内皮特异性分子-1、纤维蛋白原在慢性阻塞性肺疾病急性加重期诊断及病情评估中的价值

目的分析内皮特异性分子-1(Endocan)、纤维蛋白原(Fib)水平在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的诊断、病情严重程度评估中的价值。方法收集苏大附三院2021年4月至2022年4月期间,在呼吸与危重症医学科进行救治的慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者79例为AECOPD组(根据疾病严重程度分为3个亚组),选同期门诊复诊的30例慢性阻塞性肺疾病稳定期(SCOPD)患者为SCOPD组,另选取在本院进行健康体检的30例为对照组。比较各组血清Endocan、Fib水平,分析上述因子在AECOPD诊断中的预测价值。结果AECOPD组和SCOPD组的Endocan、Fib水平均显著高于对照组(均P<0.05),且上述因子水平以AECOPD组最高。在AECOPD各亚组间的比较,发现Endocan、Fib水平差异均有统计学意义(均P<0.05),并随AECOPD级别增高而增加;受试者工作特征曲线分析结果显示,Endocan、Fib的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.729,二者联合检测的AUC更高,为0.855。结论血清Endocan、Fib的表达水平与AECOPD患者的疾病严重程度相关,可作为疾病诊断、病情评估的重要指标,且Endocan的诊断效能优于Fib。

内皮特异性分子-1在乳腺浸润性导管癌中的表达与淋巴管增生的关系

目地:探讨内皮特异性分子(ESM)-1在乳腺浸润性癌淋巴管生成和淋巴道转移中的作用及其与临床病理指标的关系。方法:免疫组化检测108例乳腺浸润性导管癌者的ESM-1表达,D2-40标记淋巴管内皮,并计数微淋巴管密度(LMVD),分析上述指标与临床病理特征的关系。结果:ESM-1主要表达于肿瘤细胞中。ESM-1表达与肿瘤大小,淋巴结转移,LMVD相关(P<0.001)。结论:ESM-1能促进乳腺癌淋巴管增生,并与肿瘤大小和淋巴道转移相关。

目标血糖管理下脓毒症肺损伤大鼠转录激活因子3与内皮特异性分子-1的表达及意义

目的,探讨目标血糖管理下脓毒症大鼠转录激活因子3(Stat3)与内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)表达的相关性及对肺损伤的作用。方法,将40只SD大鼠按随机数表法随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、目标血糖控制A组(4.4-6.1mmol/L)、目标血糖控制B组(6.2-8.3mmol/L)、目标血糖控制C组(8.4-10.0mmol/L)共5组。盲肠穿孔术后12小时处死,用ELISA法检测血清中ESM-1水平,免疫组化染色法检测肺p-Stat3的表达,光镜观察肺组织病理切片并评分。结果,脓毒症组肺组织p-Stat3的表达、血清ESM-1的表达和肺组织病理损伤评分均明显高于假手术组和各血糖控制组(均P<0.05)。血糖控制A组较B组和C组的肺组织p-Stat3的表达、血清ESM-1的表达、肺组织病理损伤评分均明显降低(均P<0.05),但均高于假手术组(P<0.05)。各组大鼠的p-Stat3与血清ESM-1存在正相关性。结论,脓毒症急性肺损伤时炎症因子可通过Jak/Stat途径高表达Stat3进而促进ESM-1的表达、合成和分泌。

宫颈癌患者癌组织中内皮特异性分子-1和血管内皮细胞生长因子蛋白的表达及意义

目的探讨宫颈癌患者癌组织中内皮特异性分子(ESM)-1和血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA表达水平、蛋白阳性表达强度及其临床意义。方法宫颈癌组织(n=150)和癌旁宫颈组织(n=30)样本均来源于吉林省人民医院病理科。采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色法检测两组样本中ESM-1和VEGF mRNA及蛋白阳性强度的表达水平,分析ESM-1和VEGF的表达与宫颈癌临床病理特征的关系及两者的相关性。结果与癌旁宫颈组织比较,宫颈癌组织中ESM-1和VEGF mRNA水平及蛋白阳性表达强度均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ESM-1和VEGF的阳性表达率与临床分期、病理类型及有无淋巴结转移均有明显相关(P<0.05);通过Spearman等级相关分析,ESM-1和VEGF在组织中的mRNA水平及蛋白阳性表达强度均呈正相关(r1=0.529,P1=0.026;r2=0.601,P2=0.035)。结论 ESM-1和VEGF参与宫颈癌的发病机制,二者在癌组织中的mRNA水平及蛋白阳性表达强度明显升高,提示阻断二者的表达可能成为宫颈癌的有效靶向治疗。

内皮细胞特异性分子-1对急性ST段抬高型心肌梗死患者的临床意义

目的探讨内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清中的表达及临床意义。方法选取2019年3月至2021年3月常熟市第二人民医院心内科收治的50例因STEMI行急诊经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)患者作为观察组,选取同期50例冠脉造影检查确定为稳定型心绞痛行PCI的患者作为对照组。比较两组血清ESM-1水平及炎症因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)]含量,分析ESM-1在STEMI型心肌梗死患者血清中的表达及ESM-1和炎症因子的相关性。结果术前,观察组ESM-1、hs-CRP、TNF-α、Lp-PLA2水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1 d,两组ESM-1、hs-CRP、TNF-α、Lp-PLA2水平均高于术前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。多重线性回归分析结果显示,ESM-1与hs-CRP和Lp-PLA2呈明显正相关(P<0.05)。结论ESM-1和炎症因子在STEMI患者血清中的表达水平明显升高,且呈正相关,对STEMI患者进行ESM-1的检测具有重要的临床意义。

内皮细胞特异性分子-1和Presepsin对脓毒症引起的ARDS预后评估价值

目的 探讨血清Presepsin和内皮细胞特异性分子-1 (ESM-1)对脓毒症引起的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)预后评估意义。方法 选择2017年6月至2018年6月首次收治的由脓毒症引起的ARDS患者83例作为研究对象,根据第28天预后将患者分为生存组43例和死亡组40例。在入院第1天使用抗菌药前、第3、7、14天都采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清Presepsin和内皮细胞特异性分子(ESM-1)水平,并行急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分。结果 生存组与死亡组患者的年龄和性别差异均无统计学意义(P均>0.05)。生存组的APACHEⅡ评分、血清Presepsin和ESM-1逐渐降低,而死亡组相反。在第7天、14天生存组的APACHEⅡ评分与死亡组差异有统计学意义(P<0.05);第3、7、14天死亡组的血清Presepsin和ESM-1水平差异均有统计学意义(P均<0.05)。以Presepsin>927.5 pg·mL^(-1)和ESM-1>4.96 ng·mL^(-1)为界值,在灵敏度方面,Presepsin第1天和第3天高于APACHEⅡ评分,在特异度方面,第3、7、14天Presepsin的均高于APACHEⅡ评分(P均<0.05);在灵敏度方面,ESM-1第1天高于APACHEⅡ评分(P<0.05),在特异度方面,第1、3、7、14天ESM-1的评分均高于APACHEⅡ评分(P均<0.05);各时间点血清Presepsin和ESM-1的AUC高于APACHEⅡ评分。结论 血清Presepsin检测能够提高早期脓毒症引起ARDS诊断率,ESM-1检测可以提高其死亡的预测能力。

血清内皮细胞特异性分子-1、降钙素原水平变化与脓毒症患者APACHEⅡ评分的相关性及临床意义

目的探讨血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、降钙素原(PCT)水平变化与脓毒症患者急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ评分)的相关性及临床意义。方法选取2021年1月至2023年1月该院收治的100例脓毒症患者作为研究对象,根据入院28 d后预后情况分为病死组(21例)和存活组(79例)。比较病死组和存活组患者不同时间(入院时、治疗3 d后、治疗7 d后)血清ESM-1、PCT水平,以及不同严重程度患者入院时血清ESM-1、PCT水平及APACHEⅡ评分,分析入院时血清ESM-1、PCT水平与APACHEⅡ评分的相关性、入院28 d后病死的影响因素及治疗3、7 d后血清ESM-1、PCT水平,血清ESM-1、PCT水平联合检测对入院28 d后病死的预测价值。结果病死组患者治疗3、7 d后血清ESM-1、PCT水平均高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05);轻度脓毒症患者入院时血清ESM-1、PCT水平及APACHEⅡ评分均低于重度脓毒症患者和脓毒症休克患者,差异均有统计学意义(P<0.05);入院时血清ESM-1、PCT水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,治疗3、7 d后血清ESM-1、PCT水平升高是脓毒症患者入院28 d后病死的危险因素(P<0.05);受试者工作特征曲线分析结果显示,治疗3 d后血清ESM-1、PCT联合检测预测脓毒症患者入院28 d后病死的曲线下面积(AUC)为0.902,灵敏度、特异度分别为90.48%、78.48%;治疗7 d后血清ESM-1、PCT联合检测预测脓毒症患者入院28 d后病死的AUC为0.929,灵敏度、特异度分别为95.24%、83.54%。结论动态监测血清ESM-1、PCT水平有助于评估脓毒症患者的病情程度,且2项指标联合检测可有效预测其预后,可为临床治疗方案制订提供依据。

肌腱蛋白-C与内皮细胞特异性分子-1及血管生成素样蛋白4与心房颤动射频消融术后复发的关系

目的:探讨血清肌腱蛋白-C(tenascin-C,TNC)、内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell specific molecule-1,ESM-1)、血管生成素样蛋白4(angiopoietin like protein 4,ANGPTL4)与阵发性心房颤动(paroxysmal atrial fibrillation,PAF)患者射频消融术后复发的关系。方法:选择2016年6月至2018年12月,我院行射频消融术治疗的PAF患者134例,随访3年,根据随访结果分为复发组(n=42)和未复发组(n=92),比较两组血清TNC、ESM-1、ANGPTL4水平,应用多因素Logistic回归分析射频消融术后复发的关联影响因素,并建立联合应用的风险预测模型。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清TNC、ESM-1、ANGPTL对PAF患者射频消融术后复发的预测价值。结果:复发组血清TNC、ESM-1水平显著高于未复发组,ANGPTL4水平显著低于未复发组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,PAF病程≥3年、CHA2DS2-VASc评分≥2分、术中出现心房扑动/房性心动过速、TNC升高、ESM-1升高、ANGPTL4降低是PAF患者射频消融术后复发的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清TNC、ESM-1、ANGPTL4联合检验对PAF患者射频消融术后复发预测的效能最高。结论:PAF射频消融术后复发患者血清TNC、ESM-1水平升高,ANGPTL4水平降低,检测血清TNC、ESM-1、ANGPTL对PAF患者射频消融术后复发具有一定预测价值。

抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定

运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,Westernblot结果表明对内皮细胞中的ESM 1蛋白及细胞培养上清中的ESM 1均可特异性识别。并观察到ESM 1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中。在肾组织中 ,ESM 1定位于血管内皮细胞 ,且肾癌标本中ESM 1阳性表达显著高于正常肾组织。免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性。

肾癌组织中内皮细胞特异性分子-1 mRNA水平及其蛋白表达的关系

目的 探讨内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)mRNA及其蛋白在肾癌组织中的表达及其意义。方法 采用地高辛标记cDNA探针原位杂交方法、免疫组织化学S P法对 4 0例肾癌、2 9例癌旁正常肾组织中ESM 1mRNA及其蛋白进行检测。结果 ESM 1mRNA及其蛋白在正常肾组织和肾癌中均有表达 ,肾癌间质血管内皮中表达明显。肾癌组织中 ,肿瘤血管内皮的ESM 1mRNA和蛋白的高表达率显著高于正常肾组织血管内皮 ;而在肾小管上皮细胞与肾癌细胞中差异无显著性 ,ESM 1mRNA和蛋白表达具有较好的一致性。结论 ESM 1分子可能参与了肾癌的发生。

血清内皮细胞特异性分子-1和血管内皮生长因子与HCV感染相关肝细胞癌相关性研究

目的评估血清内皮细胞特异性分子-1(Endocan)和血管内皮生长因子(VEGF)预测丙型肝炎病毒(HCV)感染相关肝细胞癌(HCC)患者死亡的临床价值。方法选择2017年3月至2018年3月我院收治的102例HCV感染相关HCC患者(HCC组)、88例HCV肝硬化患者(LC组)和60名健康体检者(HC组)。通过ELISA评估血清Endocan和VEGF水平。结果HCC组、LC组、HC组Endocan分别为4244(3121~5875)pg/ml、2099(1323~2809)pg/ml、502(136~879)pg/ml。HCC组、LC组、HC组VEGF水平分别为208(62~513)ng/ml、66(20~137)ng/ml、25(18~31)ng/ml。三组Endocan和VEGF比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC组Endocan与WBC、PLT、ALT、ALP、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、AFP、Child-Pugh分级、肿瘤大小、肿瘤数量、血管癌栓、TNM分期有关(P<0.05)。Endocan诊断HCC价值最高。AFP、Endocan、肿瘤大小是HCC死亡相关风险因素。结论Endocan可能是HCC的诊断标志物,也是HCC患者死亡的良好预测指标。

内皮细胞特异性分子-1预处理干细胞用于心肌梗死治疗的实验研究

目的:探讨内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell-specific molecule 1,ESM-1)预处理的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)植入心肌梗死(MI)大鼠后,是否能增加干细胞的存活,改善MI大鼠的心功能。方法:将用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记的BM-MSCs与ESM-1孵育预处理后,以注射器自心外膜注入SD大鼠梗死心肌周围组织。将30只SD大鼠随机分为3组,即空白组、对照组及预处理组,每组10只大鼠(n=10)。于MI后4周、干细胞移植后4周分别检测各组的超声参数:左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、室间隔厚度(IVST)和左室后壁厚度(LVPWT);用ELISA法定量检测血清脑钠尿肽(BNP)的分泌以及移植细胞的存活情况。结果:干细胞移植后4周,预处理组大鼠心脏超声检测提示LVESD、LVEDD缩小、LVEF提高,BNP含量降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。干细胞移植后4周,预处理组梗死周围心肌组织Brd U+的细胞数明显增多,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:将ESM-1与BM-MSCs共孵育可活化BM-MSCs,促进其增殖、分化,改善心功能。

替格瑞洛对急性STEMI患者血清白细胞介素-6和内皮细胞特异性分子-1浓度的影响

目的观察替格瑞洛对急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者血清白细胞介素(interleukin,IL)-6和内皮细胞特异性分子(endothelial cell specific molecule,ESM)-1浓度的变化并探讨其对患者短期预后的影响。方法入选东南大学附属徐州市中心医院心脏中心首次发病并行急诊经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗的急性STEMI患者107例,按是否服用替格瑞洛抗血小板治疗将患者分为两组,即研究组54例(替格瑞洛组)以及对照组53例(氯吡格雷组)。观察两组入院即刻、服药后24 h、服药后第4天、服药后第7天IL-6和ESM-1浓度变化及相关性,并探讨替格瑞洛对急性STEMI患者短期预后的影响。结果研究组和对照组IL-6和ESM-1浓度在服药后24 h均有明显上升,第4、第7天两者均呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。ESM-1随IL-6浓度增高而升高,ESM-1和IL-6呈正相关(r=0.462,P<0.001)。研究组与对照组缺血终点事件、出血事件以及总不良事件的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论替格瑞洛较氯吡格雷在行急诊PCI治疗STEMI患者的治疗中能够更加迅速地降低细胞炎症反应且可以稳定血管内皮,从而强化动脉粥样硬化斑块的稳定,并降低缺血终点事件的发生率而无明显出血风险,值得临床应用。

涎腺腺样囊性癌中内皮细胞特异性分子-1、整合素β_1的表达及临床意义

目的探讨内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)和整合素β1在涎腺腺样囊性癌(SACC)中的表达及临床意义。方法采用组织芯片(TMA)作为实验平台,运用免疫组织化学和原位分子杂交技术对52例SACC和11例“正常”涎腺组织中ESM-1、整合素β1的表达情况进行观察,并分析二者表达之间的相关性。结果SACC组织中ESM-1表达较涎腺“正常”组织显著增强(P<0.01);整合素β1表达较涎腺“正常”组织显著增强(P<0.01),与肿瘤淋巴结转移和侵犯神经呈正相关(P<0.05);SACC组织ESM-1和整合素β1mRNA表达呈显著正相关(r=0.372,P<0.01)。结论SACC组织中ESM-1和整合素β1的表达上调,二者可能相互协同,共同参与了SACC的发生和发展。

内皮细胞特异性分子-1预处理对小鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

目的:探讨内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)孵育预处理对小鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,为干细胞移植提供实验依据。方法:培养及鉴定骨髓间充质干细胞。提取细胞数及浓度固定的初级培养液中的骨髓间充质干细胞,并分为两组:对照组(不进行预处理)及3个浓度(0.05μg/ml、0.1μg/ml、0.15μg/ml)的ESM-1预处理组。每组设4个复孔,每孔均处理60 min。收集每孔中的条件培养液,检测预处理对骨髓间充质干细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)及碱性磷酸酶(ALP)的影响。结果:ESM-1孵育预处理骨髓间充质干细胞后,其存活率明显增加,而凋亡率显著下降,且骨髓间充质干细胞增殖能力随着ESM-1预处理浓度的增加而逐渐升高,凋亡率却呈相反的下降趋势。ESM-1预处理后,骨髓间充质干细胞分泌VEGF、ALP的水平明显升高,且随着ESM-I浓度的增加,骨髓间充质干细胞分泌VEGF、ALP的水平也相应增加。ESM-1孵育预处理后的骨髓间充质干细胞,细胞形态一致,生长及分化速度加快。结论:ESM-1孵育预处理骨髓间充质干细胞不仅促进骨髓间充质干细胞增殖及降低其凋亡,而且可增加VEGF、ALP的分泌。ESM-1通过活化骨髓间充质干细胞,提高细胞本身的潜能,继而提高其存活、增殖的能力,为临床急性心肌梗死的治疗提供了广泛的应用前景。

人内皮细胞特异性分子-1的转染及其在ECV304中的表达

目的 构建人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)真核表达载体 ,转染人脐静脉内皮细胞系ECV30 4 ,并在ECV30 4中获得表达。方法 将ESM 1cDNA插入真核载体pIRES的多克隆位点中 ,转染人脐静脉内皮细胞。原位杂交 ,免疫组化检测ESM 1基因的表达。结果 构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列分析证实 ,转染后发现ESM 1的表达在转录和蛋白水平都明显的增加。结论 成功构建了人ESM 1真核表达载体和转染了人脐静脉内皮细胞系ECV30 4 ,并获得高水平的表达 ,为进一步研究作好准备。

不同目标血糖水平对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子和内皮细胞特异性分子-1表达的影响

目的：探讨胰岛素控制不同目标血糖水平对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子（TNF-α）、内皮细胞特异性分子（ESM-1）表达的影响以及对肺损伤的作用。方法：40只SD大鼠随机分为5组：假手术组（Sham组）、脓毒症组及血糖控制A组（4.4~6.1 mmol/L）、B组（6.2-8.3 mmol/L）、C组（8.4-10.0 mmol/L）,各8只。盲肠结扎穿孔术后12 h处死,双抗夹心ELISA法检测血清TNF-α、ESM-1水平,光镜观察肺组织病理切片。结果：脓毒症组血清TNF-α、ESM-1的表达明显高于Sham组及各血糖控制组（均P〈0.05）。A组较B组和C组TNF-α、ESM-1的表达明显降低（均P〈0.05）;B组低于C组（P〈0.05）。肺病理组织损伤评分脓毒症组均明显高于sham组及各控制组（均P〈0.05）,A组较B组和C组明显降低（均P〈0.05）。结论：与6.2~8.3 mmol/L及8.4-10.0 mmol/L比较,血糖控制在4.4-6.1 mmol/L明显降低血中TNF-α、ESM-1的表达,且对脓毒症大鼠肺损伤保护作用最明显。

内皮细胞特异性分子-1水平与阿尔茨海默病患者抑郁的相关性

目的探讨内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)水平和阿尔茨海默病(AD)患者抑郁的相关性。方法采用ELISA检测26例伴抑郁的AD患者(研究组)、29例不伴抑郁的AD患者(对照组)及29例健康志愿者(正常组)的ESM-1水平与抑郁症状。采用简易精神状态检查表(MMSE)和老年忧郁量表简明版(SGDS)评估受试者抑郁症状和认知功能。结果研究组ESM-1水平低于对照组和正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。ESM-1水平与SGDS评分呈负相关(r=-0.254,P=0.009),与MMSE评分无相关性(r=0.120,P=0.378)。结论ESM-1与AD患者抑郁相关,能够作为AD患者抑郁程度的生物指标。

MEK转染的内皮细胞表达人内皮细胞特异性分子-1的初步研究

目的 人内皮细胞特异性分子 1(Humanendocellular specificmolecule 1,ESM 1)表达载体的构建及其体外表达 ,表达产物的纯化及多克隆抗体和单克隆抗体的制备。重组MEK基因的真核转染 ,转染的内皮细胞中ESM 1的表达。方法 用PCR方法扩增ESM 1的基因片段 ,扩增产物与T Vector连接 ,构建克隆载体 pGEM T ESM 1。在宿主菌中扩增重组质粒 ,提取质粒并进行酶切纯化 ,将目的基因插入pET 2 8b中构建成表达载体 ,再次转化入大肠杆菌XL1 blue ,蓝白选择、耐药性标记粗筛并挑取阳性克隆 ,经限制性内切酶酶谱分析、DNA序列分析两种方法鉴定。然后提取质粒 ,转化入大肠杆菌BL 2 1,用IPTG诱导表达。表达产物行SDS PAGE ,割下所需条带 ,用电洗脱方法纯化得到所需目的蛋白。免疫新西兰纯种大白兔 ,制备多抗 ,并用免疫双扩散法测定抗体效价 ;免疫BALB/C小鼠 ,制备抗人ESM 1的单克隆抗体。用重组MEK()基因转染人脐静脉内皮细胞ECV30 4 ,加以鉴定 ,并检测转染细胞中ESM 1表达的改变。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为 pET - 2 8b -ESM - 1重组质粒 ,SDS -PAGE证实获得的融合蛋白分子量为 2 4ku ,表达量约占菌体总蛋白的 2 4 %。所得多抗效价为 1:16 (免疫双扩散 ) ,单抗效价为 1:6 0 0 0