子(RhoA、ROCK2、MYPT1、p-MYPT1及VEcadherin)的表达变化情况。结果与正常对照组相比,TNF-α作用后EA.hy926细胞电阻值明显降低,细胞通透性显著升高,差异具有统计学意义[(33.67±4.04)Ω/cm2 vs(67.17±3.81)Ω/cm2,t=10.435,P<0.01],细胞内RhoA、ROCK2、p-MYPT1的表达量明显增加,差异具有统计学意义(均P<0.05),VE-cadherin的表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而UTI可逆转上述变化情况;与UTI处理组相比,RhoA过表达细胞模型中RhoA、ROCK2及p-MYPT1的表达显著增高,VE-cadherin表达降低,细胞通透性增加,差异具有统计学意义(均P<0.05),而空载病毒组中上述分子的表达水平以及细胞通透性无明显变化,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论UTI能通过Rho/ROCK信号通路抑制TNF-α引起的血管内皮细胞通透性增加,改善血管内皮屏障功能障碍。

炎症反应与血管内皮屏障功能调节的研究

血管内皮包括内皮细胞(EC)单层和基膜,是血管腔面的一层半选择性通透屏障。血管内外溶质和液体的交换受内皮通透性大小控制。通透性是检测内皮屏障功能的客观计量指标。许多炎性、成血栓性介质均可损伤内皮屏障功能,导致其通透性增高,血浆蛋白渗出,引起组织、器官水肿和功能障碍。血管内皮屏障功能障碍是炎症的主要特征之一,并参与肿瘤转移、免疫反应及多器官功能障碍的发生[1]。

S1P信号通路:上皮细胞和内皮细胞屏障功能调控的新靶点

1-磷酸鞘氨醇(S1P)是一种具有多种生物活性的鞘脂类代谢产物,通过激活G蛋白偶联受体S1PRs调节重要的生理功能。S1P是维持上皮细胞和内皮细胞屏障功能重要的信号分子,S1P信号通路通过调节黏附连接和紧密连接组装、细胞骨架重排、黏着斑形成,发挥对屏障功能的调控作用,因此S1P信号通路可能成为改善急性肺损伤、炎症性肠病和败血症等疾病中屏障功能紊乱的新靶点。本文对S1P信号通路在上皮细胞和内皮细胞屏障功能调控中的作用及其在屏障功能破坏相关性疾病模型中的保护作用的研究进展进行综述,以期为开发治疗屏障功能破坏相关性疾病的新药提供理论参考。

通腑泻肺颗粒调控MLCK-pMLC通路影响急性肺损伤小鼠肺屏障功能的研究

目的探讨通腑泻肺颗粒对急性肺损伤小鼠肺屏障功能的作用及可能机制。方法将SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、对照组、模型组、治疗组和激动组,每组25只。模型组、治疗组和激动组采用脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤模型;治疗组于注射LPS 30 min后灌胃通腑泻肺颗粒;激动组注射肌球蛋白轻链激酶(MLCK)激动剂P物质(SP)15 min后注射LPS,30 min后灌胃通腑泻肺颗粒。造模16 h后,颈动脉放血处死小鼠,光学显微镜下观察各组小鼠肺组织病理切片;测定小鼠肺组织湿/干重比;Evans Blue法检测肺血管通透性;BCA法检测支气管肺泡灌洗液中总蛋白浓度,并计数肺泡灌洗液中白细胞总数;qRT-PCR法检测肺组织中带状闭合蛋白-1(ZO-1)、血管内皮细胞钙依赖性黏附素(VE-cadherin)mRNA表达水平,Western Blot法检测肺组织中ZO-1、VE-cadherin、MLCK、磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)蛋白表达水平。结果治疗组小鼠肺部炎症反应减轻,且肺血管通透性、肺组织湿/干重比、肺泡灌洗液中总蛋白水平及白细胞数量均显著低于模型组及激动组(P均<0.05);治疗组小鼠肺组织中ZO-1、VE-cadherin mRNA及蛋白表达水平均明显高于模型组和激动组(P均<0.05),MLCK、pMLC蛋白表达水平均明显低于模型组和激动组(P均<0.05)。结论通腑泻肺颗粒可以显著改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤的肺部屏障功能,机制可能为其可抑制MLCK-pMLC通路活性,维持肺血管内皮通透性,从而减轻肺部炎性渗出及肺水肿。

山楂承气汤对急性坏死性胰腺炎伴高三酰甘油血症大鼠肠屏障功能障碍干预机制研究

目的:探讨水通道蛋白-1(AQP-1)在急性坏死性胰腺炎伴高三酰甘油血症大鼠肠屏障功能障碍发病机制中的作用及山楂承气汤对其表达的影响。方法:雄性SD大鼠为研究对象,随机分为对照组、急性坏死性胰腺炎伴高三酰甘油血症(HANP)组、辛伐他汀联合奥曲肽(HX)组和山楂承气汤(HS)组,碘-淀粉酶比色法测定血清淀粉酶含量,ELISA法测定血清三酰甘油、游离脂肪酸、AQP-1及肿瘤坏死因子-α浓度,并用HE染色法观察小肠组织病理改变,EB血管外渗法检测小肠组织毛细血管通透性,FQ-PCR法测定小肠组织AQP-1蛋白及Western Blot法测定AQP-1 mRNA表达。结果:HANP组、HX组及HS组血清淀粉酶、三酰甘油、游离脂肪酸及肿瘤坏死因子-α水平显著高于对照组(P<0.05);HS组及HX组与HANP组相比显著降低(P<0.05),HX组较HS组显著下降(P<0.05)。HANP组、HX组及HS组AQP-1蛋白及mRNA含量显著低于对照组(P<0.05);HS组及HX组较HANP组显著升高(P<0.05)。HS组及HX组小肠组织病理改变较HANP组减轻;与HANP组相比,HX组与HS组小肠组织毛细血管通透性均明显降低(P<0.05)。结论:山楂承气汤能够明显改善模型大鼠生化及病理损伤,对毛细血管通透性增高引起的毛细血管渗漏亦有一定的抑制作用,其机制可能是通过调控AQP-1的表达来实现的。

血清5′-核苷酸酶在肝胆疾病及肿瘤诊断中的应用

5′-核苷酸酶是催化核苷酸分子中磷酸键水解的一种特异性磷酸酶,在细胞生长、运动、纤维蛋白合成、神经传递、提高表皮或内皮屏障功能及淋巴细胞的黏附、再循环、免疫应答等方面均发挥重要作用[1]。广泛存在于组织的细胞膜上,除存在于肝胆外,还常见于脑、心、肺、小肠、肾小管等[2]。但释放进入血液循环的5′-核苷酸酶仅来源于肝胆组织。

血必净可通过抑制蛋白酶激活受体1信号途径减轻热损伤诱导的内皮屏障破坏

血管通透性增加导致急性肺损伤（ALI）和急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是中暑热休克病理生理的核心。蛋白酶激活受体1（PAR1）是凝血酶受体，在响应细胞外刺激导致内皮屏障功能破坏中起关键作用。然而，PAR1在热应激诱导内皮通透性中的作用是未知的。因此，近期国内学者进行了一项实验研究，检测经热刺激处理的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中PAR1蛋白的表达；通过应用小干扰RNA（siRNA）、特异性中和抗体和血必净，观察PAR1对血管内皮细胞通透性、F-肌动蛋白重排和膜突蛋白磷酸化的影响；评价给予PAR1抑制剂RWJ56110、抗PAR1抗体和血必净对热休克相关ALI/ARDS小鼠PAR1的抑制作用。实验结果显示：热应激2 h后可诱导内皮细胞PAR1蛋白表达，引起内皮细胞基质金属蛋白酶1（一种PAR1激活剂）的释放；经过60 min或120 min热刺激后，可促进血管内皮细胞通透性增加和F-肌动蛋白重排，该效应可通过RWJ56110、抗PAR1抗体和siRNA所抑制。PAR1介导膜突蛋白磷酸化，可导致F-肌动蛋白重排和内皮屏障功能的破坏。为证实体外实验的研究结果，分别给中暑小鼠体内注射RWJ56110和抗PAR1抗体两种PAR1抑制剂，结果显示，二者均可显著减轻实验动物肺水肿、肺微血管通透性、蛋白渗出和白细胞浸润。此外研究者还发现，血必净可抑制PAR1膜突蛋白信号通路；体内外实验显示其具有维持内皮屏障功能的作用。这些结果表明，PAR1可能是中暑患者潜在的治疗靶点。

鞘氨醇-1-磷酸在脓毒症中调节作用的研究进展

鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是具有多种生物活性的鞘磷脂代谢产物,通过激活细胞膜表面的G蛋白偶联受体即S1P受体(sphingosine-1-phosphate receptors,S1PRs),参与细胞生长和凋亡、免疫与凝血系统调节等多种生理功能。脓毒症是由于感染引起免疫反应失调所致的严重危及生命的疾病,常导致多器官功能障碍甚至衰竭。脓毒症导致的器官衰竭主要与内皮细胞和免疫细胞在炎症环境中的病理生理变化有关,包括血管通透性增加、血栓形成、炎症及免疫反应失调。S1P可参与调节脓毒症的多种病理生理过程,有望成为预测脓毒症患者病情严重程度的重要标志物,也是治疗脓毒症的潜在靶点。本文通过对S1P在脓毒症发生发展过程中的调节作用及相关临床研究进行总结,旨在为该领域的后续研究提供参考。

C6脑胶质瘤血管通透性增高及其机制的实验研究

胶质瘤赖以生存的大量新生血管不同于正常脑血管，其内皮屏障功能不完善，但大多化疗药物仍不能通过肿瘤血管，在瘤内达到有效治疗浓度。所以提出血-瘤屏障（Blood-tumor barrier，BTB）。研究表明：紧密连接（tight junction，TJ）是保持血脑屏障（BBB）完整性的重要因素，主要由跨膜蛋白和胞质附着蛋白两种成分组成。

细胞凋亡在急性胰腺炎肺损伤中的作用与调控机制

急性胰腺炎（AP）是一种胰酶在胰腺组织异常激活导致自身消化的炎性反应性疾病，常导致系统性炎症反应综合征（SIRS）。特别是重症AP（SAP）发病急、危、重，病死率高，早期容易并发多脏器功能衰竭，尤其是急性肺损伤（ALI）。对AP动物模型研究显示，AP所致肺损伤的特征为弥漫性肺内皮屏障功能破坏（表现为组织水肿、血浆外渗、细胞活化等）、白细胞大量浸润、各种炎性介质释放、肺出血和肺泡细胞损害等。因而认为导致肺损伤的关键一步是各种原因所致肺上皮和内皮屏障破坏，从而导致肺毛细血管通透性增加、肺水肿和肺不张。肺损伤是SAP最常见和最严重的全身并发症之一，呼吸功能障碍的程度表现为轻度的氧合作用不足到急性呼吸窘迫综合征（ARDS），

ADAMTS家族在动脉粥样硬化性疾病中的研究进展

动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）性疾病是人类死亡的第一杀手,其中的心脑血管病已经成为一个全球性的健康问题。动脉粥样硬化（AS）的发病机制非常复杂,是多基因与环境因素相互作用的结果,各种原因导致的内皮细胞损伤,内皮屏障功能被破坏,血液中的单核巨噬细胞、脂质、淋巴细胞及中性多形核白细胞广泛入侵到被剥脱的内皮下组织,发展为粥样斑块,引起血管重构,进一步导致斑块破裂、出血、继发血栓形成等。